小鼠肾足突细胞提取物

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西格
进口、国产
2021-09-28 11:14

上海西格生物科技有限公司

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上海西格生物科技有限公司
韩丽君
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ATCC Number小鼠肾足突细胞提取物
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供应商上海西格
数量45
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运输方式免费包邮
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是否是肿瘤细胞
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产品说明
公司产品仅用于科研细胞现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
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小鼠肾足突细胞提取物是从小鼠原代肾足突细胞提取的,小鼠原代肾足突细胞从正常小鼠肾组织制备。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆,表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。
总RNA制备:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。生物科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。
cDNA制备:纯化后的总RNA来合成cDNA第一链,以50ul总反应体系进行逆转录,体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA,1 ul cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析,保证了产品的质量。
蛋白制备:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人关节软骨组织裂解液,离心去除组织碎片,通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度,组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF,-80度保存。
潜在的应用: <1>已知基因的PCR克隆;<2>mRNA选择性剪接;<3>基因克隆与目标测序;<4> Western and Northern Blot;<5>蛋白检测与蛋白质组学;<6>芯片研究与表达图谱。
产品名称小鼠肾足突细胞提取物
英文名称Mouse Kidney: Normal Kidney Derivatives
货号XG-X10923

细胞培养方法:
1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化;
③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止;
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清;
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基;
⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏:
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)
②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞;
④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

实验事项:
1.小鼠肾足突细胞提取物 试剂准备:所有试剂都必须在使用前达到室温,使用后请立即按照说明书要求保存试剂。 实验操作中请使用一次性的吸头,避免交叉污染。
2. 加样:加样或加试剂时,请注意在吸取标本 / 标准品,酶结合物或底物时,前一个孔与后一个孔加样之间的时间间隔如果太大,将会导致不同的“预孵育"时间,从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。一次加样时间(包括标准品及所有样品)好控制在10分钟内,如标本数量多,推荐使用多道移液器加样。
3. 孵育:为防止样品蒸发,试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内,酶标板加上盖或覆膜,以避免液体蒸发;洗板后应尽快进行下步操作,任何时侯都应避免酶标板处于干燥状态;同时应严格遵守给定的孵育时间和温度。
4. 洗涤:洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在滤纸上充分拍干,勿将滤纸直接放入反应孔中吸水,同时要消除板底残留的液体和手指印,避免影响后的酶标仪读数。
5. 试剂配制:Detection A及Detection B在使用前请手甩几下或少时离心处理,以使管壁或瓶盖的液体沉积到管底。标准品、检测溶液A工作液、检测溶液B工作液请依据所需的量配置使用,并使用相应的稀释液配制,不能混淆。请确配置标准品及工作液,尽量不要微量配置(如吸取检测溶液A时,一次不要小于10μl),以避免由于不准确稀释而造成的浓度误差;请勿重复使用已稀释过的标准品、检测溶液A工作液或检测溶液B工作液。
6. 反应时间的控制:加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化(比如,每隔10分钟),如颜色较深,请提前加入终止液终止反应,避免反应过强从而影响酶标仪光密度读数。
7. 底物:底物请避光保存,在储存和温育时避免强光直接照射。
建议检测样品时均设双孔测定,以保证检测结果的准确性。
如标本中待测物质含量过高,请先稀释后再测定,计算时请后乘以稀释倍数。


ME-180 人子宫颈表皮癌细胞4-(己氧基)苯(>98.0%(GC))4-(Hexyloxy)benzaldehyde质量规格:>98.0%(GC)
NCI-H292人肺癌细胞(结转移) NCI-H292 human lung cancer cells (lymph node metastasis) RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS4-庚氧基苯(>98.0%(GC)(T))4-Heptyloxybenzaldehyde质量规格:>98.0%(GC)(T)
KITLG Protein Mouse 重组小鼠 SCF / C-kit ligand 蛋白 (His 标签)4-差向-地美环素4-epi-Demeclocycline质量规格:美国进口
人葡萄膜色素细胞;UM 人气管平滑肌细胞完全培养基 100mL头孢喹诺Cefquinome质量规格:美国进口
急性T细胞白血病细胞;TALL-104头孢噻呋Ceftiofur质量规格:美国进口
PC-3M(人前列腺癌细胞) 5×106cells/瓶×2氧化白藜芦醇质量规格:≥98%,BROxyresveratrol

HCAEC Pellet 人冠状动脉内皮细胞团块 > 1 mio.cells 口腔角质细胞生长添加物OKGS乙酰化白藜芦醇(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Acetyl-resveratrol
CL-0316A7r5(大鼠胸大动脉平滑肌细胞)5×106cells/瓶×2乙酰化白藜芦醇质量规格:≥98%,BRAcetyl-resveratrol
CD63 Others Rat 大鼠 CD63 / Tspan-30 / Teaspanin-30 人细胞裂解液 (阳性对照) Fmoc-L-丙氨酸质量规格:>98%,BRFmoc-Ala-OH
人海马趾星形胶质细胞总RNAHA-h NAFmoc-L-苯丙氨酸质量规格:0.98Fmoc-Phe-OH
IFNAR2 Others Human 人 IFNAR2 / IFNABR 人细胞裂解液 (阳性对照) 2,3,6,7,10,11-六甲氧基三亚苯(>95.0%(GC))质量规格:>95.0%(GC)2,3,6,7,10,11-Hexamethoxytriphenylene

人细胞;Hela2,3,6,7,10,11-六羟基三亚苯水合物(>95.0%(HPLC))质量规格:>95.0%(HPLC)2,3,6,7,10,11-Hexahydroxytriphenylene Hydrate
APOL1 Others Human 人 APOL1 / apolipoprotein L1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 2,3,6,7,10,11-六乙酰氧基三亚苯(>98.0%(HPLC))质量规格:>98.0%(HPLC)2,3,6,7,10,11-Hexaacetoxytriphenylene
CL-0421RAG(小鼠肾腺癌细胞)5×106cells/瓶×22,3,6,7,10,11-六溴三亚苯(>98.0%(T))质量规格:>98.0%(T)2,3,6,7,10,11-Hexabromotriphenylene
人羊膜上皮细胞 双位点HC-KIT受体细胞株,DMF7细胞 BLO-11(小鼠骨骼成纤维细胞)1-溴-4-正辛基苯(>90.0%(GC))质量规格:>90.0%(GC)1-Bromo-4-n-octylbenzene
小鼠肾足突细胞提取物大鼠肾小球内皮细胞完全培养基 100mL双甘氨二肽Gly-Gly质量规格:>99%,BR

PC 61 5.3 [PC 61; PC 61.5.3]杂交瘤细胞CD25 PC 615.3 [PC 61; PC 61.5.3] hybridoma cell line CD25 DMEM+10% Hyclone 灭活血清重组人胰岛素Human recombinant Insulin质量规格:效价测定
IGFBP7 Protein Human 重组人 IGFBP7 / IBP-7 蛋白 (His 标签)人胰岛素Human Insulin质量规格:测定用
HAN(人羊膜细胞) 5×106cells/瓶×2 雪旺细胞培养基SCM硝酸舍他康唑Sertaconazole nitrate质量规格:>98%,BR
肾小球内皮细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)醋酸依降钙素 Elcatonin Acetate质量规格:BR
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布; 
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片); 
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时; 
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中; 
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。


小鼠肾足突细胞提取物是从小鼠原代肾足突细胞提取的,小鼠原代肾足突细胞从正常小鼠肾组织制备。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆,表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。
总RNA制备:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。生物科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。
cDNA制备:纯化后的总RNA来合成cDNA第一链,以50ul总反应体系进行逆转录,体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA,1 ul cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析,保证了产品的质量。
蛋白制备:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人关节软骨组织裂解液,离心去除组织碎片,通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度,组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF,-80度保存。
潜在的应用: <1>已知基因的PCR克隆;<2>mRNA选择性剪接;<3>基因克隆与目标测序;<4> Western and Northern Blot;<5>蛋白检测与蛋白质组学;<6>芯片研究与表达图谱。
产品名称小鼠肾足突细胞提取物
英文名称Mouse Kidney: Normal Kidney Derivatives
货号XG-X10923

细胞培养方法:
1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化;
③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止;
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清;
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基;
⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏:
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)
②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞;
④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

实验事项:
1.小鼠肾足突细胞提取物 试剂准备:所有试剂都必须在使用前达到室温,使用后请立即按照说明书要求保存试剂。 实验操作中请使用一次性的吸头,避免交叉污染。
2. 加样:加样或加试剂时,请注意在吸取标本 / 标准品,酶结合物或底物时,前一个孔与后一个孔加样之间的时间间隔如果太大,将会导致不同的“预孵育"时间,从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。一次加样时间(包括标准品及所有样品)好控制在10分钟内,如标本数量多,推荐使用多道移液器加样。
3. 孵育:为防止样品蒸发,试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内,酶标板加上盖或覆膜,以避免液体蒸发;洗板后应尽快进行下步操作,任何时侯都应避免酶标板处于干燥状态;同时应严格遵守给定的孵育时间和温度。
4. 洗涤:洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在滤纸上充分拍干,勿将滤纸直接放入反应孔中吸水,同时要消除板底残留的液体和手指印,避免影响后的酶标仪读数。
5. 试剂配制:Detection A及Detection B在使用前请手甩几下或少时离心处理,以使管壁或瓶盖的液体沉积到管底。标准品、检测溶液A工作液、检测溶液B工作液请依据所需的量配置使用,并使用相应的稀释液配制,不能混淆。请确配置标准品及工作液,尽量不要微量配置(如吸取检测溶液A时,一次不要小于10μl),以避免由于不准确稀释而造成的浓度误差;请勿重复使用已稀释过的标准品、检测溶液A工作液或检测溶液B工作液。
6. 反应时间的控制:加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化(比如,每隔10分钟),如颜色较深,请提前加入终止液终止反应,避免反应过强从而影响酶标仪光密度读数。
7. 底物:底物请避光保存,在储存和温育时避免强光直接照射。
建议检测样品时均设双孔测定,以保证检测结果的准确性。
如标本中待测物质含量过高,请先稀释后再测定,计算时请后乘以稀释倍数。


ME-180 人子宫颈表皮癌细胞4-(己氧基)苯(>98.0%(GC))4-(Hexyloxy)benzaldehyde质量规格:>98.0%(GC)
NCI-H292人肺癌细胞(结转移) NCI-H292 human lung cancer cells (lymph node metastasis) RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS4-庚氧基苯(>98.0%(GC)(T))4-Heptyloxybenzaldehyde质量规格:>98.0%(GC)(T)
KITLG Protein Mouse 重组小鼠 SCF / C-kit ligand 蛋白 (His 标签)4-差向-地美环素4-epi-Demeclocycline质量规格:美国进口
人葡萄膜色素细胞;UM 人气管平滑肌细胞完全培养基 100mL头孢喹诺Cefquinome质量规格:美国进口
急性T细胞白血病细胞;TALL-104头孢噻呋Ceftiofur质量规格:美国进口
PC-3M(人前列腺癌细胞) 5×106cells/瓶×2氧化白藜芦醇质量规格:≥98%,BROxyresveratrol

HCAEC Pellet 人冠状动脉内皮细胞团块 > 1 mio.cells 口腔角质细胞生长添加物OKGS乙酰化白藜芦醇(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Acetyl-resveratrol
CL-0316A7r5(大鼠胸大动脉平滑肌细胞)5×106cells/瓶×2乙酰化白藜芦醇质量规格:≥98%,BRAcetyl-resveratrol
CD63 Others Rat 大鼠 CD63 / Tspan-30 / Teaspanin-30 人细胞裂解液 (阳性对照) Fmoc-L-丙氨酸质量规格:>98%,BRFmoc-Ala-OH
人海马趾星形胶质细胞总RNAHA-h NAFmoc-L-苯丙氨酸质量规格:0.98Fmoc-Phe-OH
IFNAR2 Others Human 人 IFNAR2 / IFNABR 人细胞裂解液 (阳性对照) 2,3,6,7,10,11-六甲氧基三亚苯(>95.0%(GC))质量规格:>95.0%(GC)2,3,6,7,10,11-Hexamethoxytriphenylene

人细胞;Hela2,3,6,7,10,11-六羟基三亚苯水合物(>95.0%(HPLC))质量规格:>95.0%(HPLC)2,3,6,7,10,11-Hexahydroxytriphenylene Hydrate
APOL1 Others Human 人 APOL1 / apolipoprotein L1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 2,3,6,7,10,11-六乙酰氧基三亚苯(>98.0%(HPLC))质量规格:>98.0%(HPLC)2,3,6,7,10,11-Hexaacetoxytriphenylene
CL-0421RAG(小鼠肾腺癌细胞)5×106cells/瓶×22,3,6,7,10,11-六溴三亚苯(>98.0%(T))质量规格:>98.0%(T)2,3,6,7,10,11-Hexabromotriphenylene
人羊膜上皮细胞 双位点HC-KIT受体细胞株,DMF7细胞 BLO-11(小鼠骨骼成纤维细胞)1-溴-4-正辛基苯(>90.0%(GC))质量规格:>90.0%(GC)1-Bromo-4-n-octylbenzene
小鼠肾足突细胞提取物大鼠肾小球内皮细胞完全培养基 100mL双甘氨二肽Gly-Gly质量规格:>99%,BR

PC 61 5.3 [PC 61; PC 61.5.3]杂交瘤细胞CD25 PC 615.3 [PC 61; PC 61.5.3] hybridoma cell line CD25 DMEM+10% Hyclone 灭活血清重组人胰岛素Human recombinant Insulin质量规格:效价测定
IGFBP7 Protein Human 重组人 IGFBP7 / IBP-7 蛋白 (His 标签)人胰岛素Human Insulin质量规格:测定用
HAN(人羊膜细胞) 5×106cells/瓶×2 雪旺细胞培养基SCM硝酸舍他康唑Sertaconazole nitrate质量规格:>98%,BR
肾小球内皮细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)醋酸依降钙素 Elcatonin Acetate质量规格:BR
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布; 
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片); 
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时; 
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中; 
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。