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- 上海博湖生物科技有限公司
- Stbl3 感受态细胞100ul*50
¥800 - 1200
博湖
进口、国产
2021-09-29 08:59
我要认领上海博湖生物科技有限公司
韩丽君
3004987436@qq.com
产品属性
产品说明
产品名称：Stbl3 感受态细胞100ul*50
规格：100ul*50
分类：克隆感受态细胞
保存条件（保质期）： -80℃（6个月）
Stbl3 感受态细胞100ul*50培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件：气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
Stbl3 感受态细胞100ul*50注意事项：
1. 加入 DNA 时体积不应大于感受态体积的 1/10。--
2. 电击感受态细胞加入电击杯应避免产生气泡，气泡会增加弧光放电风险。
3. 当 DNA 不纯或存在盐，乙醇，蛋白及缓冲液等污染时，转化效率急剧下降。
4. 电击杯里的离子可增加溶液的电导，增大在含有细胞和 DNA 的溶液中产生电流和弧光放电的风险。
5. 若转化大质粒或想获得较高转化效率，推荐使用高纯质粒提取试剂盒提取质粒。质粒增大一倍，转化效率下降一个数量级。 --
6. 对于连接产物转化，转化前乙醇沉淀 DNA 后用适量 TE 缓冲液 (10 mM Tris HCl, pH7.5; 1 mM EDTA)重悬产物，保证 DNA 浓度不超过 100 ng/μl。过高浓度连接产物或过大体积连接产物会降低转化效率，增加弧光放电的风险。
7. 混入质粒时应轻柔操作，吸取感受态细胞时不可用孔径过小的枪头 (普通 200ul 枪头应剪去枪头尖 0.6cm) 避免用
力过猛，以免剪切力过大损伤细胞膜，降低转化效率。转化高浓度的质粒或连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
8.电击感受态细胞保存在-80℃以下，高于-80℃超期储存会导致转化效率会下降。
Stbl3 感受态细胞100ul*50操作说明：
1. 0.1cm 电击杯和杯盖从储存液中拿出倒置于干净的吸水纸上 5 分钟，待其沥干水分，正置 5 分钟，使乙醇充分挥发，
待乙醇挥发干净立即插入冰中，压实冰面，电极杯顶离冰面 0.5 cm 以方便盖上杯盖，冰中静置 5 分钟充分降温。
2. 取-80℃保存的 XL1-Blue 电击感受态细胞插入冰中 5 分钟，待其融化，加入目的 DNA (质粒或连接产物)并用手EP 管底轻轻混匀，避免产生气泡，立即插入冰中。 --
A. 测定转化效率使用 1 μl 10 pg/μl 的对照质粒 pUC19； --
B. 对于连接产物，请用乙醇沉淀 DNA 后加入适量 T 缓冲液 (10mM Tris HCl, pH7.5; 1mM EDTA)重悬，DNA 浓度不超过 100ng/μl，体积不超过 5μl/50μl 感受态。--
3. 用 200 μl 枪头将感受态-DNA 混合物快速移到电击杯中，避免产生气泡，盖上杯盖--。
4. 启动电转仪，设置参数：C=25 μF，PC=200 Ω，V=1.8 kV (此为 BioRad 电转仪推荐参数，也可按所用电转仪推荐的参数操作），将电击杯快速放入电转槽中，电击完成快速插入冰中。--
5. 2 分钟后从冰中取出电击杯，放室温，加入 700 μl 不含抗生素的无菌 S.O.C. 培养基（室温），用 1ml 枪吹吸电击杯底部数次混匀后，转移到 50ml 离心管（BD Falcon50ml 锥形离心管等），向离心管中补加 S.O.C. 培养基至 5ml。 37℃，225 rpm 复苏 60 分钟。--
6. 5000rpm 离心一分钟收菌，重悬后取 100-200 μl 涂布到含相应抗生素的 S.O.C 平板上（因菌量较大，若全部涂板请选用直径 15cm 培养皿 2-5 个）。将平板倒置放于 37℃培养箱过夜培养 13-17 小时。
MDA-MB-436人腺癌细胞 MDA-MB-436 human breast adenocarcinoma cells L-15培养基+10%FBS右美沙芬-d3Dextromethorphan-d3质量规格：美国进口FAM3C Protein Human 重组人 FAM3C / ILEI 蛋白 (Fc 标签)贝沙罗汀-d4Bexarotene d4质量规格：美国进口小鼠雪旺细胞(MSC)(5×105) MDA-MB-231, 人癌细胞 Human二氢酮洛芬(非对映)Dihydro Ketoprofen (Mixture of Diastereomers)质量规格：美国进口中国仓鼠卵巢细胞K1(亚系克隆);CHO-K1二氢酮洛芬β-D-葡萄糖苷酸,非对映Dihydro Ketoprofen β-D-Glucuronide, Mixture of Diastereomers质量规格：美国进口PNLIPRP1 Others Human 人 PNLIPRP1 / PLRP1 人细胞裂解液 (阳性对照) 来氟米特3-异构体Leflunomide 3-Isomer质量规格：美国进口
小鼠T淋巴细胞;Cl.Ly1+2-/9 小鼠肝动脉内皮细胞完全培养基 100mL大内皮素-1（1-38），人Big Endothelin-1 (1-38), human质量规格：>95%,BRMLF, 小鼠淋巴成纤维细胞 Mouse大内皮素-1 （1-39），猪Big Endothelin -1 (1-39),porcine质量规格：>95%,BRFZD10 Others Mouse 小鼠 FZD10 / Frizzled-10 / CD350 人细胞裂解液 (阳性对照) 脑钠素-32，大鼠BNP-32, rat质量规格：>95%,BR人结直肠腺癌细胞;LS 174T [LS174T]铃蟾肽Bombesin质量规格：>95%,BRTLR2 Others Rat 大鼠 TLR2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 缓激肽Bradykinin质量规格：>95%,BR
柚皮素查尔酮 HPLC≥98% 20mg Mouse50%complemehemolysis,CH50ELISAKit小鼠血清总补体(CH50)ELISA试剂盒规格：96T/48T右旋四氢巴马汀 HPLC≥98% 20mg Mouse50%complemehemolysis,CH50ELISA试剂盒小鼠血清总补体(CH50)ELISA试剂盒规格：96T/48T鱼藤素 HPLC≥98% 20mg Mouse5-Hydroxyyptamine,5HTELISAKit小鼠5羟色胺(5-HT)ELISA试剂盒规格：96T/48T羽扇豆醇 HPLC≥98% 20mg Mouse5-Hydroxyyptamine,5HTELISA试剂盒小鼠5羟色胺(5-HT)ELISA试剂盒规格：96T/48T羽扇烯酮 HPLC≥98% 20mg Mouse5-Nucleotidase,5-ELISA试剂盒小鼠5核苷酸酶(5-)ELISA试剂盒规格：96T/48T玉米黄素 HPLC≥85% 20mg Mouse6-keto-prostaglandin,6-K-PGELISAKit小鼠6同前列腺素(6-K-PG)ELISA试剂盒规格：96T/48T育亨宾碱 HPLC≥98% 20mg Mouse6-keto-prostaglandin,6-K-PGELISA试剂盒小鼠6同前列腺素(6-K-PG)ELISA试剂盒规格：96T/48T愈创甘油醚 HPLC≥98% 20mg Mouse6-keto-prostaglandinF1a,6-K-PGF1aELISAKit小鼠6同前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)ELISA试剂盒规格：96T/48T愈创木酚 HPLC≥98% 20mg Mouse6-keto-prostaglandinF1a,6-K-PGF1aELISA试剂盒小鼠6同前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)ELISA试剂盒规格：96T/48T鸢尾苷 HPLC≥98% 20mg Mouse8-Hydroxy-desoxyguanosine,8-OHdGELISAKit小鼠8羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)ELISA试剂盒规格：96T/48T
Stbl3 感受态细胞100ul*50Mouse50%complemehemolysis,CH50小鼠血清总补体(CH50)ELISA试剂盒规格：96T/48T 柚皮素查尔酮 HPLC≥98% 20mgMouse50%complemehemolysis,CH50ELISA试剂盒小鼠血清总补体(CH50)ELISA试剂盒规格：96T/48T 右旋四氢巴马汀 HPLC≥98% 20mgMouse5-Hydroxyyptamine,5HT小鼠5羟色胺(5-HT)ELISA试剂盒规格：96T/48T 鱼藤素 HPLC≥98% 20mgMouse5-Hydroxyyptamine,5HTELISA试剂盒小鼠5羟色胺(5-HT)ELISA试剂盒规格：96T/48T 羽扇豆醇 HPLC≥98% 20mgMouse5-Nucleotidase,5-ELISA试剂盒小鼠5核苷酸酶(5-)ELISA试剂盒规格：96T/48T 羽扇烯酮 HPLC≥98% 20mgMouse6-keto-prostaglandin,6-K-PG小鼠6同前列腺素(6-K-PG)ELISA试剂盒规格：96T/48T 玉米黄素 HPLC≥85% 20mgMouse6-keto-prostaglandin,6-K-PGELISA试剂盒小鼠6同前列腺素(6-K-PG)ELISA试剂盒规格：96T/48T 育亨宾碱 HPLC≥98% 20mgMouse6-keto-prostaglandinF1a,6-K-PGF1a小鼠6同前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)ELISA试剂盒规格：96T/48T 愈创甘油醚 HPLC≥98% 20mgMouse6-keto-prostaglandinF1a,6-K-PGF1aELISA试剂盒小鼠6同前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)ELISA试剂盒规格：96T/48T 愈创木酚 HPLC≥98% 20mgMouse8-Hydroxy-desoxyguanosine,8-OHdG小鼠8羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)ELISA试剂盒规格：96T/48T 鸢尾苷 HPLC≥98% 20mg 平台客服
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