细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V-FITC/PI)规格价格,详情介绍-960化工网

细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V-FITC/PI)规格

价格：¥800 - 3800

品牌：研生

产地：进口

最新更新日期：2021-09-29 12:06

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上海研生实业有限公司

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产品属性

数量

英文名	Annexin V-FITC/PI Apoptosis Detection Kit

CAS号

详见说明书

保质期

详见说明书

供应商

上海研生

保存条件

低温冷藏

规格

20 rxn

产品说明

【培养指南】
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
中文名称：细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V-FITC/PI)规格
英文名称：Annexin V-FITC/PI Apoptosis Detection Kit
产品规格：20 rxn
发货周期：1～3天
AnexinV-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒是用FITC标记了的AnexinV作为探针，来检测细胞早期凋亡的发生，可用荧光显微镜、流式细胞仪或其他荧光检测设备进行检测。
其检测原理为在正常的活细胞中，磷脂酰丝氨酸（phosphotidylserine，PS）位于细胞膜的内侧，但在早期凋亡的细胞中，PS从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面，暴露在细胞外环境中。Anexin-Ⅴ（膜联蛋白-V）是一种分子量为35-36KD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白，能与PS高亲和力结合。可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。
另外，本试剂盒中还提供了碘化丙啶（PropidiumIodide，PI）用来区分存活的早期细胞和坏死或晚期凋亡细胞。PI是一种核酸染料，它不能透过正常细胞或早期凋亡细胞的完整的细胞膜，但可以透过凋亡晚期和坏死细胞的细胞膜而使细胞核染红。因此，将AnexinV与PI联合使用时，PI则被排除在活细胞（AnexinV-/PI-）和早期凋亡细胞（AnexinV+/PI-）之外，而晚期凋亡细胞和坏死细胞同时被FITC和PI结合染色呈现双阳性（AnexinV+/PI+）。
储存条件4℃，有效期一年。
操作步骤(仅供参考)：
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液，用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
②加入少量源叶生物 Trypsin-EDTA solution，略盖过细胞即可，室温放置 0.5～2min，不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足，则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落，直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000～2000g 离心 1min，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。
【细胞冻存】
细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V-FITC/PI)规格待细胞生长状态良好时，可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
【复苏的原则】
产品名称快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货，全国统一价格，本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞的种类：
第一种：
是冻存产品，由液氮直接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作，不同的实验室采用的方法略有差异，但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
4-溴-2-基噻唑锆/二锆/锆酸酐/颜料白16/锆(Ⅳ)/Zirconium dioxide
N-[6--5-(2-氧氧基)[2,2'-二嘧啶]-4-基]-4-叔酰锆/偏锆酸/Zirconium hydroxide
(R)-3-啶酸酯-L-酸盐二化钼/Molybdenum disulfide
4,6-二-5-(2-氧氧基)-2,2-二嘧啶三钼/钼(VI)/钼酐/无水钼酸/Molybdic anhydride
N-酰-D-亮酸钼/钼/Molybdenum
瑞替加滨铋/式铋/Bismuth sulfate
(2E)-3-(6-基-3-啶基)-2-烯酸次酸铋/式酸铋/式酸铋/酸氧铋/西班牙白/次苍/Bismuth subnitrate
2-基-4-溴-5-酸次碳酸铋/式碳酸铋/碳酸氧铋/碳酸铋/碳酸二二铋/Bismuth subcarbonate
立班丝铋/三二铋/Bismuthous oxide
酸香茅酯铋/铋/Bismuth
细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V-FITC/PI)规格一步式广谱DNAout 规格HPLC≥98%;20mgn-Butylidenephthalide
DNA样品污染去除规格HPLC≥98%;20mgEugenol
PCR抑制物清除剂规格HPLC≥98%;20mgSyringic acid
动态显色法内毒素定量试剂盒（见关联产品）规格HPLC≥98%;20mgScopolamine butylbromide
动态浊度法内毒素定量试剂盒（见关联产品）规格HPLC≥98%;20mgDryocrassin ABBA
非酶RNA清除剂1.0 规格HPLC≥98%;20mgScopolin
非酶RNA清除剂2.0 规格HPLC≥98%;20mgScopolamine
非酶多糖清除剂（DNA专用）规格HPLC≥98%;20mgScopoletin
固相内毒素清除剂（100g）规格HPLC≥98%;5mgOridonin
固相内毒素清除剂（500g）规格HPLC≥98%;20mgponicidin
内毒素清除试剂盒规格HPLC≥98%;20mgGaultherin
内毒素清除专用亲和介质（5 mL）规格HPLC≥98%;20mgIlexgenin O
内毒素清除专用亲和介质（50 mL）规格HPLC≥98%;20mgIlexgenin A
凝胶法内毒素半定量试剂盒规格HPLC≥98%;20mgHelicid
细菌内毒素标准品（15 EU/支）规格HPLC≥98%;20mgStigmasterol
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件：气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。