植物木葡聚糖内转糖苷酶(XET)活性ELISA试剂盒

¥1000
上海雅吉生物科技有限公司
2021-09-29 18:17

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上海雅吉生物科技有限公司
高杰
15821073967 021-34661275
yajikit@163.com
58268971
产品属性
样本血清
数量大量
适应物种植物
检测方法elisa
检测限6个月
供应商上海雅吉生物科技有限公司
规格48T/96T
产品说明

植物木葡聚糖内转糖苷酶(XET)酶联免疫分析


试剂盒使用说明书

本试剂盒仅供研究使用。

检测范围:96T
20U/L -800 U/L
使用目的:
本试剂盒用于测定植物组织,细胞及其它相关样本中木葡聚糖内转糖苷酶XET活性。实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中植物木葡聚糖内转糖苷酶XET水平。用纯化的植物木葡聚糖内转糖苷酶XET抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入植物木葡聚糖内转糖苷酶(XET,再与HRP标记的木葡聚糖内转糖苷酶XET抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。TMB
HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的植物木葡聚糖内转糖苷酶XET呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度OD通过标准曲线计算样品中植物木葡聚糖内转糖苷酶(XET)活性浓度。
试剂盒组成
130 倍浓缩洗涤液20ml×1 7终止液6ml×1
2酶标试剂6ml×1 8标准品(1600U/L0.5ml×1
3酶标包被板12 孔×8 9标准品稀释液1.5ml×1
4样品稀释液6ml×1 10说明书1
5显色剂 A 6ml×1 11封板膜2
6显色剂 B 6ml×1/12密封袋1
植物木葡聚糖内转糖苷酶(XET)酶联免疫分析标本要求
  1. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
  2. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤
  1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
800U/L5 号标准品150µl 的原倍标准品加入 150µl 标准品稀释液
400U/L4 号标准品150µl 5 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
200U/L3 号标准品150µl 4 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
100U/L2 号标准品150µl 3 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
50U/L1 号标准品150µl 2 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
  1. 加样:分别设空白孔空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同、标准孔、测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50µl,待测样品孔中先加样品稀释液40µl
然后再加待测样品10µl样品最终稀释度为5 。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
  1. 温育:用封板膜封板后置37℃温育 30分钟。
  2. 配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
  3. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
  4. 加酶:每孔加入酶标试剂50µl,空白孔除外。
  5. 温育:操作同3
  6. 洗涤:操作同5
  7. 显色:每孔先加入显色剂A50µl,再加入显色剂B50µl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色
10 分钟.
  1. 终止:每孔加终止液50µl,终止反应(此时蓝色立转黄色
  2. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度OD测定应在加终止液后15分钟以内进行。
植物木葡聚糖内转糖苷酶(XET)酶联免疫分析操作程序总结:




计算
以标准物的浓度为横坐标,OD 值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的
OD 值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD 值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD 值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,

即为样品的实际浓度。注意事项
  1. 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
  2. 浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
  3. 各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
  4. 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高样本OD大于标准品孔第一孔的OD,请先用样品稀释液稀释一定倍数n后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数×n×5
  5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
  6. 底物请避光保存。
  7. 严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
  8. 所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
  9. 本试剂不同批号组分不得混用。保存条件及有效期
  1. 试剂盒保存:;2-8℃。
  2. 有效期:6个月