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北京百奥莱博专业生产销*(代"售")柱式小量血液基因组DNA提取试剂盒(0.1～20ml)供应，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：柱式小量血液基因组DNA提取试剂盒(0.1～20ml)供应
编号：WE0175
规格：50次|200次
产地：国产|进口
英文名：Blood Genomic DNA Mini Extraction Kit(0.1-1ml)
品牌：百奥莱博
本试剂盒适用于从新鲜或冷冻的全血(用柠檬酸盐、EDTA或肝素等抗凝剂处理过的血液样品)、血浆、血清、血沉棕黄层、淋巴细胞、无细胞体液等样本中提取总DNA，包括基因组DNA，线粒体DNA及病毒DNA。本品可以处理0.1-1ml的全血，最高得率可达30μg，可纯化获得大小为100 bp到50 kb的DNA，纯化的DNA产量高、质量好，最大限度去除蛋白、色素、脂类及其他抑制性杂质污染，可直接用于PCR、荧光定量PCR、酶切和Southern Blot等实验。

试剂盒组成：

组份	50次	200次
Buffer RCL	125ml	2×260ml
Buffer GR	15ml	50ml
Buffer GL	15ml	50ml
Buffer GW1(浓缩液)	13ml	52ml
Buffer GW2(浓缩液)	15ml	50ml
Buffer GE	15ml	60ml
蛋白酶K	12.5 mg	50 mg
蛋白酶K 储存液	1.25ml	5ml
吸附柱 DM及收集管	50套	200套

产品特点
1、纯度高：提取的基因组DNA可直接用于下游PCR、荧光定量PCR、酶切等各种实验。
2、提取量大：可从0.1-1.0ml的全血中提取基因组DNA。
3、兼容性强：适用于处理各种抗凝血液和细胞样本。

自备试剂：无水乙醇

实验前准备及重要注意事项/strong>：
1、向蛋白酶K 中加入蛋白酶K 储存液使其溶解，-20℃保存。配制好的蛋白酶K 勿长时间室温放置，避免反复冻融，以免影响其活性。
2、样品应避免反复冻融，否则会导致提取的DNA片段较小且提取量也下降。
3、本试剂盒最多可以提取0.1-1ml全血样品或1×107个白细胞。
4、第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明先在Buffer GW1和Buffer GW2中加入无水乙醇。
5、使用前请检查Buffer GL是否出现结晶或者沉淀，如有结晶或者沉淀，请将Buffer GL于56℃水浴孵育重新溶解。
6、试剂盒中的Buffer RCL浑浊后不能继续使用。

操作步骤：
1、样品处理：
1.1、提取200 ul血液样品时，向离心管(自备)中加入样本后，可直接进行下一步实验。
1.2、当血液样本量小于200μl时，加入Buffer GR补足至200μl，再进行下一步实验。
1.3、当血液样本量超过200μl时，加入1~2.5倍体积的Buffer RCL，轻轻涡旋或颠倒混匀，12000rpm(~～13400×g)离心1分钟，小心吸弃上清液，如果沉淀中还有红色，可以重复以上步骤一次。然后向沉淀中加入200μl Buffer GR，震荡至彻底混匀,再进行下一步实验。
1.4、如果处理血液样本为禽类、鸟类、两栖类或更低级生物的抗凝血，其红细胞为有核细胞，血液样本量为5-20μl，可加入Buffer GR，补足至200μl后进行后续实验。
注意：如果下游试验对RNA敏感，可加入4μl RNase A(100mg/ml)溶液，震荡15秒，室温放置5分钟。RNase A本试剂盒并未提供，如需要可单独向本公司订购，货号：WE0225S。
2、向以上溶液中加入20μl 蛋白酶K ，混匀。
3、加入200μl Buffer GL，震荡至彻底混匀。
注意：不要将蛋白酶K 和Buffer GL进行预混。
4、56℃孵育10分钟，其间颠倒混匀数次。
注意：孵育10分钟DNA的产量已经达到最大，继续延长孵育时间对DNA产量和纯度没有影响。
5、加入200μl无水乙醇，颠倒混匀数次。短暂离心，使管壁和壁盖上的液体集中到管底。
6、将步骤5所得溶液全部加入到已装入收集管的吸附柱DM中，若一次不能加完溶液，可分多次转入。12000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
7、向吸附柱中加入500μl Buffer GW1(使用前检查是否加入无水乙醇), 12000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
注意：如果提取样品是小鼠或猴子等血红素难以除去的种属的血液基因组，建议重复步骤7。
8、向吸附柱中加入500μl Buffer GW2(使用前检查是否加入无水乙醇)，12000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
注意：如需进一步提高DNA纯度，可重复步骤8。
9、12000rpm离心2分钟，倒掉收集管中的废液。将吸附柱置于室温数分钟，以彻底晾干。
注意：这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除，乙醇的残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR 等)。
10、将吸附柱置于一个新的离心管(自备)中，向吸附柱的中间部位悬空加入50-200μl Buffer GE或灭菌水，室温放置2-5分钟，12000rpm离心1分钟，收集DNA溶液，-20℃保存DNA。
注意：
1)如果下游实验对pH值或EDTA敏感，可以用灭菌水洗脱。洗脱液的pH值对洗脱效率有很大影响，若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5(可以用NaOH将水的pH值调到此范围)，pH值低于7.0时洗脱效率不高。
2)如果要提高DNA的终浓度，可以将所得的DNA洗脱液重新加至吸附膜上，室温放置2-5分钟，12000rpm离心1 分钟。
3)因为保存在水中的DNA会受到酸性水解作用的影响，如需长期保存，推荐用Buffer GE洗脱并于-20℃保存。

储存条件：室温(15～30℃)。

关于柱式小量血液基因组DNA提取试剂盒(0.1～20ml)供应的更详细说明，请致电我公司咨询，我们将以最饱满的热情为您提供解答，此外，我公司专业供应下列产品：
硫*(代"酸")酯酶 Sodium taurocholate hydrate 9016-17-5
ARB11932 大鼠17羟孕酮(17-OHP)Elisa定量检测 Rat 17-hydroxyprogesterone,17-ohp ELISA KIT
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9049-37-0 Polygalacturonic acid sodiu*(代"m") salt?多聚半乳糖醛酸
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SSPE缓冲粉剂(20×) 1L
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BL1379 4×SDS-PAGE浓缩胶缓冲液(PH=6.8)
去*抗坏血酸 Fmoc-D-Arg(Pbf)-OH 490-83-5
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ARB13230 小鼠粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC)Elisa定量检测 Mouse mucin-5 subtype ac,muc5ac ELISA KIT
9007-34-5 Collgen TypeⅡ 胶原蛋白Ⅱ型(鸡)
ARB12039 大鼠一氧化*(代"氮")合成酶(NOS)尿液中含量检测 Rat nitric oxide synthase,nos ELISA KIT
ARB12483 大鼠前降*素(PCT)含量测试 Rat procalcitonin，pct ELISA KIT
ARB10627 人血清/糖皮质激素调节激酶2(SGK2)ELISA代测服务 Human serum/glucocorticoid regulated kinase 2,sgk2 isa kit
BL1247 D2000 DNA Ladder
柱式小量血液基因组DNA提取试剂盒(0.1～20ml)供应关键词：WE0175,Blood Genomic DNA Mini Extraction Kit(0.1-1ml),柱式小量血液基因组DNA提取试剂盒,柱式小量血液基因组DNA提取试剂盒(0.1～20ml)

*化乙酰胆碱 L-Histidine methyl ester dihydrochloride 60-31-1
内源性链亲和素封闭液 100ml
BL0884 兔抗猴IgG免疫血清 0.5ml
CYB165031 生物素化人IgG
ARB10670 人血管紧张素Ⅱ受体2抗体(AT2R-Ab)酶标法分析 Human angiotensin Ⅱ receptor 2 antibody,at2r-ab ELISA KIT
92-31-9 Toluidine Blue 甲**蓝
ARB11773 人解脲脲原体抗体(UU-Ab)Elisa定量检测 Human ureaplasma urealyticum antibody,uu-ab ELISA KIT
2′-甲氧基尿苷 Ciprofloxacin hydrochloride 2140-76-3
BTN90205 RNase A干粉 RNase A Powder
PY03-317 3%*化*甘露醇试验培养基 250克
脱氧核糖核酸(鱼精) Z-Ser-OH
PUC19质粒 Vanillin
ARB13985 猪基质金属蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)免费代测 Porcine tissue inhibitors of metalloproteinase 1,timp-1 ELISA KIT
柱式小量血液基因组DNA提取试剂盒(0.1～20ml)供应关键词：WE0175,Blood Genomic DNA Mini Extraction Kit(0.1-1ml),柱式小量血液基因组DNA提取试剂盒,柱式小量血液基因组DNA提取试剂盒(0.1～20ml)


·高效多重PCR Mix
编号：WE0124
英文名称：Super Multiplex PCR Mix
规格：1ml|5ml
本品是由SuperStar DNA Polymerase、Mg2+、dNTPs以及PCR稳定剂和增强剂等组成的预混体系，专用于多重PCR扩增。本品所含的 SuperStar DNA Polymerase是全新高效热启动酶，在常温下没有聚合酶活性，可有效减少PCR反应初期因引物错配而产生的非特异性扩增。独特的缓冲体系与热启动酶的组合，显著提高了PCR的扩增效率，扩增范围更广泛。本产品适用于各种类型的多重PCR反应，比如微卫星分析、基因分型和SNP检测等。

产品组成：

组份	1ml	5ml
2×Super Multiplex PCR Mix	1ml	5×1ml
ddH2O	1ml	5×1ml

注意事项：
1、使用前请上下颠倒轻轻混匀，尽量避免起泡，并经短暂离心后使用。
2、避免反复冻融，反复冻融可能使产品性能下降。如果在短期内需要频繁使用，可在2～8℃保存。

使用方法：
以下举例为常规PCR反应体系和反应条件，实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。

1、PCR反应体系

试剂	50μl反应体系
2×Super Multiplex PCR Mix	25μl
Primer Pool	0.1-0.3μM
DNA or cfDNA	5ng-100ng
ddH2O	up to 50μl

注意：引物浓度请以终浓度0.1-0.3μM作为设定范围的参考。

2、PCR反应条件

步骤	温度	时间	循环数
预变性	95℃	2 min
变性	98℃	20 s	30-40个循环
退火延伸	65℃	90 s
终延伸	72℃	5 min

注意：
1)一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃，无法得到理想的扩增效率时，适当降低退火温度；发生非特异性反应时，提高退火温度，由此优化反应条件。
2)可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少，扩增量不足；如果循环次数太多，错配机率会增加，非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。

储存条件：-20℃，避免反复冻融。

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