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钦诚生物
上海
2021-10-21 16:03
我要认领上海钦诚生物科技有限公司
余经理
shqcsw01@163.com
产品属性
产品说明
| 复制子: | p15 ori |
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| 质粒分类: | 稀有密码子表达载体 |
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| 质粒大小: | 4694bp |
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| 原核抗性: | 氯霉素Chloramphenicol |
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| 克隆菌株: | DH5α |
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| 培养条件: | 37℃,有氧,LB |
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| 表达宿主: | 大肠杆菌 |
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| 5'测序引物: | 根据全序列设计 |
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| 3'测序引物: | 根据全序列设计 |
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| 备注: | 低拷贝 |
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pRARE稀有密码质粒使用说明: 1、收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl无菌水溶解质粒,室温放置1min; 2、从-80℃冰箱中取出相应的感受态,置于冰盒上解冻,并做好标记; 3、取2μl质粒加至100μl感受态中,冰浴30min; 4、42℃热激90s,再冰浴2min; 5、加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡培养45min; 6、6000rpm离心5min,仅留100ul上清混匀菌体沉淀; 7、混匀后的菌液加至对应抗性的LB平板上,倒入适量玻璃珠,涂匀液体; 8、将平板正向培养1h,再倒置培养12h~16h; 9、挑取单克隆菌落至对应抗性的LB液体培养基中,震荡培养12h~16h,根据实验需要提取质粒。pRARE稀有密码质粒注意事项: 1、如果您收到的是甘油菌种,请先四区划线,挑取单克隆培养。 2、如果第二天转化平板长的过多,请将质粒按比例稀释后再转化。