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上海博湖生物科技有限公司
酯化梭状芽孢杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒检测
酯化梭状芽孢杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒检测
价 格:
¥900 - 3499
品 牌:
博湖
产 地:
进口、国产
最新更新日期:
2021-10-26 10:46
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上海博湖生物科技有限公司
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公司:
上海博湖生物科技有限公司
联系人:
韩丽君
联系电话:
18117197628
021-57763112
联系邮箱:
3004987436@qq.com
QQ:
3004987436
产品属性
数量
54
英文名
Clostridium estertheticum
CAS号
详见说明书
保质期
详见说明书
供应商
上海博湖
保存条件
低温冷藏
规格
50T
产品说明
荧光化学物质:
酯化梭状芽孢杆菌探针法荧光定量
PCR
试剂盒检测
实时荧光定量PCR所使用的荧光物质可分为两种:荧光探针和荧光染料。现将其原理简述如下:
1. TaqMan荧光探针:PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针,该探针为一寡核苷酸,两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;PCR扩增时,Taq酶的5'-3'外切酶活性将探针酶切降解,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,从而荧光监测系统可接收到荧光信号,即每扩增一条DNA链,就有一个荧光分子形成,实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步。而新型TaqMan-MGB探针使该技术既可进行基因定量分析,又可分析基因突变(SNP),有望成为基因诊断和个体化用药分析的技术平台。
2. SYBR荧光染料:在PCR反应体系中,加入过量SYBR荧光染料,SYBR荧光染料非特异性地掺入DNA双链后,发射荧光信号,而不掺入链中的SYBR染料分子不会发射任何荧光信号,从而保证荧光信号的增加与PCR产物的增加完全同步。SYBR仅与双链DNA进行结合,因此可以通过溶解曲线,确定PCR反应是否特异。
3. 分子信标:是一种在5和3末端自身形成一个8个碱基左右的发夹结构的茎环双标记寡核苷酸探针,两端的核酸序列互补配对,导致荧光基团与淬灭基团紧紧靠近,不会产生荧光。PCR产物生成后,退火过程中,分子信标中间部分与特定DNA序列配对,荧光基因与淬灭基因分离产生荧光 。
产品名称
酯化梭状芽孢杆菌探针法荧光定量
PCR
试剂盒检测
英文名称
Clostridium estertheticum
货号
BHR1469
实时荧光定量PCR:
实时荧光定量PCR技术有效地解决了传统定量只能终点检测的局限,实现了每一轮循环均检测一次荧光信号的强度,并记录在电脑软件之中,通过对每个样品Ct值的计算,根据标准曲线获得定量结果。因此,实时荧光定量PCR无需内标是建立在两个基础之上的:
1)Ct值的重现性PCR循环在到达Ct值所在的循环数时,刚刚进入真正的指数扩增期(对数期),此时微小误差尚未放大,因此Ct值的重现性极好,即同一模板不同时间扩增或同一时间不同管内扩增,得到的Ct值是恒定的。
2)Ct值与起始模板的线性关系由于Ct值与起始模板的对数存在线性关系,可利用标准曲线对未知样品进行定量测定,因此,实时荧光定量PCR是一种采用外标准曲线定量的方法。
外标准曲线的定量方法相比内标法是一种准确的、值得信赖的科学方法。利用外标准曲线的实时荧光定量PCR是迄今为止定量最准确,重现性定量方法,已得到全世界的公认,广泛用于基因表达研究、转基因研究,药物疗效考核、病原体检测等诸多领域。
通用原则:
1
, 先选择好探针,然后设计引物使其尽可能的靠近于探针。
2, 扩增子的长度应不超过400bp,理想的最好能在100-150bp内,扩增片断约短,有效的扩增反应就越容易获得。较短的扩增片断也容易保证分析的一致性
3, 保持GC含量在20%和80%之间,GC富含区容易产生非特异反应,从而会导致扩增效率的降低,及在SG分析中非特异信号。
4, 为了保证效率和重复性,应避免重复的核苷酸序列,尤其是G(不能有4个连续的G)
5, 将引物和探针互相进行配对检测,以避免二聚体和发卡结构的形成。
b),探针设计指导
1,在设计引物之前设计探针
2,探针的Tm值应在68-70℃之间,如果是目测探针,则要仔细审查GC富含区。
3,探针的5’端要避免有鸟氨酸,5’G会有淬灭作用,即使被切割下来这种淬灭作用也还会存在
4,选择C多于G的链作探针,G的含量多于C会降低反应效率,这时就应选择配对的另一条链作为探针。
6, 探针应尽可能的短,不要超过30个bp。
7, 检测探针的DNA折叠和二级结构。
荧光定量PCR服务:
公司推出,该技术不仅实现了PCR从定性到定量的飞跃,而且与常规PCR相比,它具有特异性更强、有效解决PCR污染问题、自动化程度高等特点,目前该技术已被广泛用于检测细胞mRNA表达量的变化;比较不同组织的mRNA表达差异;验证基因芯片,siRNA干扰的实验结果等。我公司为您提供全套实时荧光定量PCR技术服务,全部实验皆使用进口试剂完成,主要定量PCR仪器。
1、荧光定量PCR服务要求:
(01)请您提供新鲜的且尽量多的材料;或直接提供纯化好的总RNA(大于 5 ug/样品);或直接提供纯化好的DNA(大于 5 ug/样品)。
(02)请提供已知的全长基因序列。
(03)请提供尽可能详细的背景资料:DNA/RNA 来源等
2、荧光定量PCR操作程序
(01)引物(探针)设计与合成。
(02)提取DNA/RNA,样本逆转录成cDNA。
(03)进行Real Time PCR实验,进行实验结果分析。
(04)实验完成后,提供完整的实验报告(含软件分析结果)及引物等实验材料。
3、荧光定量PCR的收费标准:
我公司根据客户的样品数量进行不同的收费标准。
鸭坏死因子α
(TNF-
α
)ELISA
试剂盒
96T/48T
试剂盒
组装
/
原装
Human ai keratin aibody (ASA) ELISA Kit
人抗皮肤抗体
(ASA)ELISA
试剂盒
Humaninducibleniicoxidesyhase,iNOSELISAKIT
人诱导型合成酶
(iNOS)ELISA
试剂盒
96T/48T
进口分装
CLIAKitforACTN-3(HumanAlpha-Actinin3)ELISAKit
人α
-
辅肌动蛋白
3
规格:
48T/96T
血液组织纤维型蛋白溶酶原激活剂
(tPA)
活性比色法定量检测试剂盒
20
次
MouseProcalcitonin,PCTELISAKit
小鼠降钙素原
(PCT)ELISA
试剂盒规格:
96T/48T
胰蛋白酶
1:250 250g
ypsin1:250,PorcinePancreas 25g
胰蛋白酶抑制剂
10g
ypsinInhibitor,Soybean 1g
大鼠饥饿激素
(GHRL)ELISA
试剂盒
,英文名:
GHRL ELISA Kit
Rabbit beta amyloid (A beta 1-40 1-40) ELISA Kit
兔β淀粉样蛋白
1-40(A
β
1-40)ELISA
试剂盒
牛免疫缺陷病毒
(BIV)
核酸检测试剂盒
(-PCR
法
) 48T
CLIAKitforMouserudimealbovineserumalbumincheck-upELISAKit
小鼠的牛血清白蛋白残留检测规格:
48T/96T
体液甘油三酯
(iglyceride)
含量酶连续循环反应比色法定量检测试剂盒
20
次
ELISAKit5-HT
人
5
羟色胺规格:
48T/96T
HOTSTARTPCRTOGELTAQPCRMASTERMIX,2X
热启动
PCRTOGEL TAQ PCR MASTER MIX, 2X
生物技术级蓝绿色透明液体
20 degrees Csigma
1020
二苄基甲酮
1,3Dipxenyleetone
wo7iumxy7noXIDEPELLETSACS
级
,
美国国家处方级
,
食品化学法典级小球
RT
不
sigma
甲基紫
Methyl violet 800 25G
通用试剂
高香草醋
;4
羌基
3
氧基α本加醋
;4
羌基
3
氧基本醋
HoMovcnillic ccid;4x
LTRYPTOPHANL
色酸美国药典级
100G223RT
xylooligosaccharides
木寡糖
100
克高,
98%
全拂丁基典
Pqrfluorobutyl iodidq 4339
皂土
/
膨润土
/
浆土
/
胶状黏土
/
斑脱岩
/Bentonite CP 500
克
国产
/
进口
3,4
二胺
3,4Dimethoxyaniline,
≥
97.0% 3624 10G
通用试剂
酯化梭状芽孢杆菌探针法荧光定量
PCR
试剂盒检测
碳酸
100
克
吡罗红甲基绿
Pyronine metxyl green
十三烷
sh
ē
ng hu
à
sh
ì
j
ì容量:保存:
20
℃
100
毫克
D
酪酸
DTyrosine,99% 556025 500MG
通用试剂
本醋异炳酯
≥
99% ISOPROPYL PHqNYLcCqTcTq 62
服务流程:
1.
客户认真写好订单,提供待检基因相关信息;
2.签订技术服务合同,支付预付款(30-50%);
3.设计合成定量PCR引物(或客户提供文献引物委托本公司合成);
4.DNA/RNA的抽提、定量、RNA反转录;
5.PCR预实验,主要检测引物的特异性和扩增效率;
6.正式定量实验:对所有样品上机检测;
7.实验结果和数据分析,形成报告。
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