源于噬菌体系统的同源重组技术，打破了酶切位点在应用上的限制和克隆片段的长度限制。该技术不但能运用在DNA克隆中，还能够更加省时省力地对质粒、染色体和细菌人工染色体等进行改造，正逐渐成为一个重要的分子生物学工具。

鉴于该技术功能和应用的重要性，本公司自主开发了42℃热诱导重组系统和阿拉伯糖诱导重组系统。这两个系统能分别在42℃或者阿拉伯糖诱导下使基因发生重 组，而重组结束后重组质粒则会自动丢失，这两个系统具有经济、不受外源基因干扰等优点，利用这两个系统能进行功能菌株的改造。

同源重组示意图（Shyam K Sharan等）

技术优势：

1. 多种改造方法可供选择，可以全方位对大肠杆菌的基因组进行改造；
2. 重组后质粒自动丢失，改造后的菌株不受其他外源基因干扰；
3. 实验周期短，准确率高。

应用范围：

1. 突变基因组上目的基因——可以低水平表达或不表达目的基因，用于研究基因功能或制备某些特殊菌种；
2. 打断或缺失基因组上目的基因——可以使目的基因沉默，用于研究基因功能或制备某些特殊菌种；
3. 在基因组上插入或替换目的基因——可以增加菌株的某些功能，用于研究基因功能、表达目的蛋白质或制备某些特殊菌种。

服务内容：

1.插入抗性基因以打断目的基因

根据客户提供的已知序列设计引物，以客户提供的菌株的基因组DNA为模板进行PCR扩增，以验证已知序列。PCR方法获得带有目的基因同源臂的抗性基因，利用同源重组方法将抗性基因插入到目的基因之中。

2.插入抗性基因替换目的基因

根据客户提供的已知序列设计引物，以客户提供的菌株的基因组DNA为模板进行PCR扩增，以验证已知序列。PCR方法获得带有目的基因两端序列的同源臂的抗性基因，利用同源重组方法将抗性基因替换目的基因，从而使目的基因缺失。

3.目的基因插入替换原有基因

根据客户提供的已知序列设计引物，以客户提供的菌株的基因组DNA为模板进行PCR扩增，以验证已知序列。PCR方法获得带有目的基因及同源臂的DNA片 段，利用同源重组方法和半乳糖或者kan-sacB筛选，将其插入替换原有基因，目的菌株不含任何的杂基因。

4.删除目的基因

根据客户提供的已知序列设计引物，以客户提供的菌株的基因组DNA为模板进行PCR扩增，以验证已知序列。PCR方法获得带有目的基因及同源臂的DNA片段，利用同源重组方法和半乳糖或者kan-sacB筛选，删除原有基因。

服务说明：

1. 我们目前接收的样品形式为：带有单菌落的平板、斜面或甘油菌保。
2. 客户需要提供详细的菌株基因型、抗性情况或ATCC No.等情况。
3. 实验结束后，我们将对基因组改造部分进行PCR验证，并对PCR产物进行测序。
4. 大肠杆菌生长所必需的基因一般无法进行改造，客户实验前需要确认目的基因是否会影响大肠杆 菌的正常生长，若由于目的基因为大肠杆菌生长必需基因使实验失败所造成的一切损失由客户承担。

服务流程及收费标准：

项目	步骤	交付方式	周期	收费	备注
功能菌株改造	1. 载体构建	实验报告、菌落PCR、酶切鉴定图片、测序结果、表达菌株	2-3周	视片段大小定800-1500元	该项报价为<2000bp片段的价格，引物合成费按1.5元/bp另算。长片段请询价。
	2. 菌株基因改造	改造后的菌种、实验报告、实验照片、PCR鉴定结果	2-3周	5000元/样

注意事项

1. 如果因为客户提供的基因信息有误等非本公司原因引起的实验提前终止，对已启动的项目按正常收费。
2. 如果确因实验风险而引起的实验失败，本公司只收取实验试剂成本费。

详见：http://www.gdbiotec.com/taxonomy/term/33/all