| 产品名称： | 35.1 |
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| 商品货号： | SHC-2257 |
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| 中文名称： | 小鼠杂交瘤细胞 |
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| 组织来源： | B淋巴细胞,淋巴瘤 |
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| 形态特征： | 淋巴母细胞 |
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| 生长特性： | 悬浮生长 |
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| 特征特性： | 动物用佛波醇肉豆寇酸(PMA)活化的人T淋巴细胞免疫。脾细胞与gp2/O-Agl4骨髓瘤细胞融合。抗体与人T细胞表面蛋白Tp50(CD2)反应。抗体抑制T细胞增殖反应和细胞毒反应，但不抑制抗体倡导的细胞毒反应。 |
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| 细胞污染： | HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。 |
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| 培养条件： | 添加L-glutamine 300mg/L, NaHCO3 1.5g/L, glucose 2.5g/L, HEPES 2.38g/L, Sodium Pyruvate 0.11g/L，0.05mM β-巯基 乙醇)，90%；优质胎牛血清，10%。 |
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| 传代方法： | 1:2。3天内可长满。 |
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| 细胞冻存步骤： | 待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例； 1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，细胞变圆脱落后，加入2ml完全培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。明舟生物按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
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| 复苏细胞步骤： | 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。 |
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| 细胞传代步骤： | 如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 |
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| 冻存条件： | 基础培养基+8%DMSO+20%FBS |
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