粪便DNA提取试剂盒 DNA纯化

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百奥莱博
北京
2021-11-05 19:43

北京百奥莱博科技有限公司

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王欣
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产品属性
保存条件常温运输及保存
保质期一年
英文名Stool DNA extraction kit
数量353
供应商北京百奥莱博科技有限公司
产品说明

特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产销*(代"售")粪便DNA提取试剂盒 DNA纯化,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。


名称:粪便DNA提取试剂盒 DNA纯化
编号:BTN70601
品牌:百奥莱博
规格:100次
产地:国产|进口
本试剂盒是专门用于从各种动物粪便中提取高质量的DNA的试剂。动物粪便中夹杂着许多脱落的肠道上皮细胞和肠道病原菌,因此通过PCR 对粪便DNA进行分析是诊断肠道遗传病(如大肠癌等)和传染病的重要材料,具有比常规的结肠镜检测和大便隐血实验更高的特异性和灵敏度。通过PCR 对粪便DNA进行分析还可以对濒危物种进行遗传分析。但粪便中成分复杂多变,常含有对PCR等后续反应有极大的抑制作用的不明成分,所以从粪便中提取高纯度的DNA十分棘手。

产品特点:
1. DNA 纯净,OD260/280一般都在1.8以上,得到的DNA样品原液或稀释液可以直接用于PCR等后续反应。
2. 每次微量提取可以处理100-300mg左右的样品,能得到5μg左右DNA,片段长度在30Kb左右。
3.可以同时提取到肠道上皮细胞和肠道病原菌的DNA。
4. 操作过程简单快速,只需要30分钟。
5.扩容性好,既可以在1.5mL离心管中微量提取,也可以在50mL离心管中进行大规模制备。
6. 试剂无毒无害,环保。

试剂盒组成:

成分规格
溶液A50ml
溶液B50ml
说明书1份

注:溶液A和溶液B均为无色液体,溶液A 4℃保存时会产生沉淀,用前需要65℃溶化并混匀。

储存条件:常温运输及保存,有效期一年。

使用方法:
下面的操作步骤为1.5mL塑料离心管中进行的微量提取。如果样品用量增加,需要使用大的离心管,各提取试剂的用量也需要按比例增加。

1. 65℃预热溶液A,待其沉淀溶化后,充分混匀,然后取0.5mL 加入到1.5mL塑料离心管中并放置于65℃待用。最好使用螺旋盖离心管。
2. 取0.1-0.3 g的新鲜或冷冻的动物粪便,加入到含预热溶液A的离心管中,震荡器上剧烈震荡5-10分钟。注意:一定要让管底的样品充分震荡起来。
3. 将离心管置于65℃水浴中保温至少5分钟。
4. 13000-15000g室温离心3分钟,将上清转移到一新的1.5mL塑料离心管中。
5.在上清液中加入等体积的溶液B,上下颠倒30秒使之充分混匀,溶液将呈白色或淡黄色混浊状。
6. 将离心管冰浴至少5分钟。
7. 13000-15000g室温离心3分钟,转移上清到新的1.5mL塑料离心管中。
8. 加入0.2mL的*仿(自备),震荡器上充分振荡30秒混匀。注意:一定要让管底的溶液震荡起来。
9. 13000-15000g室温离心3分钟,小心转移上清到新的1.5mL塑料离心管中。
10. 重复第8 步和第9 步一次。
11. 将上清转移到新的1.5mL离心管时,不要超过0.5mL,否则没有空间加两倍体积的乙醇。如果有多余的可以弃之不用。
12. 加入2倍体积的乙醇(自备),上下颠倒30秒混匀,15000g离心5-10分钟,弃上清,管底将有微小DNA沉淀。注意:最好不要用异丙醇代替乙醇,否则不容易去除带色素的杂质。
13. 加入1mL 75%乙醇(自备),震荡数秒,13000-15000g室温离心3分钟,弃上清。
14. 重复上步清洗一次。注意:75%乙醇洗两次有助于去除PCR 抑制物。
15. 短暂离心,吸弃残留的75%乙醇(约50μL),室温晾干。注意:一定要去除残留的75%乙醇,否则会影响后续反应和电泳上样(样品会飘走)。
16. 加入30μl TE缓冲液溶解沉淀。注意:不知道样品DNA产率前最好不要加过多TE。如果DNA浓度高,可以再加TE 稀释。如果DNA 有颜色,可以使用柱式腐殖酸清除剂(BTN60801)纯化一次。
17. DNA 即可用于电泳、酶切和PCR等反应。最好用原液和稀释液对照做PCR,最好按PCR 终体积的1/10 加入随赠的PCR 抑制物清除剂(BTN60804)。
粪便DNA提取试剂盒 DNA纯化
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粪便DNA提取试剂盒 DNA纯化

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