STAT3

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上海烜雅
国产/进口
2021-11-18 08:51

上海烜雅生物科技有限公司

我要认领
上海烜雅生物科技有限公司
黄经理
18701994219 021-62457717
1517347860@qq.com
产品属性
免疫原详见说明书
亚型IgG
形态Lyophilized or Liquid
保存条件避光-20℃,保存一年
克隆性详询
标记物详询(烜雅可供应生物素、酶、荧光素标记的抗体)
适应物种h
保质期一年
抗原来源Polypeptide
目录编号XY-KT-2998
级别生产厂家
数量100
供应商上海烜雅生物科技有限公司
宿主Rabbit,mouse
应用范围ih,wb
浓度1mg/ml
靶点详见说明书
抗体英文名STAT3
抗体名STAT3
规格100ul
产品说明
STAT3抗体产品资料:
适应物种:h,R,m,r
级别:生产厂家
纯度:>95%
浓度:1mg/ml
分子量:详见说明书
形态:Lyophilized or Liquid
克隆类型:Polyclonal
规格价格:请直接联系我司客服详询
说明书:请直接向我司客服索取

免疫组化常见问题及对策
免疫组织化学是应用抗原和抗体结合的原理,检测细胞内多肽、蛋白质等大分子物质的 分布。这种方法的特异性强、敏感度高、发展迅速、应用广泛,成为生物学和医学众多学科 的重要研究手段。作为初次使用本公司的抗体从事免疫组化的客户可能遇到许多问题,大体 归纳起来,主要有非特异性着色﹑着色部位不对﹑假阳性﹑无阳性﹑阳性弱五大类以及其他 一些小问题。现在就以上几点分别说明。
非特异性着色
非特异性着色就是在理论着色区域外的着色,这种着色与背景是有区别性的。

 主要原因:
  1. 标本原因,肝肾内源性生物素含量高,与 SABC 结合导致非特异性着色,皮肤肺组织胶 原含量高,由于胶原带负电荷,易吸附试剂导致非特异性着色。
  2. 切片干涸导致的边缘效应。
  3. 抗体浓度过高。
  4. 组织在处理中存在出血区域坏死区。
  5. 洗涤不充分。
  6. 显色剂氧化,显色时间长。
解决方法:
  1. 一抗应做浓度梯度,选择阳性强,背景好,信躁比高的浓度,作为抗体实验浓度;二抗浓 度和时间一般不变。
  2. 稳定实验条件,严格按操作说明进行。
  3. 在实验中应保持切片始终处于水平状态避免抗体流失,避免切片干涸。
  4. 在实验中应将试剂覆盖面积大于切片面积。
  5. 洗涤要充分,在背景十分深时,可用 37℃预温的 PBS 浸泡
  6. 防止显色剂的氧化,尤其是配制显色剂使用的容器,最好是灭菌过的;显色时间应在显微 镜下严格控制。

着色部位不对
情况一:本是胞浆抗原有着色,但实验结果显示在胞核有着色。

原因及解决办法:
  1. 修复时间过长,修复条件十分严苛,这时应降低反应强度,减少修复时间。
  2. 组织在二中静置时间过长,这时应更换标本。
  3. 抗体中含有抗核蛋白抗体,这种情况已不多见。
  4. )标本原因,标本处理不慎会导致总在同一个地方出现着色。
情况二:本是胞核抗原但显示结果却在胞浆。

原因及解决办法:
  1. 核抗原不易暴露,需用热修复或延长修复时间来充分暴露。
  2. 蛋白质是在胞浆翻译的,再转运至其他部位,所以出现浆着色也属正常。

情况三:本是胞膜抗原但显示结果却是在胞浆和胞膜都有着色。


原因:蛋白质是在胞浆翻译的,再转运至其他部位,处于转运过程中的膜蛋白有可能显示在胞浆。
假阳性
如不加一抗也有阳性信号
主要原因:
二抗引起的交叉,球蛋白是一个超家族,哺乳动物种属来缘近的容易发生交叉反应。如:羊 抗兔抗体可与兔标本中球蛋白反应,二抗羊抗小鼠也可与大鼠,小鼠中的球蛋白起反应,尤 其在修复的情况下。
无阳性

主要原因:
1.抗原稳定性问题,由于许多蛋白质半衰期短易被破坏,如 P53 半衰期只有 30 秒而 PCNA 等抗原稳定。
2.标本制作过程中烤片时间过高时间过长,标本制作不规范。
3.实验中漏加试剂,实验操作不规范。
解决方法:
  1. 在标本固定中应该严格操作,做到及时固定。
  2. 在浸蜡时温度不要太高,时间不要过长。一般 2 小时×2 次。烤片温度一般在 60℃左右 30 分钟。
  3. 实验中要严格按照实验步骤操作。在所做指标既有单抗又有多抗时,要将一抗和二抗严格 对应。
阳性弱


原因及解决方法:
  1. 一抗浓度过低,解决方法:提高一抗浓度
  2. 孵育时间过短,解决方法:按说明书严格操作
  3. 抗体流失,解决方法:补加抗体
  4. 显色时间过短,解决方法:在显微镜下控制反应时间
  5. 抗原修复方法不当,抗原修复有许多种方法,如:修复、消化,不消不修,寻找适合的方 法是解决阳性弱的有效方法之一

其他问题及注意事项
  1. 在实验中尤其在修复后切片容易脱片,切片脱片的原因是什么?
 答:切片原因有以下几点。1.切片没有经过防脱片处理。2.在切片后没有及时烤片。3.修复 时间过长。
  1. DAB 中 A 液无颜色或颜色很深是否影响实验结果?
答:DAB 的颜色深浅一般不影响实验,因为 DAB 中含有保护剂,每一批保护剂的颜色都不 太一样,好的 DAB 颜色变深一般与氧化剂的存在有关
  1. 冬天气温低洗涤不充分,可能出现背景高, 应对方法用 37℃欲温 PBS 洗涤
  2. 抗体是否能做兔标本 答:以说明书为准,一般能做人、大鼠、小鼠也可能做兔,这是由于种属亲缘关系决定的

烜雅生物STAT3体热销产品:
Anti-ACTH (Adrenorticotrophin hormons 7-23)促肾上腺皮质激素(18-39)抗体
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Anti-ADAM-TS7 (A Disintegrin-like and Metalloprotease with Thrombospondin Type 1 Motif, 7)整合素样金属蛋白酶与凝血酶1型-7(抗体)
Anti-ADAM-TS12(A Disintegrin-like and Metalloprotease with Thrombospondin Type 1 Motif, 12)整合素样金属蛋白酶与凝血酶1型-7抗体 (N端抗体)
Anti-Adducin protein整合素样金属蛋白酶与凝血酶1型-12抗体
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Anti-AEV(Avian Encephalomyelitis virus)脂肪组织分化相关蛋白抗体
Anti-ADH/AVP(Antidiuretic Hormone;Arginine Vasopressin)禽脑脊髓炎病毒抗体
Anti-Adipo R1 (adiponectin receptor 1)抗利尿激素/血管升压素抗体
Anti-Adipo R2 (adiponectin receptor 2)脂联素受体-1抗体
Anti-Adiponectin脂联素受体-2抗体
Anti-ADM/AM (Adrenomedullin)脂联素抗体
Anti-ADM (Adrenomedullin)ProAM-N20肾上腺髓质素抗体
Anti-ADM R (Adrenomedullin receptor)肾上腺髓质素抗体(N端20肽)
Anti-ADNP/NAP (Activity-dependent Neuroprotective protein )肾上腺髓质素受体抗体
Anti-ADORA3/A3AR(adenosine receptor A3)活性依赖的神经保护肽抗体
Anti-ADRA2 (alpha 2 adrenergic receptor)腺苷受体A3抗体
Anti-AHR(aryl hydrocarbon receptor)alpha-2肾上腺能受体抗体
Anti-ADRB1 (β1-adrenergic receptor)芳香烃受体抗体
Anti-ADRB2 (β2-adrenergic receptor )肾上腺能受体β1抗体
Anti-ADRB3/β3-AR (β3-adrenergic receptor)肾上腺能受体β2抗体
Anti-AE3/SLC4A3(anion exchanger protein 3)肾上腺能受体β3抗体