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人血管内皮细胞生长因子ELISA试剂盒实验时标本的处理:
A、请使用者使用前充分考虑到样本的可能使用量,预留充足的样本。
B、实验前应预测标本含量,如果标本浓度过高,应对标本进行稀释,使稀释后的标本符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数,标本使用0.01mol/L的PBS稀释(PH=7.0-7.2)。
C、若所检样本不包含在说明书所列样本之中,建议进行预实验验证其有效性,并注意留存样本。
D、使用化学裂解液制备的组织匀浆或细胞提取液可能会由于化学物质的引入导致ELISA实验结果偏差。
E、若样本为细胞培养上清,因该类样本干扰因素较多,如:细胞状态、细胞数量、采样时间等,所以可能存在检测不出的情况。
F、某些天然蛋白或重组蛋白,包括原核及真核重组蛋白,可能因为与本产品所使用的检测抗体及捕获抗体不匹配,而不被检测出。
G、建议使用新鲜样本,保存时间过长可能会存在蛋白降解或变性导致实验结果偏差。
人血管内皮细胞生长因子ELISA试剂盒操作时包括6个步骤:
1)抗原或抗体吸附于固相
2)加标本和试剂
3)孵育和冲洗
4)加酶标抗原或抗体
5)加适当的底物
6)检测和分析结果
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