小鼠白细胞介素16 ELISA检测试剂盒

¥2500
研科生物
2021-11-22 15:03

黄石研科生物科技有限公司

我要认领
黄石研科生物科技有限公司
潘技术
15559089093 0714-6330330
34632442472@qq.com
产品属性
样本血清、血浆、细胞培养上清液
适应物种小鼠
应用免疫学
检测方法双抗体夹心酶联免疫吸附
产品说明
仅供科研使用,不得用于临床检验
品牌:YANKOBIO 
货号:YKE-3119 
规格:96T /48T 
中文名称:小鼠白细胞介素16 ELISA检测试剂盒 
英文名称:Mouse Interleukin 16 ELISA KIT 
应用:定量检测 
检测范围:7.81-500pg/ml

价格:询价


欢迎咨询,请找工作人员索要相关说明书!

仅供科研使用,不得用于临床检验。
小鼠白细胞介素16 (IL-16)定量检测试剂盒(ELISA)说明书
【货 号】YKE-3119
【产品名称】
通用名称:小鼠白细胞介素16 (IL-16)定量检测试剂盒(ELISA
英文名称:Mouse IL-16
【包装规格】
96人份/
【预期用途】
仅供科研使用,定量检测血清、血浆、细胞培养上清液中IL-16的浓度。

【检验原理】
本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附检测技术。特异性抗小鼠IL-16单克隆抗体预包被在高亲和力的酶标板上。酶标板孔中加入标准品、检测样本和辣根过氧化物酶标记的检测抗体,经过孵育,样本中存在的IL-16与固相抗体和检测抗体结合。洗涤后,加入显色底物TMB,避光显色。颜色反应的深浅与样本中IL-16的浓度成正比。加入终止液终止反应,在450 nm波长(参考波长570 -630 nm)测定吸光度值。
【主要组成成分】
主要成分
组分规格数量
包被微孔板96T1
标准品500pg/mL2
抗体80uL1
辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素150uL1
10×检测缓冲液5mL1
标准品稀释液5mL1
TMB显色液10mL1
TMB终止液10mL1
洗涤缓冲液(20X)30ml1
封板膜4
注意:使用前请检查试剂盒中试剂的标签和数量与表格是否一致
【样本要求】
样本类型和采集
细胞培养上清
 300 g 离心 10 分钟去除沉淀物,即刻检测或者分装,-20℃以下贮存。
血清样本
分离管分离血清。在 1000 g 离心之前,使血样凝集 30 分钟。吸取血清样本之后即刻检测,或 者分装,-20℃以下贮存。
血浆样本
EDTA、枸橼酸钠或肝素抗凝收集血浆样本。1000 g 离心 3 0 分钟收集样本。即刻检测,或者 分装,-20℃以下贮存。 本试剂盒可能适用于其它生物学样本。
细胞培养上清、血清和血浆已经过验证。




注意:检测前,样本中可见的沉淀必须去除。不要使用严重溶血或高血脂的样本。 样本应分装并贮存于-20℃,以避免人IL-6活性的丢失。如果在 24 小时内检测,样本可以 存放在 2 - 8℃。 避免样本的反复冻融。在检测前,冷冻样本应该缓慢地恢复至室温,轻柔地混匀。

样本保存和稳定性
样本在2-8℃条件下,可以储存72h,或者在- 20℃储存6个月。样本收集后,不是一次检测完,请按一次用量分装冻存,避免反复冻融,使用时在室温下解冻,确保样品均匀充分解冻。

【检验方法】
试剂准备
检测前请将所有的试剂、样本恢复至室温。 如果浓缩的试剂出现结晶,37℃温浴,直至结晶全部溶解。
1×洗液
吸取 20×浓缩洗液 30 ml  1 L 的量筒,加蒸馏水或去离子水至600 ml,轻轻混匀,避免泡 沫。 转移至干净瓶内。2 - 25℃贮存,1×洗液可稳定 30 天。
1×检测缓冲液
吸取 10×浓缩检测缓冲液 5 ml  100 ml 量筒,加蒸馏水或去离子水至 50 ml,轻轻混匀,避 免泡沫。 2 - 8℃贮存,1×检测缓冲液可稳定保存 30 天。
检测抗体 稀释前充分混匀。根据标准品和待测样本的数量,用 1×检测缓冲液按 1100 稀释浓缩的检 测抗体。 注意:请在 30 分钟内使用稀释后的检测抗体。
辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素
稀释前充分混匀。 根据标准品和待测样本的数量,用 1×检测缓冲液按 1100 稀释浓缩的辣根过氧化物酶标记的 链霉亲和素。 注意:请在 30分钟内使用稀释后的辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素。
样本稀释
如果样本需要稀释,请用试剂盒提供的 1×检测缓冲液稀释血清/血浆样本,用细胞培养基稀释 细胞培养上清。
小鼠白细胞介素16 (IL-16)标准品
用蒸馏水或去离子水重溶小鼠白细胞介素16 (IL-16)标准品,重溶体积标注在小鼠白细胞介素16 (IL-16)标准品的标签上。轻柔 地涡旋震荡,确保充分混匀,重溶后标准品的浓度为4000 pg/ml。重溶后静置 10 - 30 分钟。稀释 前充分混匀。 请使用聚丙烯管进行标准品稀释。
标准曲线制作血清/血浆样本标准曲线的制作:
 250 μ浓缩的小鼠白细胞介素16 (IL-16)标准品,加入 250 μ标准品稀释液,作为标准曲线的最高浓度 (2000 pg/ml)。在每一个试管中加入 250 μ标准品稀释液。使用高浓度标准品做 1系列稀释。每次移 液时,请确保充分混匀。以标准品稀释液作为标准曲线的零浓度。
细胞培养上清样本标准曲线的制作:
 250 μ浓缩的小鼠白细胞介素16 (IL-16)标准品,加入 250 μ细胞培养基,作为标准曲线的最高浓度 (2000 pg/ml)。在每一个试管中加入250 μ细胞培养基。使用高浓度标准品做 1系列稀释。每次移液 时,确保充分混匀。以细胞培养基作为标准曲线的零浓



【检测步骤】
检测之前请将所有的试剂、样本平衡至室温。
1. 准备好所有需要的试剂及工作浓度标准品。
2.将不需要的板条拆卸下来,放回装有干燥剂的铝箔袋,重新封好封口。
3.加入300 μl1×洗液静置浸泡30秒。为了获得理想的实验结果浸泡是必须的。弃掉洗液之后,在吸水纸上将微孔板拍干。洗板完成之后,请立即使用微孔板,不要让微孔板干燥。
4.复孔加入100μl2倍倍比稀释的标准品。空白孔复孔加入100 μl标准品稀释液。
5. 样本孔加入90 μl1×检测缓冲液和10 μl样本。
6. 每孔加入50 μl稀释的检测抗体。保证步骤456连续加样,不要间断。加样过程在15分钟内完成。
7.使用封板膜封板。300/分钟振荡,室温孵育2小时。
8.弃掉液体,每孔加入300 μl洗液洗板,洗涤6次。每次洗板,在吸水纸上拍干。为获得理想的实验性能,必须彻底移除残留液体。
9. 每孔加入100 μl显色底物TMB,避光,室温孵育5 -30分钟。
10. 每孔加入100 μl终止液。颜色由蓝色变为黄色。如果颜色呈现绿色或者颜色的变化明显不均匀,请轻轻叩击板框,充分混匀。
11. 30分钟之内,使用酶标仪进行双波长检测,测定450 nm最大吸收波长和570 nm630 nm参考波长下的OD值。校准后的OD值为450 nm的测定值减去570 nm630 nm的测定值。仅使用450 nm测定会导致OD值偏高,并且准确度降低。
【结果计算】
计算标准品和样本的平均OD值,然后减去零浓度标准品的OD值。
以标准品浓度为横坐标,OD值为纵坐标,用计算机软件进行回归拟合生成标准曲线。回归分析确定最佳拟合曲线。通过对浓度值和OD值取对数拟合,可以对标准曲线进行线性化。此过程可能可以得到更多样本的浓度,但数据的准确度会降低一些。
注意:标准曲线最高浓度点的终浓度为500 pg/ml。如果完全按照说明书的步骤操作(10 μl样本+ 90 μl检测缓冲液),计算样本浓度时请乘以稀释因子10
如果样本按照说明书进行了稀释,最终的稀释倍数为10。如果样本进行了其它方式的稀释,计算样本浓度时请乘以相应的稀释倍数。
【检验方法的局限性】
1、仅供科研使用,不得用于临床诊断。
2、在试剂盒标示的有效期内使用,过期产品不得使用。
3、跟其他厂家的试剂盒或者组分不能混用。
4、使用试剂盒配套的样品稀释液。
5、如果样本值高于最高标准品浓度值,请将样本适当稀释后,再重新测定。
6、待测样本中存在的人抗鼠等异嗜抗体会干扰检测结果,检测前,请排除该因素。
7、通过其他方法得到的检测结果,与本试剂盒测定结果不具有直接的可比性。

【产品性能指标】
1、物理性能
试剂盒的各液体组分应澄清透明、无沉淀或者絮状物。微孔板铝箔袋应真空包装,无破损漏气。
2、剂量反应曲线线性
校准品剂量反应曲线相关系数r值,大于等于0.9900
3、精密度
批内精密度:三组已知的高、中、低浓度样品,进行二十次在同一个板块内精度评估。批内变异系数CV%小于10%
批间精密度:三组已知的高、中、低浓度样品,进行二十次在不同板块内精度评估。批间变异系数CV%小于15%
4、检测范围
7.81pg/ml500pg/ml
5、灵敏度
最低检出剂量小于1.74pg/mL
6、回收率
三组已知的高、中、低浓度样品,进行五次回收率评估,回收率在85%-115%之间。
7、特异性
本试剂盒识别天然和重组小鼠白细胞介素16 (IL-16),与结构类似物无交叉。
8、稳定性
2-8℃保存,有效期6个月。