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潮霉素 B 无菌溶液

MCE 国际站：Hygromycin B, Sterile

品牌：MedChemExpress (MCE)

货号：HY-K1051

中文名称：潮霉素 B 无菌溶液

存储条件：4℃，2 年

产品活性：MCE 潮霉素 B 无菌溶液是一种氨基糖苷类抗生素，主要通过干扰 70S 核糖体易位和诱导对 mRNA 模板的错读而抑制细胞蛋白质的正常合成，从而导致细菌、真菌和哺乳动物细胞死亡。

生物活性：MCE 即用型潮霉素 B 无菌溶液，已过滤除菌，可直接用于细胞培养。潮霉素B 来源于吸水链霉菌（Streptomyces hygroscopicus），是一种氨基糖苷类抗生素，主要通过干扰 70S 核糖体易位和诱导对 mRNA 模板的错读而抑制细胞蛋白质的正常合成，从而导致细菌、真菌和哺乳动物细胞死亡。 大肠杆菌（Escherichia coli）来源的潮霉素抗性基因（hyg 或 hph），编码潮霉素 B 磷酸转移酶，可将潮霉素 B 转化成磷酸化产物，使其失去生物活性。因此，潮霉素 B 可用于筛选、维持培养成功转染了潮霉素抗性基因的原核或真核细胞，

描述及优势：

MCE 即用型潮霉素 B 无菌溶液，已过滤除菌，可直接用于细胞培养。潮霉素B 来源于吸水链霉菌（Streptomyces hygroscopicus），是一种氨基糖苷类抗生素，主要通过干扰 70S 核糖体易位和诱导对 mRNA 模板的错读而抑制细胞蛋白质的正常合成，从而导致细菌、真菌和哺乳动物细胞死亡。

大肠杆菌（Escherichia coli）来源的潮霉素抗性基因（hyg 或 hph），编码潮霉素 B 磷酸转移酶，可将潮霉素 B 转化成磷酸化产物，使其失去生物活性。因此，潮霉素 B 可用于筛选、维持培养成功转染了潮霉素抗性基因的原核或真核细胞，

操作流程：1. 潮霉素 B 溶液的工作浓度需要根据细胞类型、培养基、生长条件和细胞代谢率而适当调整。一般而言，哺乳动物细胞 50-1000 μg/mL；细菌/植物细胞 20-200 μg/mL；真菌 300-1000 μg/mL。 2. 对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线（kill curve，即剂量效应曲线），来确定最佳筛选浓度 1) 以 20-25% 的细胞密度进行铺板，铺足够量的孔以进行后续的梯度实验，37°C 培养过夜。 2) 准备含梯度浓度潮霉素 B 的新鲜培养基为筛选培养基，至少 5 个梯度。以哺乳动物为例，常用浓度为 50-1000 μg/mL，可设定 50、100、250、500、750、1000 μg/mL 六个浓度。 3) 细胞过夜培养后，使用上述配制的筛选培养基替换旧培养基，孵育细胞。 每个浓度做 3 个平行对照。 4) 约 2-3 天更换新鲜的筛选培养基。每日监测细胞，观察活细胞比例。通常 7-10 天内能够杀死绝大多数细胞的最低浓度为筛选用的工作浓度。

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