总胆固醇(TC)含量测试盒(微量法)说明书

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2022-03-24 21:13

上海研生实业有限公司

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上海研生实业有限公司
王经理
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shyssw@126.com
产品属性
数量35
英文名详见说明书
CAS号详见说明书
保质期详见说明书
供应商上海研生
保存条件低温冷藏
规格100管/96样
产品说明
操作步骤(仅供参考):
1、总胆固醇(TC)含量测试盒(微量法)说明书贴壁细胞的消化
①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。

【细胞冻存】
待细胞生长状态良好时,可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
中文名称:总胆固醇(TC)含量测试盒(微量法)说明书
英文名称:详见说明书
产品规格:100管/96样
发货周期:1~3天
发货周期:1~3天

测定意义:
血清TC是指血中所有脂蛋白所含胆固醇之总和。总胆固醇包括游离胆固醇和胆固醇酯。肝脏是TC合成和贮存的主要器官。胆固醇是合成肾上腺皮质激素、性激素、胆汁酸及维生素D等生理活性物质的重要原料,也是构成细胞膜的主要成分,其血清浓度可作为脂代谢的指标。临床上将血总胆固醇增高称为高胆固醇血症。
测定原理:
酯酶催化胆固醇酯作用下水解成游离胆固醇(FC)和游离脂肪酸(FFA),FC在胆固醇氧化酶作用下生成△4-胆甾烯酮和H2O2,H2O2在4-氨基安替比林和存在下,经过氧化物酶作用下生成红色醌类化合物,其颜色深浅与TC含量成正比
自备用品:

可见分光光度计、水浴锅、可调式移枪、1ml玻璃比色皿、双蒸水
【培养指南】
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
【复苏的原则】
产品名称快速融化:必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃,使细胞外冻存时的冰晶迅速融化,避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶,对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货,全国统一价格,本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞的种类:
第一种:
是冻存产品,由液氮直接拿出,干冰运输给客户。一般不推荐这种,也较少使用这种方式,因为复苏手法对于细胞状态影响较大,一旦细胞状态不好,很难说是细胞自身不行,还是复苏没操作好;另外温度对细胞、基因功能状态影响很大,也不是细胞储存的zui好方式,快递时间也很难控制,多种因素影响产品的质量;干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种:
是我们复苏好细胞,QC通过后,T-25灌满培养基常温运输给客户,排除复苏造成影响,常温运输也对细胞影响也不大,只需加25元运费(顺丰)。
质量保证:我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作,不同的实验室采用的方法略有差异,但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
Mannheimia glucosida葡萄糖苷曼氏杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒S6PDHTMEM7L鸟嘌呤核苷酸交换因子GEFT抗体

Mannheimia granulomatis肉芽肿性曼氏杆菌病PCR试剂盒Bid (BH3 interacting domain death agonist)英文名称ZFP57组蛋白H1抗体
Mannheimia granulomatis肉芽肿性曼氏杆菌病染料法荧光定量PCR试剂盒PACAP(6-38 Peptide)英文名称ZNF717组蛋白去酰化酶1抗体
Mannheimia granulomatis肉芽肿性曼氏杆菌病探针法荧光定量PCR试剂盒PACAP/VIP receptor英文名称ZDHHC7HAUS3蛋白抗体
Mannheimia haemolytica溶血性曼氏杆菌PCR试剂盒PACAP receptor-I英文名称ZNF3热休克蛋白93抗体
Octylacetate规格:HPLC≥98%,标准品PADI4 (HL-60 PAD)(Protein-arginine deiminase type IV,PADI 4,PAD I4 )英文名称ZNF423酸化组蛋白去酰化酶3抗体
Octreotideacetate规格:≥98%,BRPDGF-A英文名称ZNF239组蛋白H2B抗体
Octanedioicacid规格:>98%,BRPDGF-B英文名称ZNF426短链L-3羟烷基辅酶A脱酶抗体
Octadecane规格:分析标准品,≥99.5%(GC)PDGF-R-A英文名称phospho-ZNF598(Tyr306)组蛋白去酰化酶9抗体HPLC≥98%乏因子Ⅸ血浆5mgVGF
Octadecane规格:StandardforGC,≥99.5%(GC)HPLC≥98%乏因子Ⅹ血浆5mgfgl2
总胆固醇(TC)含量测试盒(微量法)说明书Tumor necrosis factor alpha-induced protein 8-like protein 2六基二硅烷

Sterol regulatory element-binding protein 1三基氯硅烷
Sex Determining Region Y Box Protein 9化钾
Sushi repeat-containing protein SRPX(3,3,3-三基)二...
fatty acid-binding protein 4七基二硅氮烷
2',5'-Oligoadenylate Synthetase 1二基二氧基硅烷
Ghrelin-O-Acyltransferase环己基基二氧基...
glycoproteins IIb;IIIa fibrinogen receptor烯基-POSS
Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 4(氯基)基-二氯...
Myosin Binding Protein C, CardiacFITC 人血清白蛋白