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试剂盒检测原理
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被样本抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的样本呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品
1.酶标仪（450nm）
2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3.37℃恒温箱
操作注意事项
1. 试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。
3. 浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，最终结果乘以5才是样本实际浓度。
4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5. 所有液体组分使用前充分摇匀。
试剂盒组成

名称	96孔配置	48孔配置	备注
微孔酶标板	12孔×8条	12孔×4条	无
标准品	0.3mL*6管	0.3mL*6管	无
样本稀释液	6mL	3mL	无
检测抗体-HRP	10mL	5mL	无
20×洗涤缓冲液	25mL	15mL	按说明书进行稀释
底物A	6mL	3mL	无
底物B	6mL	3mL	无
终止液	6mL	3mL	无
封板膜	2张	2张	无
说明书	1份	1份	无
自封袋	1个	1个	无

注：标准品浓度都不相同，麻烦联系客服索取相应说明书
试剂的准备
 20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
洗板方法
1. 手工洗板：甩尽孔内液体，每孔加满洗涤液，静置1min后甩尽孔内液体，在吸水纸上拍干，如此洗板5次。
2. 自动洗板机：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。
操作步骤
1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；
3. 样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL；空白孔不加。
4. 除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5. 弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。
6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。
结果判断
 绘制标准曲线：在Excel工作表中，以标准品浓度作横坐标，对应OD值作纵坐标，绘制出标准品线性回归曲线，按曲线方程计算各样本浓度值。


试剂盒性能
1. 准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值，大于等于0.9900。
2. 灵敏度：最低检测浓度小于（参考说明书）
3. 特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4. 重复性：板内、板间变异系数均小于15%。
5. 贮藏：2-8℃，避光防潮保存。
6. 有效期：6个月

武汉纯度生物科技有限公司，主要销售常用抗原抗体、试剂、Elisa试剂盒、生化试剂盒、免疫检测试剂盒、金标试剂盒、金标检测卡、动物血清、血浆、全血、抗血清、毒素类标准品、生物试剂、培养基、实验室仪器耗材、化学试剂、生物制品、标准品、对照品、生化免疫制品、免疫亲和柱、菌株、质粒、室内质控品、细胞、培养基、PEG、病理染色液、免疫学试剂、蛋白组学试剂、细胞生物学试剂、分子生物学试剂、抑制剂、细胞因子等。武汉纯度生物时刻谨记产品质量，正如公司名一样，达到“专业规格，纯度保证”的质量生命线。公司秉承“客户为天，质量为根，诚信为本，创新为魂”的信念，将以优质的产品，完善的服务，为每一位客户的实验保驾护航。
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Recombinant Human Granulocyte-Colony Stimulating Factor, HEK 重组人粒细胞集落刺激因子，其
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Recombinant Mouse Granulocyte Macrophage-Colony Stimulating Factor 重组小鼠粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子
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Recombinant Porcine Granulocyte Macrophage-Colony Stimulating Factor 重组猪粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子
Recombinant Rhesus Macaque Granulocyte Macrophage-Colony Stimulating Factor 重组粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子的猕猴
Recombinant Canine Granulocyte Macrophage-Colony Stimulating Factor 重组犬粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子
Recombinant Human Glia Maturation Factor Beta 重组人胶质细胞成熟因子
Recombinant Human Glia Maturation Factor Beta His Tag 重组人胶质细胞成熟因子β-他的标
Recombinant Mouse Glia Maturation Factor Beta 重组小鼠胶质细胞成熟因子
Recombinant Rat Glia Maturation Factor Beta 重组大鼠胶质细胞成熟因子
Recombinant Human Glia Maturation Factor Gamma 重组人胶质细胞成熟因子
Recombinant Human Hepatoma-Derived Growth Factor 重组人肝癌衍生生长因子
Recombinant Human Hepatoma-Derived Growth Factor-2 重组人肝癌衍生生长因子-2
Recombinant Human Hepatocyte Growth Factor, CHO 重组人肝细胞生长因子
Recombinant Human Hepatocyte Growth Factor, Sf9 重组人肝细胞生长因子Sf9
Recombinant Human Hepatocyte Growth Factor, HEK 重组人肝细胞生长因子，其
Recombinant Human Hepatocyte Growth Factor A Chain 重组人肝细胞生长因子链
Recombinant Human Hepatocyte Growth Factor B Chain 重组人肝细胞生长因子β
Porcine Hepatocyte Promoting Growth Factor 猪促肝细胞生长因子
Recombinant Human Interferon Gamma-Inducible protein 30 重组人干扰素-γ诱导蛋白3
Recombinant Human Interferon-alpha 1 重组人干扰素α
Recombinant Human Interferon-alpha 1a 重组人干扰素α1
Recombinant Human Interferon-alpha 1b 重组人干扰素α1
Recombinant Human Interferon-alpha 2a 重组人干扰素α2
Recombinant Human Interferon-alpha 2a, Tobacco 重组人干扰素α2a，烟
Recombinant Human Interferon-alpha 2b 重组人干扰素α2
Recombinant Human Interferon-alpha 2b, Saccharomyces 重组人干扰素α2b，酿
Recombinant Human Interferon-alpha 2b 20kd-Pegylated 重组人干扰素α2b 20KD聚乙二
Recombinant Human Interferon-alpha 2b, HEK 重组人干扰素α2b，HE
Recombinant Human Interferon-alpha 2a, HEK 重组人干扰素α2a，HE
Recombinant Human Interferon-alpha 7 重组人干扰素α
Recombinant Human Interferon-alpha 14 重组人干扰素α1
Recombinant Human Interferon-beta 1a 重组人干扰素β-1
Recombinant Human Interferon-beta 1b 重组人干扰素β-1
Recombinant Mouse Interferon-beta His Tag 重组小鼠干扰素β-他的标
Recombinant Human Interferon-gamma 重组人干扰素
Recombinant Human Interferon-gamma His Tag 重组人干扰素γ-他的标
Recombinant Mouse Interferon-gamma 重组小鼠γ-干扰
Recombinant Rat Interferon-gamma 重组大鼠γ-干扰
Recombinant Porcine Interferon-gamma 重组猪干扰素
Recombinant Equine Interferon-gamma 重组马干扰素
Recombinant Human Interferon-Omega 1 重组人干扰素ω
Recombinant Ovine Interferon-Tau 重组绵羊IFN-tau
Recombinant Human Interferon Regulatory Factor-1 重组人干扰素调节因子1
Recombinant Human Interferon Regulatory Factor-2 重组人干扰素调节因子
Recombinant Human Interferon Regulatory Factor-3 重组人干扰素调节因子3
Recombinant Human Insulin Like Growth Factor-1 重组人胰岛素样生长因子-1
Recombinant Human Insulin Like Growth Factor-1, GST-Tag 重组人胰岛素样生长因子-1，GST标签
Recombinant Human Insulin Like Growth Factor-1 Des (1-3) 重组人胰岛素样生长因子-1 Des（1-3）
Recombinant Human LR3 Insulin Like Growth Factor-1 重组人胰岛素样生长因子-1 LR3
Recombinant Human Insulin Like Growth Factor-1 N15 Labeled 重组人胰岛素样生长因子-1 N15标记
Recombinant Mouse Insulin Like Growth Factor-1 重组小鼠胰岛素样生长因子-1
Recombinant Rat Insulin Like Growth Factor-1 重组大鼠胰岛素样生长因子-1
Recombinant Gilthead Seabream Insulin Like Growth Factor-1 重组胰岛素样生长因子-1的金头鲷
Recombinant Human Insulin Like Growth Factor-2 重组人胰岛素样生长因子-2
Recombinant Human Pro-Insulin Like Growth Factor-2 重组人促胰岛素样生长因子-2
Human Insulin Like Growth Factor Binding Protein-1 人胰岛素样生长因子结合蛋白-1
Recombinant Human Insulin Like Growth Factor Binding Protein-3 重组人胰岛素样生长因子结合蛋白-3
Recombinant Human Insulin Like Growth Factor Binding Protein-4 重组人胰岛素样生长因子结合蛋白-4
Recombinant Human Insulin Like Growth Factor Binding Protein-5 重组人胰岛素样生长因子结合蛋白
Recombinant Human Insulin Like Growth Factor Binding Protein-6 重组人胰岛素样生长因子结合蛋白
Recombinant Human Indian Hedgehog 重组人印度刺猬
Recombinant Human Interleukin-1 alpha 重组人白细胞介素-1
Recombinant Human Interleukin-1 alpha, His Tag 重组人白细胞介素-1α，他的标
Recombinant Mouse Interleukin-1 alpha 重组小鼠白细胞介素-1
Recombinant Rat Interleukin-1 alpha 重组大鼠白细胞介素-1
Recombinant Porcine Interleukin-1 alpha 重组猪白细胞介素-1
Recombinant Human Interleukin-1 beta 重组人白细胞介素-1
Recombinant Human Interleukin-1 beta, His Tag 重组人白细胞介素-1β，他的标