本发明属于医学领域,特别涉及心力衰竭的诊断技术,具体为氨基末端脑钠肽的B细胞表位肽段,氨基酸序列如SEQIDNO:4或SEQIDNO:5所示,其制备的特异性抗体可用于作为心力衰竭的诊断试剂;本发明制备的氨基末端脑钠肽是高纯度的氨基末端脑钠肽单体重组蛋白,该蛋白可用于抗体制备的免疫原及筛选原,同时可以作为建立氨基末端脑钠肽定量检测时的校准品.通过氨基末端脑钠肽蛋白序列的B细胞表位肽段免疫小鼠制备的单克隆抗体具有纯度高(SDS-PAGE检测纯度>96%),效价高(ELISA效价达1:512000),特异性好,可大批量制备等优点.目的建立一种ELISA方法用于定量分析血清抗甲状腺过氧化物酶(TPO)抗体(TPOAb)。方法用生物素化牛血清清蛋白(BSA)和链霉亲合素包被微孔板,同时加入生物素化TPO抗原和待检血清,再加入酶标记抗人IgG,建立间接包被模式酶联免疫法测定抗TPO抗体。经方阵滴定确定生物素化抗原和酶标抗体的最适浓度,优化反应条件,并进行方法学评价。结果本法抗原包被量为0.083μg/mL,检测灵敏度为0.165 IU/mL;高、低浓度混合血清批间变异系数(CV)为9.2%、9.0%,批内CV为4.6%、5.6%;回收率为96.0%~104.0%;包被板37℃放置5 d保持稳定;与抗甲状腺球蛋白抗体(TGAb)交叉反应率为0.22%。经检测120例健康人,将参考值定为〈65.7 IU/mL。与Abbott公司试剂盒检测结果的相关系数(r)为0.985(P〈0.01)。结论间接包被模式适合TPOAb测定,包被抗原用量少,方法灵敏度高,特异性强;操作简单,成本较低,适合基层医院。