小鼠成骨细胞培养试剂盒【Mouse Bone PrimacellTM：Normal Osteoblastic Cells】
产品信息：
产品说明
小鼠成骨细胞培养试剂盒【Mouse Bone PrimacellTM：Normal Osteoblastic Cells】
骨代谢过程中，成骨细胞和破骨细胞相互协调，使骨质的形成与吸收处于一种动态平衡，维持骨骼的不断更新。其中，成骨细胞是骨形成细胞，对骨组织的生长发育、骨代谢平衡、骨量平衡和骨损伤修复起关键作用。体外培养成骨细胞，作为常用的体外实验模型，成为研究骨生理、病理及修复的重要手段，也成为研究成骨细胞生长代谢及骨组织工程的基础。虽然骨组织机械韧性很强，但利用本公司试剂盒中提供的骨组织分离体系来分离，EDTA/EGTA处理过的薄的骨组织片能使得骨组织中成骨细胞的一些功能特性发生改变，从而将成骨细胞分离开来。本试剂盒适用于分离培养新生儿或成年小鼠的成骨细胞。本体系提供了最佳的组织分离条件，分离单个细胞的效率是已出版文献中所报道的5~6倍。此外，本体系还能保证所分离的细胞在培养基中具有很高的活性。利用的成纤维抑制体系，可以最大程度地降低所培养的成骨原代细胞中成纤维细胞的含量。 小鼠成骨细胞培养试剂盒适合于培养小鼠的成骨组织细胞。本试剂盒包含： （1）OptiTDSTM小鼠成骨细胞组织解离液（3×1ml） （2）小鼠成骨细胞组织处理缓冲液（100ml） （3）FibrOutTM小鼠成骨细胞成纤维抑制剂（1ml（500x）） （4）小鼠成骨组织洗液（5x100 ml） （5）小鼠成骨细胞生长因子（1ml 500x）及血清（5x10ml） （6）小鼠成骨细胞基础培养基（5 x100ml） （7）小鼠成骨组织预备液（1 x100 ml） （8）小鼠成骨细胞培养试剂盒使用说明书
试剂及耗材
小鼠成骨细胞培养试剂盒【Mouse Bone PrimacellTM：Normal Osteoblastic Cells】Transwell板：
孔径<3.0µm 细胞共培养 研究下室细胞B代谢物（分泌物）对上室细胞A的影响
孔径=5.0、8.0、12.0µm 细胞趋化 计数进入下室的细胞量，研究下室营养成分或趋化因子对上室细胞的影响
孔径=8.0、12.0µm 细胞迁移 计数进入下室的细胞量，研究上室细胞的迁移能力
孔径=8.0、12.0µm 细胞侵袭 计数进入下室的细胞量，研究上室细胞的侵袭能力
主要步骤
基质胶铺板、接种细胞
培养细胞、需要加药物的按相应浓度加入
细胞计数、结果统计
实验步骤：
1、小鼠成骨细胞培养试剂盒【Mouse Bone PrimacellTM：Normal Osteoblastic Cells】先用marker笔在6孔板背后，用直尺比着，均匀得划横线，大约每隔1cm一道，横穿过孔。每孔至少穿过5条线。
2、在空中加入约5×105个细胞，具体数量因细胞不同而不同，掌握为过夜能铺满。
3、第二天用枪头比着直尺，尽量垂至于背后的横线划痕，枪头要垂直，不能倾斜。
4、用PBS洗细胞3次，去处划下的细胞，加入无血清培养基。
5、放入37度5% CO2培养箱中培养。按0，6，12，24小时取出，拍照 (具体时间依实验需要而定)。
6、统计方法：使用Image J软件打开图片后，随机划取6至8条水平线，计算细胞间距离的均值。
7、数据处理：每个时间点的距离长度-0h距离=每个时间长度细胞整体迁移的距离，求出均数和标准差，时间为横轴，迁移距离为纵轴（mm）作图，并比较初始0h与实验结束时试验组与对照组的照片。
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