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立克次氏体通用PCR试剂盒
立克次氏体通用PCR试剂盒立克次氏体通用PCR试剂盒立克次氏体通用PCR试剂盒立克次氏体通用PCR试剂盒Rickettsia spp.
Rickettsia spp.Rickettsia spp.产品及特点
产品及特点产品及特点立克次氏体（Rickettsia）为革兰氏阴性菌，是一类专性寄生于真核细胞内 的 G-原核生物。是介于细菌与病毒之间，而接近于细菌的一类原核生物。一般 呈球状或杆状,是专性细胞内寄生物，主要寄生于节肢动物，有的会通过蚤、虱、 蜱、螨传入人体、如斑疹伤寒、战壕热。因此对立克次氏体进行快速灵敏的诊 断具有重要的意义。本产品就是为此目的根据 PCR 原理开发的产品，它具有下 列特点：\xa0
\xa0
1. 即开即用，用户只需要提供 DNA 模板。
1. 即开即用，用户只需要提供 DNA 模板。2.引物经过精心优化，专一性强，只扩增立克次氏体，但跟其他微生物无交 叉反应。
2.引物经过精心优化，专一性强，只扩增立克次氏体，但跟其他微生物无交 叉反应。3. 提供阳性对照，便于区分假阴性样品。
3. 提供阳性对照，便于区分假阴性样品。4. PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳。
4. PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳。5. 本试剂盒足够做 40μL 体系的 PCR 50 次，但只能用于科研。
5. 本试剂盒足够做 40μL 体系的 PCR 50 次，但只能用于科研。立克次氏体通用PCR试剂盒规格及成分
立克次氏体通用PCR试剂盒规格及成分立克次氏体通用PCR试剂盒立克次氏体通用PCR试剂盒规格及成分| \t\t\t 编号 \t\t\t | \t\t\t\t\t\t 成分 \t\t\t | \t\t\t\t\t\t 规格 \t\t\t | \t\t
| \t\t\t 试剂一 \t\t\t | \t\t\t\t\t\t PCR MagicMix 3. \t\t\t | \t\t\t\t\t\t 1 mL（红盖）\xa0\xa0\xa0 \t\t\t | \t\t
| \t\t\t 试剂二 \t\t\t | \t\t\t\t\t\t 超纯水 \t\t\t | \t\t\t\t\t\t 1 mL（亮黄盖）\xa0 \t\t\t | \t\t
| \t\t\t 试剂三 \t\t\t | \t\t\t\t\t\t 立克次氏体通用 PCR 引物混合 液 \t\t\t | \t\t\t\t\t\t 100 μL（白盖）\xa0 \t\t\t | \t\t
| \t\t\t 试剂四 \t\t\t | \t\t\t\t\t\t 立克次氏体通用 PCR 阳性对照（1 ×10E8 拷贝/μL） \t\t\t | \t\t\t\t\t\t 50 μL（黄盖）） \t\t\t\xa0 \t\t\t | \t\t
| 试剂五 | \t\t\t\xa0天净沙核酸释放剂试用装 | \t\t\t\xa020 次（1mL，绿盖） | \t\t
| \t\t\t 试剂六 \t\t\t | \t\t\t\t\t\t 使用手册 \t\t\t | \t\t\t\t\t\t 1 份 \t\t\t | \t\t
编号
\t\t\t成分
\t\t\t规格
\t\t\t试剂一
\t\t\tPCR MagicMix 3.
\t\t\t1 mL（红盖）\xa0\xa0\xa0
\t\t\t试剂二
\t\t\t超纯水
\t\t\t1 mL（亮黄盖）\xa0
\t\t\t试剂三
\t\t\t立克次氏体通用 PCR 引物混合 液
\t\t\t100 μL（白盖）\xa0
\t\t\t试剂四
\t\t\t立克次氏体通用 PCR 阳性对照（1 ×10E8 拷贝/μL）
\t\t\t50 μL（黄盖））
\t\t\t\xa0
\t\t\t试剂六
\t\t\t使用手册
\t\t\t1 份
\t\t\t编号
\t\t\t成分
\t\t\t规格
\t\t\t编号
\t\t\t编号
编号\t\t\t\t\t\t成分
\t\t\t成分
成分\t\t\t\t\t\t规格
\t\t\t规格
规格\t\t\t\t\t\t\t试剂一
\t\t\tPCR MagicMix 3.
\t\t\t1 mL（红盖）\xa0\xa0\xa0
\t\t\t试剂一
\t\t\t试剂一
试剂一\t\t\t\t\t\tPCR MagicMix 3.
\t\t\tPCR MagicMix 3.
PCR MagicMix 3.\t\t\t\t\t\t1 mL（红盖）\xa0\xa0\xa0
\t\t\t1 mL（红盖）\xa0\xa0\xa0
1 mL（红盖）\xa0\xa0\xa0\t\t\t\t\t\t\t试剂二
\t\t\t超纯水
\t\t\t1 mL（亮黄盖）\xa0
\t\t\t试剂二
\t\t\t试剂二
试剂二\t\t\t\t\t\t超纯水
\t\t\t超纯水
超纯水\t\t\t\t\t\t1 mL（亮黄盖）\xa0
\t\t\t1 mL（亮黄盖）\xa0
1 mL（亮黄盖）\xa0\t\t\t\t\t\t\t试剂三
\t\t\t立克次氏体通用 PCR 引物混合 液
\t\t\t100 μL（白盖）\xa0
\t\t\t试剂三
\t\t\t试剂三
试剂三\t\t\t\t\t\t立克次氏体通用 PCR 引物混合 液
\t\t\t立克次氏体通用 PCR 引物混合 液
立克次氏体通用 PCR 引物混合 液\t\t\t\t\t\t100 μL（白盖）\xa0
\t\t\t100 μL（白盖）\xa0
100 μL（白盖）\xa0\t\t\t\t\t\t\t试剂四
\t\t\t立克次氏体通用 PCR 阳性对照（1 ×10E8 拷贝/μL）
\t\t\t50 μL（黄盖））
\t\t\t\xa0
\t\t\t试剂四
\t\t\t试剂四
试剂四\t\t\t\t\t\t立克次氏体通用 PCR 阳性对照（1 ×10E8 拷贝/μL）
\t\t\t立克次氏体通用 PCR 阳性对照（1 ×10E8 拷贝/μL）
立克次氏体通用 PCR 阳性对照（1 ×10E8 拷贝/μL）\t\t\t\t\t\t50 μL（黄盖））
\t\t\t\xa0
\t\t\t50 μL（黄盖））
50 μL（黄盖））\t\t\t\xa0
\xa0\t\t\t\t\t\t\t试剂六
\t\t\t使用手册
\t\t\t1 份
\t\t\t试剂六
\t\t\t试剂六
试剂六\t\t\t\t\t\t使用手册
\t\t\t使用手册
使用手册\t\t\t\t\t\t1 份
\t\t\t1 份
1 份\t\t\t\t\t\t运输及保存\xa0低温运输，-20℃保存，保存期限为一年。阳性对照需要单独放置，不要污染其 他试剂。\xa0
运输及保存运输及保存\xa0低温运输，-20℃保存，保存期限为一年。阳性对照需要单独放置，不要污染其 他试剂。\xa0自备试剂 样品 DNA。
\xa0
\xa0
使用方法\xa0一、样品 DNA 的制备
使用方法\xa0使用方法\xa0一、样品 DNA 的制备1. 如果有 N 个样品，必须设置 N+2 个提取，多出的一个是 PC（样品制备阳 性对照），一个是 NC（样品制备阴性对照）。可以用 10μL 阳性对照的 1 千倍稀释液再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样，以此 作为 PC。另外用水作为 NC。
1. 如果有 N 个样品，必须设置 N+2 个提取，多出的一个是 PC（样品制备阳 性对照），一个是 NC（样品制备阴性对照）。可以用 10μL 阳性对照的 1 千倍稀释液再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样，以此 作为 PC。另外用水作为 NC。2. 用自选方法纯化样品的 DNA，本试剂盒跟市场上大多数寄生虫 DNA 提取 试剂盒兼容。\xa0
2. 用自选方法纯化样品的 DNA，本试剂盒跟市场上大多数寄生虫 DNA 提取 试剂盒兼容。\xa0二、设置 PCR 反应（40μL 体系）
二、设置 PCR 反应（40μL 体系）3. 对 N+2 个样品，在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性 对照，故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分：\xa0
3. 对 N+2 个样品，在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性 对照，故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分：\xa0| \t\t\t 成分 \t\t\t | \t\t\t\t\t\t N+2个 \t\t\t样品管 \t\t\t | \t\t\t\t\t\t PCR阴性对照 \t\t\t | \t\t\t\t\t\t PCR阳性对照 \t\t\t | \t\t
| \t\t\t PCR\xa0Magic\xa0Mix\xa03.0 \t\t\t | \t\t\t\t\t\t 各20\xa0μL \t\t\t | \t\t\t\t\t\t 20\xa0μL \t\t\t | \t\t\t\t\t\t 20\xa0μL \t\t\t | \t\t
| \t\t\t 立克次氏体通用\xa0PCR引物混合液 \t\t\t | \t\t\t\t\t\t 各2 μL \t\t\t | \t\t\t\t\t\t 2 μL \t\t\t | \t\t\t\t\t\t 2 μL \t\t\t | \t\t
| \xa0N+2 个样品 DNA 模板 | \t\t\t\xa0各 18 μL | \t\t\t\xa0 | \t\t\t\xa0 | \t\t
| \t\t\t PCR 阴性对照（水） \t\t\t | \t\t\t\t\t\t \xa0 \t\t\t | \t\t\t\t\t\t 18\xa0μL \t\t\t | \t\t\t\t\t\t - \t\t\t | \t\t
| \t\t\t PCR 阳性对照（立克次氏体通用 PCR 阳 性 对 照 的 1000 倍稀释液） \t\t\t | \t\t\t\t\t\t - \t\t\t | \t\t\t\t\t\t \xa0 \t\t\t | \t\t\t\t\t\t 18\xa0μL \t\t\t | \t\t
成分
\t\t\tN+2个
\t\t\t样品管
\t\t\tPCR阴性对照
\t\t\tPCR阳性对照
\t\t\tPCR\xa0Magic\xa0Mix\xa03.0
\t\t\t各20\xa0μL
\t\t\t20\xa0μL
\t\t\t20\xa0μL
\t\t\t立克次氏体通用\xa0PCR引物混合液
\t\t\t各2 μL
\t\t\t2 μL
\t\t\t2 μL
\t\t\tPCR 阴性对照（水）
\t\t\t\xa0
\t\t\t18\xa0μL
\t\t\t-
\t\t\tPCR 阳性对照（立克次氏体通用 PCR 阳 性 对 照 的 1000 倍稀释液）
\t\t\t-
\t\t\t\xa0
\t\t\t18\xa0μL
\t\t\t成分
\t\t\tN+2个
\t\t\t样品管
\t\t\tPCR阴性对照
\t\t\tPCR阳性对照
\t\t\t成分
\t\t\t成分
成分成分\t\t\t\t\t\tN+2个
\t\t\t样品管
\t\t\tN+2个
N+2N+2个个\t\t\t样品管
样品样品管管\t\t\t\t\t\tPCR阴性对照
\t\t\tPCR阴性对照
PCR阴性PCR阴性对照对照\t\t\t\t\t\tPCR阳性对照
\t\t\tPCR阳性对照
PCR阳性PCR阳性对照对照\t\t\t\t\t\t\tPCR\xa0Magic\xa0Mix\xa03.0
\t\t\t各20\xa0μL
\t\t\t20\xa0μL
\t\t\t20\xa0μL
\t\t\tPCR\xa0Magic\xa0Mix\xa03.0
\t\t\tPCR\xa0Magic\xa0Mix\xa03.0
PCR\xa0Magic\xa0Mix\xa03.0\t\t\t\t\t\t各20\xa0μL
\t\t\t各20\xa0μL
各20\xa0μL\t\t\t\t\t\t20\xa0μL
\t\t\t20\xa0μL
20\xa0μL\t\t\t\t\t\t20\xa0μL
\t\t\t20\xa0μL
20\xa0μL\t\t\t\t\t\t\t立克次氏体通用\xa0PCR引物混合液
\t\t\t各2 μL
\t\t\t2 μL
\t\t\t2 μL
\t\t\t立克次氏体通用\xa0PCR引物混合液
\t\t\t立克次氏体通用\xa0PCR引物混合液
立克次氏体通用\xa0PCR引物混合液\t\t\t\t\t\t各2 μL
\t\t\t各2 μL
各2 μL\t\t\t\t\t\t2 μL
\t\t\t2 μL
2 μL\t\t\t\t\t\t2 μL
\t\t\t2 μL
2 μL\t\t\t\t\t\t\tPCR 阴性对照（水）
\t\t\t\xa0
\t\t\t18\xa0μL
\t\t\t-
\t\t\tPCR 阴性对照（水）
\t\t\tPCR 阴性对照（水）
PCR 阴性对照（水）\t\t\t\t\t\t\xa0
\t\t\t\xa0
\xa0\t\t\t\t\t\t18\xa0μL
\t\t\t18\xa0μL
18\xa0μL\t\t\t\t\t\t-
\t\t\t-
-\t\t\t\t\t\t\tPCR 阳性对照（立克次氏体通用 PCR 阳 性 对 照 的 1000 倍稀释液）
\t\t\t-
\t\t\t\xa0
\t\t\t18\xa0μL
\t\t\tPCR 阳性对照（立克次氏体通用 PCR 阳 性 对 照 的 1000 倍稀释液）
\t\t\tPCR 阳性对照（立克次氏体通用 PCR 阳 性 对 照 的 1000 倍稀释液）
PCR 阳性对照（立克次氏体通用 PCR 阳 性 对 照 的 1000 倍稀释液）\t\t\t\t\t\t-
\t\t\t-
-\t\t\t\t\t\t\xa0
\t\t\t\xa0
\xa0\t\t\t\t\t\t18\xa0μL
\t\t\t18\xa0μL
18\xa0μL\t\t\t\t\t\t4. 按下表设置 PCR 反应：
4. 按下表设置 PCR 反应：| \t\t\t 过程 \t\t\t | \t\t\t\t\t\t 温度 \t\t\t | \t\t\t\t\t\t 时间 \t\t\t | \t\t
| \t\t\t 预变性 \t\t\t | \t\t\t\t\t\t 95℃ \t\t\t | \t\t\t\t\t\t 5 min \t\t\t | \t\t
| \t\t\t PCR反应 \t\t\t（35个循环） \t\t\t | \t\t\t\t\t\t 95℃ \t\t\t | \t\t\t\t\t\t 30 sec \t\t\t | \t\t
| \t\t\t 52℃ \t\t\t | \t\t\t\t\t\t 30 sec \t\t\t | \t\t|
| \t\t\t 72℃ \t\t\t | \t\t\t\t\t\t 30 sec \t\t\t | \t\t|
| \t\t\t 最后延伸 \t\t\t | \t\t\t\t\t\t 72℃ \t\t\t | \t\t\t\t\t\t 10 min \t\t\t | \t\t
过程
\t\t\t温度
\t\t\t时间
\t\t\t预变性
\t\t\t95℃
\t\t\t5 min
\t\t\tPCR反应
\t\t\t（35个循环）
\t\t\t95℃
\t\t\t30 sec
\t\t\t52℃
\t\t\t30 sec
\t\t\t72℃
\t\t\t30 sec
\t\t\t最后延伸
\t\t\t72℃
\t\t\t10 min
\t\t\t过程
\t\t\t温度
\t\t\t时间
\t\t\t过程
\t\t\t过程
过程过程\t\t\t\t\t\t温度
\t\t\t温度
温度温度\t\t\t\t\t\t时间
\t\t\t时间
时间时间\t\t\t\t\t\t\t预变性
\t\t\t95℃
\t\t\t5 min
\t\t\t预变性
\t\t\t预变性
预变性\t\t\t\t\t\t95℃
\t\t\t95℃
95℃\t\t\t\t\t\t5 min
\t\t\t5 min
5 min\t\t\t\t\t\t\tPCR反应
\t\t\t（35个循环）
\t\t\t95℃
\t\t\t30 sec
\t\t\tPCR反应
\t\t\t（35个循环）
\t\t\tPCR反应
PCR反应\t\t\t（35个循环）
（35个循环）\t\t\t\t\t\t95℃
\t\t\t95℃
95℃\t\t\t\t\t\t30 sec
\t\t\t30 sec
30 sec\t\t\t\t\t\t\t52℃
\t\t\t30 sec
\t\t\t52℃
\t\t\t52℃
52℃\t\t\t\t\t\t30 sec
\t\t\t30 sec
30 sec\t\t\t\t\t\t\t72℃
\t\t\t30 sec
\t\t\t72℃
\t\t\t72℃
72℃\t\t\t\t\t\t30 sec
\t\t\t30 sec
30 sec\t\t\t\t\t\t\t最后延伸
\t\t\t72℃
\t\t\t10 min
\t\t\t最后延伸
\t\t\t最后延伸
最后延伸\t\t\t\t\t\t72℃
\t\t\t72℃
72℃\t\t\t\t\t\t10 min
\t\t\t10 min
10 min\t\t\t\t\t\t\xa0
\xa0\xa0
\xa0三、电泳检测
三、电泳检测5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix 在 扩增结束后可以直接上样，不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳 性对照必须有 551bp 大小的条带出现，阴性对照必须无任何扩增，否则实 验无效。对没有扩增产物的样品，可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。
本试剂盒适用于各种 RNA制品的反转录反应以及随后的PCR扩增。它采用AMV进行反转录反应，能够获得更长的反转录产物。同时，在20ul反转录体系和50ul PCR反应体系中，还可以一次性得到足够量的PCR产物用于后续的克隆实验。本试剂盒中配置的酶均为进口的酶。RT酶采用进口的AMV，所以cDNA更长，基因的信息保留得更完整！反转录过程中特异的RNase抑制剂可有效降低由于外源RNase污染而导致实验失败的风险。本试剂盒使用方便、快捷，可广泛用于cDNA克隆及目的基因检测等分子生物学实验。
注意：
1. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
2. 为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
