\n MicroRNA主要通过作用于靶基因的\xa03’UTR\xa0起作用,可以通过相关软件和网站进行靶点预测。预测到靶点之后,将目的基因\xa03’UTR\xa0区域构建至psicheck2载体中,通过比较野生型UTR和突变体UTR载体中报告基因表达的改变(监测萤光素酶活性的变化),可以定量反映\xa0miRNA\xa0对目的基因的结合作用,也即用荧光值来判断miRNA是否和靶基因结合。
纽赫生物推出“MicroRNA靶基因验证服务”,为客户寻找或验证microRNA的靶基因。
实验流程如下:
1. 构建靶基因3’UTR报告载体、含突变靶点的3’UTR报告载体。
2. 将miRNA mimics、NC mimics与靶基因3’UTR报告质粒共转染至293T工具细胞中。
3. 检测荧光素酶活性,确定目的microRNA和目的基因之间的关系。
4. 构建含突变靶位点的荧光素酶报告基因载体。
5. 处理数据
图1. psicheck2质粒图谱,用于构建靶基因3’UTR报告载体、含突变靶点的3’UTR报告载体
图2.\xa0双荧光素酶报告系统检测mmu-miR-1a-3p与X-gene之间的相互作用MicroRNA主要通过作用于靶基因的\xa03’UTR\xa0起作用,可以通过相关软件和网站进行靶点预测。预测到靶点之后,将目的基因\xa03’UTR\xa0区域构建至psicheck2载体中,通过比较野生型UTR和突变体UTR载体中报告基因表达的改变(监测萤光素酶活性的变化),可以定量反映\xa0miRNA\xa0对目的基因的结合作用,也即用荧光值来判断miRNA是否和靶基因结合。
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2. 将miRNA mimics、NC mimics与靶基因3’UTR报告质粒共转染至293T工具细胞中。
3. 检测荧光素酶活性,确定目的microRNA和目的基因之间的关系。
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图1. psicheck2质粒图谱,用于构建靶基因3’UTR报告载体、含突变靶点的3’UTR报告载体
图2.\xa0双荧光素酶报告系统检测mmu-miR-1a-3p与X-gene之间的相互作用MicroRNA主要通过作用于靶基因的\xa03’UTR\xa0起作用,可以通过相关软件和网站进行靶点预测。预测到靶点之后,将目的基因\xa03’UTR\xa0区域构建至psicheck2载体中,通过比较野生型UTR和突变体UTR载体中报告基因表达的改变(监测萤光素酶活性的变化),可以定量反映\xa0miRNA\xa0对目的基因的结合作用,也即用荧光值来判断miRNA是否和靶基因结合。MicroRNA主要通过作用于靶基因的\xa03’UTR\xa0起作用,可以通过相关软件和网站进行靶点预测。预测到靶点之后,将目的基因\xa03’UTR\xa0区域构建至psicheck2载体中,通过比较野生型UTR和突变体UTR载体中报告基因表达的改变(监测萤光素酶活性的变化),可以定量反映\xa0miRNA\xa0对目的基因的结合作用,也即用荧光值来判断miRNA是否和靶基因结合。MicroRNA主要通过作用于靶基因的\xa03’UTR\xa0起作用,可以通过相关软件和网站进行靶点预测。预测到靶点之后,将目的基因\xa03’UTR\xa0区域构建至psicheck2载体中,通过比较野生型UTR和突变体UTR载体中报告基因表达的改变(监测萤光素酶活性的变化),可以定量反映\xa0miRNA\xa0对目的基因的结合作用,也即用荧光值来判断miRNA是否和靶基因结合。MicroRNA主要通过作用于靶基因的\xa03’UTR\xa0起作用,可以通过相关软件和网站进行靶点预测。预测到靶点之后,将目的基因\xa03’UTR\xa0区域构建至psicheck2载体中,通过比较野生型UTR和突变体UTR载体中报告基因表达的改变(监测萤光素酶活性的变化),可以定量反映\xa0miRNA\xa0对目的基因的结合作用,也即用荧光值来判断miRNA是否和靶基因结合。MicroRNA主要通过作用于靶基因的\xa03’UTR\xa0起作用,可以通过相关软件和网站进行靶点预测。预测到靶点之后,将目的基因\xa03’UTR\xa0区域构建至psicheck2载体中,通过比较野生型UTR和突变体UTR载体中报告基因表达的改变(监测萤光素酶活性的变化),可以定量反映\xa0miRNA\xa0对目的基因的结合作用,也即用荧光值来判断miRNA是否和靶基因结合。MicroRNA主要通过作用于靶基因的\xa03’UTR\xa0起作用,可以通过相关软件和网站进行靶点预测。预测到靶点之后,将目的基因\xa03’UTR\xa0区域构建至psicheck2载体中,通过比较野生型UTR和突变体UTR载体中报告基因表达的改变(监测萤光素酶活性的变化),可以定量反映\xa0miRNA\xa0对目的基因的结合作用,也即用荧光值来判断miRNA是否和靶基因结合。MicroRNA主要通过作用于靶基因的\xa03’UTR\xa0起作用,可以通过相关软件和网站进行靶点预测。预测到靶点之后,将目的基因\xa03’UTR\xa0区域构建至psicheck2载体中,通过比较野生型UTR和突变体UTR载体中报告基因表达的改变(监测萤光素酶活性的变化),可以定量反映\xa0miRNA\xa0对目的基因的结合作用,也即用荧光值来判断miRNA是否和靶基因结合。MicroRNA主要通过作用于靶基因的\xa03’UTR\xa0起作用,可以通过相关软件和网站进行靶点预测。预测到靶点之后,将目的基因\xa03’UTR\xa0区域构建至psicheck2载体中,通过比较野生型UTR和突变体UTR载体中报告基因表达的改变(监测萤光素酶活性的变化),可以定量反映\xa0miRNA\xa0对目的基因的结合作用,也即用荧光值来判断miRNA是否和靶基因结合。MicroRNA主要通过作用于靶基因的\xa03’UTR\xa0起作用,可以通过相关软件和网站进行靶点预测。预测到靶点之后,将目的基因\xa03’UTR\xa0区域构建至psicheck2载体中,通过比较野生型UTR和突变体UTR载体中报告基因表达的改变(监测萤光素酶活性的变化),可以定量反映\xa0miRNA\xa0对目的基因的结合作用,也即用荧光值来判断miRNA是否和靶基因结合。MicroRNA主要通过作用于靶基因的\xa03’UTR\xa0起作用,可以通过相关软件和网站进行靶点预测。预测到靶点之后,将目的基因\xa03’UTR\xa0区域构建至psicheck2载体中,通过比较野生型UTR和突变体UTR载体中报告基因表达的改变(监测萤光素酶活性的变化),可以定量反映\xa0miRNA\xa0对目的基因的结合作用,也即用荧光值来判断miRNA是否和靶基因结合。MicroRNAMicroRNA主要通过作用于靶基因的\xa03’UTR\xa0\xa03’UTR\xa0起作用,可以通过相关软件和网站进行靶点预测。预测到靶点之后,将目的基因\xa03’UTR\xa0\xa03’UTR\xa0区域构建至psicheck2psicheck2载体中,通过比较野生型UTRUTR和突变体UTRUTR载体中报告基因表达的改变(监测萤光素酶活性的变化),可以定量反映\xa0miRNA\xa0\xa0miRNA\xa0对目的基因的结合作用,也即用荧光值来判断miRNAmiRNA是否和靶基因结合。
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2. 将miRNA mimics、NC mimics与靶基因3’UTR报告质粒共转染至293T工具细胞中。2. 将miRNA mimics、NC mimics与靶基因3’UTR报告质粒共转染至293T工具细胞中。2. 将miRNA mimics、NC mimics与靶基因3’UTR报告质粒共转染至293T工具细胞中。2. 将miRNA mimics、NC mimics与靶基因3’UTR报告质粒共转染至293T工具细胞中。2. 将miRNA mimics、NC mimics与靶基因3’UTR报告质粒共转染至293T工具细胞中。2. 将miRNA mimics、NC mimics与靶基因3’UTR报告质粒共转染至293T工具细胞中。2. 将miRNA mimics、NC mimics与靶基因3’UTR报告质粒共转染至293T工具细胞中。2. 将miRNA mimics、NC mimics与靶基因3’UTR报告质粒共转染至293T工具细胞中。2. 将miRNA mimics、NC mimics与靶基因3’UTR报告质粒共转染至293T工具细胞中。2. 将miRNA mimics、NC mimics与靶基因3’UTR报告质粒共转染至293T工具细胞中。2. 2. 将miRNA mimicsmiRNA mimics、NC mimicsNC mimics与靶基因3’UTR3’UTR报告质粒共转染至293293TT工具细胞中。
3. 检测荧光素酶活性,确定目的microRNA和目的基因之间的关系。3. 检测荧光素酶活性,确定目的microRNA和目的基因之间的关系。3. 检测荧光素酶活性,确定目的microRNA和目的基因之间的关系。3. 检测荧光素酶活性,确定目的microRNA和目的基因之间的关系。3. 检测荧光素酶活性,确定目的microRNA和目的基因之间的关系。3. 检测荧光素酶活性,确定目的microRNA和目的基因之间的关系。3. 检测荧光素酶活性,确定目的microRNA和目的基因之间的关系。3. 检测荧光素酶活性,确定目的microRNA和目的基因之间的关系。3. 检测荧光素酶活性,确定目的microRNA和目的基因之间的关系。3. 检测荧光素酶活性,确定目的microRNA和目的基因之间的关系。3. 3. 检测荧光素酶活性,确定目的microRNAmicroRNA和目的基因之间的关系。
4. 构建含突变靶位点的荧光素酶报告基因载体。4. 构建含突变靶位点的荧光素酶报告基因载体。4. 构建含突变靶位点的荧光素酶报告基因载体。4. 构建含突变靶位点的荧光素酶报告基因载体。4. 构建含突变靶位点的荧光素酶报告基因载体。4. 构建含突变靶位点的荧光素酶报告基因载体。4. 构建含突变靶位点的荧光素酶报告基因载体。4. 构建含突变靶位点的荧光素酶报告基因载体。4. 构建含突变靶位点的荧光素酶报告基因载体。4. 构建含突变靶位点的荧光素酶报告基因载体。4. 4. 构建含突变靶位点的荧光素酶报告基因载体。
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图1. psicheck2质粒图谱,用于构建靶基因3’UTR报告载体、含突变靶点的3’UTR报告载体图1. psicheck2质粒图谱,用于构建靶基因3’UTR报告载体、含突变靶点的3’UTR报告载体图1. psicheck2质粒图谱,用于构建靶基因3’UTR报告载体、含突变靶点的3’UTR报告载体图1. psicheck2质粒图谱,用于构建靶基因3’UTR报告载体、含突变靶点的3’UTR报告载体图1. psicheck2质粒图谱,用于构建靶基因3’UTR报告载体、含突变靶点的3’UTR报告载体图1. psicheck2质粒图谱,用于构建靶基因3’UTR报告载体、含突变靶点的3’UTR报告载体图1. psicheck2质粒图谱,用于构建靶基因3’UTR报告载体、含突变靶点的3’UTR报告载体图1. psicheck2质粒图谱,用于构建靶基因3’UTR报告载体、含突变靶点的3’UTR报告载体图1. psicheck2质粒图谱,用于构建靶基因3’UTR报告载体、含突变靶点的3’UTR报告载体图1. psicheck2质粒图谱,用于构建靶基因3’UTR报告载体、含突变靶点的3’UTR报告载体图1. psicheck2质粒图谱,用于构建靶基因3’UTR报告载体、含突变靶点的3’UTR报告载体图图图1. psicheck21. psicheck21. psicheck21. psicheck2质粒图谱,用于构建靶基因质粒图谱,用于构建靶基因质粒图谱,用于构建靶基因3’UTR3’UTR3’UTR3’UTR报告载体、含突变靶点的报告载体、含突变靶点的报告载体、含突变靶点的3’UTR3’UTR3’UTR3’UTR报告载体报告载体报告载体
图2.\xa0双荧光素酶报告系统检测mmu-miR-1a-3p与X-gene之间的相互作用图2.\xa0双荧光素酶报告系统检测mmu-miR-1a-3p与X-gene之间的相互作用图2.\xa0双荧光素酶报告系统检测mmu-miR-1a-3p与X-gene之间的相互作用图2.\xa0双荧光素酶报告系统检测mmu-miR-1a-3p与X-gene之间的相互作用图2.\xa0双荧光素酶报告系统检测mmu-miR-1a-3p与X-gene之间的相互作用图2.\xa0双荧光素酶报告系统检测mmu-miR-1a-3p与X-gene之间的相互作用图2.\xa0双荧光素酶报告系统检测mmu-miR-1a-3p与X-gene之间的相互作用图2.\xa0双荧光素酶报告系统检测mmu-miR-1a-3p与X-gene之间的相互作用图2.\xa0双荧光素酶报告系统检测mmu-miR-1a-3p与X-gene之间的相互作用图2.\xa0双荧光素酶报告系统检测mmu-miR-1a-3p与X-gene之间的相互作用图2.\xa0双荧光素酶报告系统检测mmu-miR-1a-3p与X-gene之间的相互作用图图图2.\xa02.\xa02.\xa02.\xa0双荧光素酶报告系统检测双荧光素酶报告系统检测双荧光素酶报告系统检测mmu-miR-1a-3pmmu-miR-1a-3pmmu-miR-1a-3pmmu-miR-1a-3p与与与X-geneX-geneX-geneX-gene之间的之间的之间的相互作用相互作用相互作用
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