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特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

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无内毒素质粒中提试剂盒 DNA纯化由老牌试剂供应北京百奥莱博供货并提供技术支持，本产品用于生化科研试验，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多无内毒素质粒中提试剂盒等DNA纯化产品请联系我司咨询订购。

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名称：无内毒素质粒中提试剂盒 DNA纯化
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博
规格：50次
英文名：NoEndo Plasmid Midi Kit
编号：WE0166
\u2003\u2003内毒素是质粒提取中常见的污染物，由于真核细胞对内毒素非常敏感，因此，如果质粒中含有内毒素会大大降低真核细胞转染效率。本试剂盒提供一种简单、快捷、高效提取无内毒素质粒的新方法，提取的质粒最大限度去除内毒素，并能有效去除基因组DNA、RNA、蛋白等污染。

\u2003\u2003本试剂盒通过碱裂解法裂解细胞，新型硅基质膜高效专一的结合质粒DNA，同时采用特殊的缓冲液系统和除内毒素过滤柱，有效去除内毒素、蛋白等杂质。由本试剂盒所得质粒纯度高、质量稳定，特别适用于细胞转染，同时也可用于DNA测序，PCR，基于PCR的突变，体外转录，转化细菌，内切酶消化等下游实验。

试剂盒组成：

名称：无内毒素质粒中提试剂盒 DNA纯化无内毒素质粒中提试剂盒 DNA纯化无内毒素质粒中提试剂盒 DNA纯化
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博
规格：50次
英文名：NoEndo Plasmid Midi Kit
编号：WE0166
\u2003\u2003内毒素是质粒提取中常见的污染物，由于真核细胞对内毒素非常敏感，因此，如果质粒中含有内毒素会大大降低真核细胞转染效率。本试剂盒提供一种简单、快捷、高效提取无内毒素质粒的新方法，提取的质粒最大限度去除内毒素，并能有效去除基因组DNA、RNA、蛋白等污染。

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试剂盒组成试剂盒组成：\xa0\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t

组份	50次
Buffer P1	30ml
Buffer P2	30ml
Buffer E3	30ml
Buffer PS	15ml
Buffer PW(浓缩液)	10ml
Endo-Free Buffer EB	10ml
RNase A(10 mg/ml)	600μl
过滤柱FM及收集管	50套
吸附柱DL及收集管	50套

\t\t\t\t\t\t组份\t\t\t50次\t\t\t\t\t\t\tBuffer P1\t\t\t30ml\t\t\t\t\t\t\tBuffer P2\t\t\t30ml\t\t\t\t\t\t\tBuffer E3\t\t\t30ml\t\t\t\t\t\t\tBuffer PS\t\t\t15ml\t\t\t\t\t\t\tBuffer PW(浓缩液)\t\t\t10ml\t\t\t\t\t\t\tEndo-Free Buffer EB\t\t\t10ml\t\t\t\t\t\t\tRNase A(10 mg/ml)\t\t\t600μl\t\t\t\t\t\t\t过滤柱FM及收集管\t\t\t50套\t\t\t\t\t\t\t吸附柱DL及收集管\t\t\t50套\t\t\t\t\t\t\t\t组份\t\t\t50次\t\t\t\t\t组份组份\t\t\t50次50次\t\t\t\t\t\t\tBuffer P1\t\t\t30ml\t\t\t\t\tBuffer P1Buffer P1\t\t\t30ml30ml\t\t\t\t\t\t\tBuffer P2\t\t\t30ml\t\t\t\t\tBuffer P2Buffer P2\t\t\t30ml30ml\t\t\t\t\t\t\tBuffer E3\t\t\t30ml\t\t\t\t\tBuffer E3Buffer E3\t\t\t30ml30ml\t\t\t\t\t\t\tBuffer PS\t\t\t15ml\t\t\t\t\tBuffer PSBuffer PS\t\t\t15ml15ml\t\t\t\t\t\t\tBuffer PW(浓缩液)\t\t\t10ml\t\t\t\t\tBuffer PW(浓缩液)Buffer PW(浓缩液)\t\t\t10ml10ml\t\t\t\t\t\t\tEndo-Free Buffer EB\t\t\t10ml\t\t\t\t\tEndo-Free Buffer EBEndo-Free Buffer EB\t\t\t10ml10ml\t\t\t\t\t\t\tRNase A(10 mg/ml)\t\t\t600μl\t\t\t\t\tRNase A(10 mg/ml)RNase A(10 mg/ml)\t\t\t600μl600μl\t\t\t\t\t\t\t过滤柱FM及收集管\t\t\t50套\t\t\t\t\t过滤柱FM及收集管过滤柱FM及收集管\t\t\t50套50套\t\t\t\t\t\t\t吸附柱DL及收集管\t\t\t50套\t\t\t\t\t吸附柱DL及收集管吸附柱DL及收集管\t\t\t50套50套\t\t\t

自备试剂自备试剂：无水乙醇、异丙醇。

实验前准备及重要注意事项/strong>：
1、所有组分可在干燥、室温(15～30℃)环境稳定保存1年，更长时间保存可置于2～8℃，加入RNase A的Buffer P1 置于2～8℃可稳定保存6个月。
2、第一次使用前，将RNase A溶液全部加入到Buffer P1中，混匀，置于2–8℃保存，使用前需在室温中放置一段时间，恢复至室温后使用。
3、第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明在Buffer PW中加入无水乙醇。
4、使用前请先检查Buffer P2 和Buffer E3是否出现结晶或沉淀，如有结晶或沉淀现象，可在37℃水浴几分钟，即可恢复澄清。
5、注意不要直接接触Buffer P2和Buffer E3，使用后应立即盖紧盖子。
6、提取质粒的量和纯度与细菌培养浓度、菌株种类、质粒大小、质粒拷贝数等因素有关。

操作步骤：
1、取5-15ml过夜培养的菌液，加入离心管(自备)中，13000rpm(~～～16200×g)离心1分钟收集细菌，尽量吸弃全部上清。
2、向留有菌体沉淀的离心管中加入500μl Buffer P1(请先检查是否已加入RNase A)，使用移液器或涡旋振荡器充分混匀，悬浮细菌沉淀。
注意：如果菌块未彻底混匀，将会影响裂解效果，使提取量和纯度偏低。
3、向离心管中加入500μl Buffer P2，温和地上下颠倒混匀8-10次，使菌体充分裂解，室温放置3-5分钟。此时溶液应变得清亮粘稠。
注意：温和混匀，不要剧烈震荡，以免打断基因组DNA，造成提取的质粒中混有基因组DNA片段。如果溶液未变得清亮，提示可能菌量过大，裂解不彻底，应减少菌体量。
4、向离心管中加入500μl Buffer E3，立即上下颠倒混匀8-10次，此时出现白色絮状沉淀，室温放置5分钟。13000rpm离心5分钟，吸取上清，将上清加入过滤柱FM中(已装入收集管)，13000rpm离心1分钟过滤，将收集管中的滤液转移到离心管(自备)中。
注意：
1)Buffer E3 加入后应立即混匀，避免产生局部沉淀。
2)吸附柱的最大容积为750μl，所以上清液请分两次过滤，并混合于同一自备离心管中。
5、向滤液中加入450μl异丙醇，上下颠倒混匀。
6、柱平衡：向已装入收集管的吸附柱中加入200μl Buffer PS，13000rpm离心2分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
7、将步骤5中滤液与异丙醇的混合溶液转移到平衡好的吸附柱(已装入收集管)中。
8、13000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
注意：吸附柱的最大容积为750μl，所以第5步中所得溶液分多次过柱。
9、向吸附柱中加入750μl Buffer PW(请先检查是否已加入无水乙醇)，13000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液。
10、将吸附柱重新放回收集管中，13000rpm离心1分钟。
注意：这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除，乙醇的残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR等)。
11、将吸附柱置于一个新的离心管(自备)中，向吸附膜的中间部位加入100-200μl Endo-Free Buffer EB，室温放置2-5分钟，13000rpm离心2分钟。-20℃保存质粒。
注意：
1)为了增加质粒的回收效率，可将得到的溶液重新加入到吸附柱中，室温放置2-5分钟，13000rpm离心2分钟。Endo-Free Buffer EB在65-70℃水浴预热，适当延长吸附和洗脱的时间，可以增加提取效率。
2)质粒拷贝数较低或>10 kb时，Endo-Free Buffer EB在65-70℃水浴预热，可以增加提取效率。

储存条件：室温(15～30℃)

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无内毒素质粒中提试剂盒 DNA纯化关键词：WE0166,NoEndo Plasmid Midi Kit ,无内毒素质粒中提试剂盒

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BTN71001\xa0柱式病毒RNAOUT\xa0Column\xa0Viral\xa0RNAOUT
二安替比林甲*(代"烷")\xa0Adenosine\xa01251-85-0
聚*乙*(代"烯")树脂\xa0β-Alanine
BTN130968\xa0预混型丙*(代"烯")酰胺-甲叉双丙*(代"烯")干粉(29:1)\xa0Premixed\xa0Acr-Bis\xa0Powder
SJ0699\xa0低分子量蛋白Marker\xa0Ⅱ\xa0\xa0\xa0(14.4-116kD)
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ARB13416\xa0鸡C反应蛋白(CRP)检测服务\xa0Chicken\xa0c-reactive\xa0protein,crp\xa0ELISA\xa0KIT
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PY02-338\xa0\xa0改良CCD(mCCD)琼脂基础\xa0\xa0250克\xa0\xa0
ARB11868\xa0人糖胺聚糖(GAG)血清中含量检测\xa0Human\xa0glycosaminoglycan,gag\xa0ELISA\xa0KIT
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ARB13956\xa0猪热休克蛋白20(HSP-20)酶标法分析\xa0Porcine\xa0heat\xa0shock\xa0protein\xa020,hsp-20\xa0ELISA\xa0KIT
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F010104\xa0小鼠抗人血清白蛋白抗体\xa0Monoclonal\xa0Mouse\xa0Anti-HAS
PY02-222\xa0\xa0CIN-II培养基基础\xa0\xa0250克\xa0\xa0
298-93-1\xa0MTT\xa0噻唑兰
SJ0703\xa0胰蛋白酶溶液0.25%
PY02-249\xa0\xa0DNA酶琼脂\xa0\xa0100克\xa0\xa0
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ARB10626\xa0人血浆抗凝蛋白S(PS)Elisa方法检测\xa0Human\xa0plasma\xa0anticoagulant\xa0protein\xa0s,ps\xa0ELISA\xa0KIT
7-*基-4-甲基香豆素\xa0dATP,3Na\xa026093-31-2
心肌黄酶\xa0Sephadex\xa0G-15\xa09001-18-7
BTN131136\xa0Ficoll-Paque介质\xa0Ficoll-Paque
D-*甘*酸\xa0RNA\xa0875-74-1
BTN130583\xa0小鼠抗VSV-G标签单抗\xa0Anti\xa0VSV-G-Tag\xa0Mouse\xa0Mab
ARB12957\xa0小鼠血管内皮细胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)定量分析\xa0Mouse\xa0vascuolar\xa0cell\xa0adhesion\xa0molecule\xa01,vcam-1\xa0ELISA\xa0KIT
BTN130628\xa0Lambda核酸外切酶\xa0Lambda\xa0Exonulease

实验前准备及重要注意事项/strong>：
1、所有组分可在干燥、室温(15～30℃)环境稳定保存1年，更长时间保存可置于2～8℃，加入RNase A的Buffer P1 置于2～8℃可稳定保存6个月。
2、第一次使用前，将RNase A溶液全部加入到Buffer P1中，混匀，置于2–8℃保存，使用前需在室温中放置一段时间，恢复至室温后使用。
3、第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明在Buffer PW中加入无水乙醇。
4、使用前请先检查Buffer P2 和Buffer E3是否出现结晶或沉淀，如有结晶或沉淀现象，可在37℃水浴几分钟，即可恢复澄清。
5、注意不要直接接触Buffer P2和Buffer E3，使用后应立即盖紧盖子。
6、提取质粒的量和纯度与细菌培养浓度、菌株种类、质粒大小、质粒拷贝数等因素有关。

操作步骤操作步骤：
1、取5-15ml过夜培养的菌液，加入离心管(自备)中，13000rpm(~～～16200×g)离心1分钟收集细菌，尽量吸弃全部上清。
2、向留有菌体沉淀的离心管中加入500μl Buffer P1(请先检查是否已加入RNase A)，使用移液器或涡旋振荡器充分混匀，悬浮细菌沉淀。
注意：如果菌块未彻底混匀，将会影响裂解效果，使提取量和纯度偏低。
3、向离心管中加入500μl Buffer P2，温和地上下颠倒混匀8-10次，使菌体充分裂解，室温放置3-5分钟。此时溶液应变得清亮粘稠。
注意：温和混匀，不要剧烈震荡，以免打断基因组DNA，造成提取的质粒中混有基因组DNA片段。如果溶液未变得清亮，提示可能菌量过大，裂解不彻底，应减少菌体量。
4、向离心管中加入500μl Buffer E3，立即上下颠倒混匀8-10次，此时出现白色絮状沉淀，室温放置5分钟。13000rpm离心5分钟，吸取上清，将上清加入过滤柱FM中(已装入收集管)，13000rpm离心1分钟过滤，将收集管中的滤液转移到离心管(自备)中。
注意：
1)Buffer E3 加入后应立即混匀，避免产生局部沉淀。
2)吸附柱的最大容积为750μl，所以上清液请分两次过滤，并混合于同一自备离心管中。
5、向滤液中加入450μl异丙醇，上下颠倒混匀。
6、柱平衡：向已装入收集管的吸附柱中加入200μl Buffer PS，13000rpm离心2分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
7、将步骤5中滤液与异丙醇的混合溶液转移到平衡好的吸附柱(已装入收集管)中。
8、13000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
注意：吸附柱的最大容积为750μl，所以第5步中所得溶液分多次过柱。
9、向吸附柱中加入750μl Buffer PW(请先检查是否已加入无水乙醇)，13000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液。
10、将吸附柱重新放回收集管中，13000rpm离心1分钟。
注意：这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除，乙醇的残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR等)。
11、将吸附柱置于一个新的离心管(自备)中，向吸附膜的中间部位加入100-200μl Endo-Free Buffer EB，室温放置2-5分钟，13000rpm离心2分钟。-20℃保存质粒。
注意：
1)为了增加质粒的回收效率，可将得到的溶液重新加入到吸附柱中，室温放置2-5分钟，13000rpm离心2分钟。Endo-Free Buffer EB在65-70℃水浴预热，适当延长吸附和洗脱的时间，可以增加提取效率。
2)质粒拷贝数较低或>10 kb时，Endo-Free Buffer EB在65-70℃水浴预热，可以增加提取效率。

储存条件：室温(15～30℃)

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132-32-1\xa03-*基-9-乙基咔唑(AEC)\xa03-Amino-9-Ethylcarbazole
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PY02-222\xa0\xa0CIN-II培养基基础\xa0\xa0250克\xa0\xa0
298-93-1\xa0MTT\xa0噻唑兰
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