DNA尿素-PAGE制胶及电泳试剂盒(8%可制胶1L)

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博尔森/BIOESN
中国
2022-07-02 12:05

上海博尔森生物科技有限公司

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产品说明

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DNA尿素-PAGE制胶及电泳试剂盒(8%可制胶1L)

DNA尿素-PAGE制胶及电泳试剂盒(8%可制胶1L)DNA尿素-PAGE制胶及电泳试剂盒(8%可制胶1L)DNA尿素-PAGE制胶及电泳试剂盒(8%可制胶1L)

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储存条件:Acr-Bis 溶液和上样液短期 4℃保存,长期-20℃保存,有效期 2 年。

储存条件:Acr-Bis 溶液和上样液短期 4℃保存,长期-20℃保存,有效期 2 年。储存条件:Acr-Bis 溶液和上样液短期 4℃保存,长期-20℃保存,有效期 2 年。储存条件:Acr-Bis 溶液和上样液短期 4℃保存,长期-20℃保存,有效期 2 年。

产品组成:

产品组成:产品组成:产品组成:

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操作步骤:

操作步骤:操作步骤:操作步骤:

用于 SSCP-PCR 分析的非变性 PAGE 电泳(其他应用请相应修改参数)

用于 SSCP-PCR 分析的非变性 PAGE 电泳(其他应用请相应修改参数)用于 SSCP-PCR 分析的非变性 PAGE 电泳(其他应用请相应修改参数)

一、PAGE 浓度和交联度的选择指南

一、PAGE 浓度和交联度的选择指南一、PAGE 浓度和交联度的选择指南

1.尿素-PAGE 一般推荐用 29:1(的交联度,在此条件下,DNA 片段和最适 PAGE 浓度对应关系如下:

1.尿素-PAGE 一般推荐用 29:1(的交联度,在此条件下,DNA 片段和最适 PAGE 浓度对应关系如下:1.尿素-PAGE 一般推荐用 29:1(的交联度,在此条件下,DNA 片段和最适 PAGE 浓度对应关系如下:

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二、胶制备尿素-PAGE 胶(参照附表)

二、胶制备尿素-PAGE 胶(参照附表)二、胶制备尿素-PAGE 胶(参照附表)

1.参照附表的配置合适浓度的 PAGE 胶,摇晃混匀。

1.参照附表的配置合适浓度的 PAGE 胶,摇晃混匀。1.参照附表的配置合适浓度的 PAGE 胶,摇晃混匀。

2.将配置好的胶倒入胶板,在胶的液面距离达到顶部时停止灌胶,插入梳子。

2.将配置好的胶倒入胶板,在胶的液面距离达到顶部时停止灌胶,插入梳子。2.将配置好的胶倒入胶板,在胶的液面距离达到顶部时停止灌胶,插入梳子。

3. 室温聚合 30-60 分钟(低温抑制聚合反应,故最好室温)。

3. 室温聚合 30-60 分钟(低温抑制聚合反应,故最好室温)。3. 室温聚合 30-60 分钟(低温抑制聚合反应,故最好室温)。

4. 待胶凝固后拔出梳子,用 0.5×TBE 液冲洗加样孔。

4. 待胶凝固后拔出梳子,用 0.5×TBE 液冲洗加样孔。4. 待胶凝固后拔出梳子,用 0.5×TBE 液冲洗加样孔。

三、样品处理

三、样品处理三、样品处理

对一般样品、测序样品、微卫星 DNA、AFLP 样品、DDRT 样品、RPA 样品:将样品跟上样液 1:1 混合,95℃ 3 分钟变性,然后放冰上待用;对 TGGE 样品:可以直接上样。

对一般样品、测序样品、微卫星 DNA、AFLP 样品、DDRT 样品、RPA 样品:将样品跟上样液 1:1 混合,95℃ 3 分钟变性,然后放冰上待用;对 TGGE 样品:可以直接上样。对一般样品、测序样品、微卫星 DNA、AFLP 样品、DDRT 样品、RPA 样品:将样品跟上样液 1:1 混合,95℃ 3 分钟变性,然后放冰上待用;对 TGGE 样品:可以直接上样。

四、电泳

四、电泳四、电泳

1.将凝胶板固定在电泳装置上,往上槽和下槽中加入足够 0.5×TEB 电泳液。

1.将凝胶板固定在电泳装置上,往上槽和下槽中加入足够 0.5×TEB 电泳液。1.将凝胶板固定在电泳装置上,往上槽和下槽中加入足够 0.5×TEB 电泳液。

2.预电泳 5-30 分钟后,将冰上放置的样品上样。

2.预电泳 5-30 分钟后,将冰上放置的样品上样。2.预电泳 5-30 分钟后,将冰上放置的样品上样。

3. 连接电源线,打开电源开关。根据胶的大小选择功率(固定功率可以固定产热,这样不容易发生过热而使胶板破裂的现象。如果固定电流或电压,产热都将随电泳时间而变化,不好控制)。对小胶一般用 5-6W固定功率,大胶用 15-25W 固定功率。

3. 连接电源线,打开电源开关。根据胶的大小选择功率(固定功率可以固定产热,这样不容易发生过热而使胶板破裂的现象。如果固定电流或电压,产热都将随电泳时间而变化,不好控制)。对小胶一般用 5-6W固定功率,大胶用 15-25W 固定功率。3. 连接电源线,打开电源开关。根据胶的大小选择功率(固定功率可以固定产热,这样不容易发生过热而使胶板破裂的现象。如果固定电流或电压,产热都将随电泳时间而变化,不好控制)。对小胶一般用 5-6W固定功率,大胶用 15-25W 固定功率。

4. 终止电泳,取出凝胶进行后续的处理(如银染)。注意:如果银染,必须延长固定时间以便洗出尿素,否则残留尿素会干扰后面的银染。

4. 终止电泳,取出凝胶进行后续的处理(如银染)。注意:如果银染,必须延长固定时间以便洗出尿素,否则残留尿素会干扰后面的银染。4. 终止电泳,取出凝胶进行后续的处理(如银染)。注意:如果银染,必须延长固定时间以便洗出尿素,否则残留尿素会干扰后面的银染。

注意事项:

注意事项:注意事项:

1. APS 溶液不稳定,每次取用后立即放回冰箱,以防失效;若发现凝胶聚合时间延长,应考虑更换 10% APS。

1. APS 溶液不稳定,每次取用后立即放回冰箱,以防失效;若发现凝胶聚合时间延长,应考虑更换 10% APS。1. APS 溶液不稳定,每次取用后立即放回冰箱,以防失效;若发现凝胶聚合时间延长,应考虑更换 10% APS。

2. PAGE 凝胶的凝聚速度与温度以及 APS、TEMED 的用量密切相关;可通过改变 APS 及 TEMED 的用量,控制 PAGE 凝胶的聚合速度,凝胶聚合过快不利于操作。

2. PAGE 凝胶的凝聚速度与温度以及 APS、TEMED 的用量密切相关;可通过改变 APS 及 TEMED 的用量,控制 PAGE 凝胶的聚合速度,凝胶聚合过快不利于操作。2. PAGE 凝胶的凝聚速度与温度以及 APS、TEMED 的用量密切相关;可通过改变 APS 及 TEMED 的用量,控制 PAGE 凝胶的聚合速度,凝胶聚合过快不利于操作。

3. 在凝胶配制过程中,尤其是液体混匀步骤,应尽量避免气泡的产生。

3. 在凝胶配制过程中,尤其是液体混匀步骤,应尽量避免气泡的产生。3. 在凝胶配制过程中,尤其是液体混匀步骤,应尽量避免气泡的产生。

4.具有神经毒性,操作时请穿戴实验服和一次性手套。

4.具有神经毒性,操作时请穿戴实验服和一次性手套。4.具有神经毒性,操作时请穿戴实验服和一次性手套。

特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
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