动物组织细胞RNA提取试剂盒

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博尔森/BIOESN
中国
2022-07-02 12:09

上海博尔森生物科技有限公司

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产品说明

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动物组织细胞RNA提取试剂盒

动物组织细胞RNA提取试剂盒动物组织细胞RNA提取试剂盒动物组织细胞RNA提取试剂盒

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储存条件:2-8℃保存,保质期 1 年。

储存条件:2-8℃保存,保质期 1 年。储存条件:2-8℃保存,保质期 1 年。储存条件:2-8℃保存,保质期 1 年。

产品内容:

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动物组织细胞 RNA 提取试剂盒基于 Trizol 的方法,适用于常规动物组织细胞样品的总 RNA提取。纯化好的总 RNA 可用于 mRNA 分离,RT-PCR,Northern 杂交等下游分子实验。

动物组织细胞 RNA 提取试剂盒基于 Trizol 的方法,适用于常规动物组织细胞样品的总 RNA提取。纯化好的总 RNA 可用于 mRNA 分离,RT-PCR,Northern 杂交等下游分子实验。动物组织细胞 RNA 提取试剂盒基于 Trizol 的方法,适用于常规动物组织细胞样品的总 RNA提取。纯化好的总 RNA 可用于 mRNA 分离,RT-PCR,Northern 杂交等下游分子实验。

不适用于骨骼以及软骨等特殊样品的 RNA 提取,此类样品建议使用骨组织 RNA 提取试剂盒(Cat:RE641)。

不适用于骨骼以及软骨等特殊样品的 RNA 提取,此类样品建议使用骨组织 RNA 提取试剂盒(Cat:RE641)。不适用于骨骼以及软骨等特殊样品的 RNA 提取,此类样品建议使用骨组织 RNA 提取试剂盒(Cat:RE641)。

自备试剂:

自备试剂:自备试剂:自备试剂:

氯仿

氯仿氯仿

(一)样品处理:

(一)样品处理:(一)样品处理:(一)样品处理:

1. 贴壁细胞:吸尽培养液,在每 10 cm2 细胞中加入 1 mL 的裂解液 。用枪轻柔吹打数次,确保细胞全部裂解并且让基因组 DNA 充分断裂。

1. 贴壁细胞:吸尽培养液,在每 10 cm2 细胞中加入 1 mL 的裂解液 。用枪轻柔吹打数次,确保细胞全部裂解并且让基因组 DNA 充分断裂。1. 贴壁细胞:吸尽培养液,在每 10 cm2 细胞中加入 1 mL 的裂解液 。用枪轻柔吹打数次,确保细胞全部裂解并且让基因组 DNA 充分断裂。

2. 培养细胞: 每 1-5×10

2. 培养细胞: 每 1-5×102. 培养细胞: 每 1-5×10

6 细胞沉淀,加入 1mL 的裂解液。用枪轻柔吹打数次,确保细胞全部裂解并且让基因组 DNA 充分断裂。

6 细胞沉淀,加入 1mL 的裂解液。用枪轻柔吹打数次,确保细胞全部裂解并且让基因组 DNA 充分断裂。6 细胞沉淀,加入 1mL 的裂解液。用枪轻柔吹打数次,确保细胞全部裂解并且让基因组 DNA 充分断裂。

3. 新鲜组织:每 50-100mg 的组织样品液氮研磨成粉后加入 1 mL 的裂解液,或者直接加入 1 mL 的裂解液用匀浆器充分研磨。震荡 30 s。

3. 新鲜组织:每 50-100mg 的组织样品液氮研磨成粉后加入 1 mL 的裂解液,或者直接加入 1 mL 的裂解液用匀浆器充分研磨。震荡 30 s。3. 新鲜组织:每 50-100mg 的组织样品液氮研磨成粉后加入 1 mL 的裂解液,或者直接加入 1 mL 的裂解液用匀浆器充分研磨。震荡 30 s。

(二)样品纯化:

(二)样品纯化:(二)样品纯化:

1. 将裂解物转移至一个干净的 1.5 mL 塑料离心管中,然后加入 0.2 倍体积的自备氯仿(1 mL 裂解液需 0.2mL 氯仿),振荡器上充分振荡混匀 30 s。

1. 将裂解物转移至一个干净的 1.5 mL 塑料离心管中,然后加入 0.2 倍体积的自备氯仿(1 mL 裂解液需 0.2mL 氯仿),振荡器上充分振荡混匀 30 s。1. 将裂解物转移至一个干净的 1.5 mL 塑料离心管中,然后加入 0.2 倍体积的自备氯仿(1 mL 裂解液需 0.2mL 氯仿),振荡器上充分振荡混匀 30 s。

2. 12,000rpm 室温离心 3 min,吸取上清到新的离心管中,建议取 900 uL 上清。

2. 12,000rpm 室温离心 3 min,吸取上清到新的离心管中,建议取 900 uL 上清。2. 12,000rpm 室温离心 3 min,吸取上清到新的离心管中,建议取 900 uL 上清。

3. 在上清中加入 900 uL 的 RNA 结合液,颠倒混匀,分多次加入同一个 RNA 纯化柱中(如有絮状物或沉淀产生,一并加入纯化柱中)。12,000rpm 离心 1min,弃穿透液。

3. 在上清中加入 900 uL 的 RNA 结合液,颠倒混匀,分多次加入同一个 RNA 纯化柱中(如有絮状物或沉淀产生,一并加入纯化柱中)。12,000rpm 离心 1min,弃穿透液。3. 在上清中加入 900 uL 的 RNA 结合液,颠倒混匀,分多次加入同一个 RNA 纯化柱中(如有絮状物或沉淀产生,一并加入纯化柱中)。12,000rpm 离心 1min,弃穿透液。

4.在纯化柱中加入 0.5mL RNA 洗涤液,室温 12,000rpm 离心 30 s,弃穿透液;重复洗涤一次。

4.在纯化柱中加入 0.5mL RNA 洗涤液,室温 12,000rpm 离心 30 s,弃穿透液;重复洗涤一次。4.在纯化柱中加入 0.5mL RNA 洗涤液,室温 12,000rpm 离心 30 s,弃穿透液;重复洗涤一次。

(三)RNA 收集:

(三)RNA 收集:(三)RNA 收集:

1. 将结合有 RNA 的纯化柱 12,000rpm 离心 1min,甩干乙醇。

1. 将结合有 RNA 的纯化柱 12,000rpm 离心 1min,甩干乙醇。1. 将结合有 RNA 的纯化柱 12,000rpm 离心 1min,甩干乙醇。

2. 弃收集管,将柱芯转移到1.5mL的RNase-free离心管中,加入30-50uL RNA溶解液,室温放置 1 min,12,000 rpm 离心 1 min 洗脱 RNA。得到的 RNA 可直接用于后续实验或者 -80℃ 存放。

2. 弃收集管,将柱芯转移到1.5mL的RNase-free离心管中,加入30-50uL RNA溶解液,室温放置 1 min,12,000 rpm 离心 1 min 洗脱 RNA。得到的 RNA 可直接用于后续实验或者 -80℃ 存放。2. 弃收集管,将柱芯转移到1.5mL的RNase-free离心管中,加入30-50uL RNA溶解液,室温放置 1 min,12,000 rpm 离心 1 min 洗脱 RNA。得到的 RNA 可直接用于后续实验或者 -80℃ 存放。

3. 如果要提高 RNA 产量,加入 30-50uLRNA 溶解液重复洗脱一次,合并两次穿透液;如果要提高RNA 浓度,使用第一次的洗脱液加回到纯化柱中重复洗脱。

3. 如果要提高 RNA 产量,加入 30-50uLRNA 溶解液重复洗脱一次,合并两次穿透液;如果要提高RNA 浓度,使用第一次的洗脱液加回到纯化柱中重复洗脱。3. 如果要提高 RNA 产量,加入 30-50uLRNA 溶解液重复洗脱一次,合并两次穿透液;如果要提高RNA 浓度,使用第一次的洗脱液加回到纯化柱中重复洗脱。

注意:建议 RNA 用于下游实验之前,先进行质量检测。经变性琼脂糖凝胶电泳后,会有清晰的 28S和 18S 条带,以及中间弥散的 mRNA 条带,其中 28S 条带是 18S 条带亮度的 1.5-2 倍。有时还包括跑在最前面的较暗的 5S 条带。A260/A280 比值 1.8~2.0 对应 RNA 纯度 90-100%之间。

注意:建议 RNA 用于下游实验之前,先进行质量检测。经变性琼脂糖凝胶电泳后,会有清晰的 28S和 18S 条带,以及中间弥散的 mRNA 条带,其中 28S 条带是 18S 条带亮度的 1.5-2 倍。有时还包括跑在最前面的较暗的 5S 条带。A260/A280 比值 1.8~2.0 对应 RNA 纯度 90-100%之间。注意:建议 RNA 用于下游实验之前,先进行质量检测。经变性琼脂糖凝胶电泳后,会有清晰的 28S和 18S 条带,以及中间弥散的 mRNA 条带,其中 28S 条带是 18S 条带亮度的 1.5-2 倍。有时还包括跑在最前面的较暗的 5S 条带。A260/A280 比值 1.8~2.0 对应 RNA 纯度 90-100%之间。

特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
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