P3X63Ag8.653小鼠骨髓瘤细胞(带STR鉴定)

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上海
2022-07-02 15:35

优利科(上海)生命科学有限公司

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\n P3X63Ag8.653小鼠骨髓瘤细胞(带STR鉴定)详细描述P3X63Ag8.653小鼠骨髓瘤细胞(带STR鉴定)详细描述P3X63Ag8.653小鼠骨髓瘤细胞(带STR鉴定)详细描述P3X63Ag8.653小鼠骨髓瘤细胞(带STR鉴定)详细描述P3X63Ag8.653小鼠骨髓瘤细胞(带STR鉴定)P3X63Ag8.653小鼠骨髓瘤细胞(带STR鉴定)详细描述

细胞中文名称:P3X63Ag8.653小鼠骨髓瘤细胞(带STR鉴定)细胞中文名称:P3X63Ag8.653小鼠骨髓瘤细胞(带STR鉴定)细胞中文名称:P3X63Ag8.653小鼠骨髓瘤细胞(带STR鉴定)细胞中文名称:P3X63Ag8.653小鼠骨髓瘤细胞(带STR鉴定)P3X63Ag8.653小鼠骨髓瘤细胞(带STR鉴定)P3X63Ag8.653小鼠骨髓瘤细胞(带STR鉴定)

\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t
名称P3X63Ag8.653 (小鼠骨髓瘤细胞)(STR鉴定正确)
别称P3-X63-Ag8.653; P3-X63-Ag8-653; P3-x63-Ag8 653; P3-X63-Ag 8.653; P3-X63Ag8.653; P3-X63.Ag8.653; P3/X63/Ag8.653; P3X63 Ag8.653; P3X63 AG8-653; P3X63-Ag8.653; P3x63-Ag8.653; P3X63 AG 8.653; P3X63Ag8653; P3-X63-Ag8-6-5-3; P3X63Ag8-6-5-3; P3.times.63 Ag8.653; P3.653; X63-Ag8-653; X63-Ag8.653; X63.Ag8.653; X63Ag8-653; X63Ag8.653; X63AG8.653; X63-Ag 8.6.5.3; GM03570; GM3570; NS653
种属小鼠
组织来源B淋巴细胞;浆细胞;骨髓瘤
生长特性悬浮细胞
细胞形态淋巴母细胞样
背景描述P3X63Ag8.653细胞能抗8-氮杂鸟嘌呤,但对HAT敏感,可以用作杂交瘤时的融合配体。P3X63Ag8.653细胞能生成,但不分泌免疫球蛋白。据报道,P3X63Ag8.653细胞是缺失了3-酮类固醇还原酶活性的胆固醇营养缺陷型细胞。
生长培养基RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
推荐传代比例3×10^5-5×10^5cells/mL
推荐换液频率2~3次/周
倍增时间~30-60小时
冻存条件冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO温度:液氮
培养条件气相:空气,95%;CO2,5%温度:37℃
抗原表达情况H-2d
注意事项该细胞为悬浮细胞,请注意离心收集细胞悬液;请勿直接倒掉细胞培养液。
保藏机构ATCC; CRL-1580 ATCC; CRL-8008 DSMZ; ACC-43 ECACC; 85011420
\t\t\t\t\t\t名称\t\t\tP3X63Ag8.653 (小鼠骨髓瘤细胞)(STR鉴定正确)\t\t\t\t\t\t\t别称\t\t\tP3-X63-Ag8.653; P3-X63-Ag8-653; P3-x63-Ag8 653; P3-X63-Ag 8.653; P3-X63Ag8.653; P3-X63.Ag8.653; P3/X63/Ag8.653; P3X63 Ag8.653; P3X63 AG8-653; P3X63-Ag8.653; P3x63-Ag8.653; P3X63 AG 8.653; P3X63Ag8653; P3-X63-Ag8-6-5-3; P3X63Ag8-6-5-3; P3.times.63 Ag8.653; P3.653; X63-Ag8-653; X63-Ag8.653; X63.Ag8.653; X63Ag8-653; X63Ag8.653; X63AG8.653; X63-Ag 8.6.5.3; GM03570; GM3570; NS653\t\t\t\t\t\t\t种属\t\t\t小鼠\t\t\t\t\t\t\t组织来源\t\t\tB淋巴细胞;浆细胞;骨髓瘤\t\t\t\t\t\t\t生长特性\t\t\t悬浮细胞\t\t\t\t\t\t\t细胞形态\t\t\t淋巴母细胞样\t\t\t\t\t\t\t背景描述\t\t\tP3X63Ag8.653细胞能抗8-氮杂鸟嘌呤,但对HAT敏感,可以用作杂交瘤时的融合配体。P3X63Ag8.653细胞能生成,但不分泌免疫球蛋白。据报道,P3X63Ag8.653细胞是缺失了3-酮类固醇还原酶活性的胆固醇营养缺陷型细胞。\t\t\t\t\t\t\t生长培养基\t\t\tRPMI-1640+10% FBS+1% P/S\t\t\t\t\t\t\t推荐传代比例\t\t\t3×10^5-5×10^5cells/mL\t\t\t\t\t\t\t推荐换液频率\t\t\t2~3次/周\t\t\t\t\t\t\t倍增时间\t\t\t~30-60小时\t\t\t\t\t\t\t冻存条件\t\t\t冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO温度:液氮\t\t\t\t\t\t\t培养条件\t\t\t气相:空气,95%;CO2,5%温度:37℃\t\t\t\t\t\t\t抗原表达情况\t\t\tH-2d\t\t\t\t\t\t\t注意事项\t\t\t该细胞为悬浮细胞,请注意离心收集细胞悬液;请勿直接倒掉细胞培养液。\t\t\t\t\t\t\t保藏机构\t\t\tATCC; CRL-1580 ATCC; CRL-8008 DSMZ; ACC-43 ECACC; 85011420\t\t\t\t\t\t\t\t名称\t\t\tP3X63Ag8.653 (小鼠骨髓瘤细胞)(STR鉴定正确)\t\t\t\t\t名称名称名称名称名称名称\t\t\tP3X63Ag8.653 (小鼠骨髓瘤细胞)(STR鉴定正确)P3X63Ag8.653 (小鼠骨髓瘤细胞)(STR鉴定正确)P3X63Ag8.653 (小鼠骨髓瘤细胞)(STR鉴定正确)P3X63Ag8.653 (小鼠骨髓瘤细胞)(STR鉴定正确)P3X63Ag8.653 (小鼠骨髓瘤细胞)(STR鉴定正确)\t\t\t\t\t\t\t别称\t\t\tP3-X63-Ag8.653; P3-X63-Ag8-653; P3-x63-Ag8 653; P3-X63-Ag 8.653; P3-X63Ag8.653; P3-X63.Ag8.653; P3/X63/Ag8.653; P3X63 Ag8.653; P3X63 AG8-653; P3X63-Ag8.653; P3x63-Ag8.653; P3X63 AG 8.653; P3X63Ag8653; P3-X63-Ag8-6-5-3; P3X63Ag8-6-5-3; P3.times.63 Ag8.653; P3.653; X63-Ag8-653; X63-Ag8.653; X63.Ag8.653; X63Ag8-653; X63Ag8.653; X63AG8.653; X63-Ag 8.6.5.3; GM03570; GM3570; NS653\t\t\t\t\t别称别称别称别称别称别称\t\t\tP3-X63-Ag8.653; P3-X63-Ag8-653; P3-x63-Ag8 653; P3-X63-Ag 8.653; P3-X63Ag8.653; P3-X63.Ag8.653; P3/X63/Ag8.653; P3X63 Ag8.653; P3X63 AG8-653; P3X63-Ag8.653; P3x63-Ag8.653; P3X63 AG 8.653; P3X63Ag8653; P3-X63-Ag8-6-5-3; P3X63Ag8-6-5-3; P3.times.63 Ag8.653; P3.653; X63-Ag8-653; X63-Ag8.653; X63.Ag8.653; X63Ag8-653; X63Ag8.653; X63AG8.653; X63-Ag 8.6.5.3; GM03570; GM3570; NS653P3-X63-Ag8.653; P3-X63-Ag8-653; P3-x63-Ag8 653; P3-X63-Ag 8.653; P3-X63Ag8.653; P3-X63.Ag8.653; P3/X63/Ag8.653; P3X63 Ag8.653; P3X63 AG8-653; P3X63-Ag8.653; P3x63-Ag8.653; P3X63 AG 8.653; P3X63Ag8653; P3-X63-Ag8-6-5-3; P3X63Ag8-6-5-3; P3.times.63 Ag8.653; P3.653; X63-Ag8-653; X63-Ag8.653; X63.Ag8.653; X63Ag8-653; X63Ag8.653; X63AG8.653; X63-Ag 8.6.5.3; GM03570; GM3570; NS653P3-X63-Ag8.653; P3-X63-Ag8-653; P3-x63-Ag8 653; P3-X63-Ag 8.653; P3-X63Ag8.653; P3-X63.Ag8.653; P3/X63/Ag8.653; P3X63 Ag8.653; P3X63 AG8-653; P3X63-Ag8.653; P3x63-Ag8.653; P3X63 AG 8.653; P3X63Ag8653; P3-X63-Ag8-6-5-3; P3X63Ag8-6-5-3; P3.times.63 Ag8.653; P3.653; X63-Ag8-653; X63-Ag8.653; X63.Ag8.653; X63Ag8-653; X63Ag8.653; X63AG8.653; X63-Ag 8.6.5.3; GM03570; GM3570; NS653P3-X63-Ag8.653; P3-X63-Ag8-653; P3-x63-Ag8 653; P3-X63-Ag 8.653; P3-X63Ag8.653; P3-X63.Ag8.653; P3/X63/Ag8.653; P3X63 Ag8.653; P3X63 AG8-653; P3X63-Ag8.653; P3x63-Ag8.653; P3X63 AG 8.653; P3X63Ag8653; P3-X63-Ag8-6-5-3; P3X63Ag8-6-5-3; P3.times.63 Ag8.653; P3.653; X63-Ag8-653; X63-Ag8.653; X63.Ag8.653; X63Ag8-653; X63Ag8.653; X63AG8.653; X63-Ag 8.6.5.3; GM03570; GM3570; NS653P3-X63-Ag8.653; P3-X63-Ag8-653; P3-x63-Ag8 653; P3-X63-Ag 8.653; P3-X63Ag8.653; P3-X63.Ag8.653; P3/X63/Ag8.653; P3X63 Ag8.653; P3X63 AG8-653; P3X63-Ag8.653; P3x63-Ag8.653; P3X63 AG 8.653; P3X63Ag8653; P3-X63-Ag8-6-5-3; P3X63Ag8-6-5-3; P3.times.63 Ag8.653; P3.653; X63-Ag8-653; X63-Ag8.653; X63.Ag8.653; X63Ag8-653; X63Ag8.653; X63AG8.653; X63-Ag 8.6.5.3; GM03570; GM3570; NS653\t\t\t\t\t\t\t种属\t\t\t小鼠\t\t\t\t\t种属种属种属种属种属种属\t\t\t小鼠小鼠小鼠小鼠小鼠\t\t\t\t\t\t\t组织来源\t\t\tB淋巴细胞;浆细胞;骨髓瘤\t\t\t\t\t组织来源组织来源组织来源组织来源组织来源组织来源\t\t\tB淋巴细胞;浆细胞;骨髓瘤B淋巴细胞;浆细胞;骨髓瘤B淋巴细胞;浆细胞;骨髓瘤B淋巴细胞;浆细胞;骨髓瘤B淋巴细胞;浆细胞;骨髓瘤\t\t\t\t\t\t\t生长特性\t\t\t悬浮细胞\t\t\t\t\t生长特性生长特性生长特性生长特性生长特性生长特性\t\t\t悬浮细胞悬浮细胞悬浮细胞悬浮细胞悬浮细胞\t\t\t\t\t\t\t细胞形态\t\t\t淋巴母细胞样\t\t\t\t\t细胞形态细胞形态细胞形态细胞形态细胞形态细胞形态\t\t\t淋巴母细胞样淋巴母细胞样淋巴母细胞样淋巴母细胞样淋巴母细胞样\t\t\t\t\t\t\t背景描述\t\t\tP3X63Ag8.653细胞能抗8-氮杂鸟嘌呤,但对HAT敏感,可以用作杂交瘤时的融合配体。P3X63Ag8.653细胞能生成,但不分泌免疫球蛋白。据报道,P3X63Ag8.653细胞是缺失了3-酮类固醇还原酶活性的胆固醇营养缺陷型细胞。\t\t\t\t\t背景描述背景描述背景描述背景描述背景描述背景描述\t\t\tP3X63Ag8.653细胞能抗8-氮杂鸟嘌呤,但对HAT敏感,可以用作杂交瘤时的融合配体。P3X63Ag8.653细胞能生成,但不分泌免疫球蛋白。据报道,P3X63Ag8.653细胞是缺失了3-酮类固醇还原酶活性的胆固醇营养缺陷型细胞。P3X63Ag8.653细胞能抗8-氮杂鸟嘌呤,但对HAT敏感,可以用作杂交瘤时的融合配体。P3X63Ag8.653细胞能生成,但不分泌免疫球蛋白。据报道,P3X63Ag8.653细胞是缺失了3-酮类固醇还原酶活性的胆固醇营养缺陷型细胞。P3X63Ag8.653细胞能抗8-氮杂鸟嘌呤,但对HAT敏感,可以用作杂交瘤时的融合配体。P3X63Ag8.653细胞能生成,但不分泌免疫球蛋白。据报道,P3X63Ag8.653细胞是缺失了3-酮类固醇还原酶活性的胆固醇营养缺陷型细胞。P3X63Ag8.653细胞能抗8-氮杂鸟嘌呤,但对HAT敏感,可以用作杂交瘤时的融合配体。P3X63Ag8.653细胞能生成,但不分泌免疫球蛋白。据报道,P3X63Ag8.653细胞是缺失了3-酮类固醇还原酶活性的胆固醇营养缺陷型细胞。P3X63Ag8.653细胞能抗8-氮杂鸟嘌呤,但对HAT敏感,可以用作杂交瘤时的融合配体。P3X63Ag8.653细胞能生成,但不分泌免疫球蛋白。据报道,P3X63Ag8.653细胞是缺失了3-酮类固醇还原酶活性的胆固醇营养缺陷型细胞。\t\t\t\t\t\t\t生长培养基\t\t\tRPMI-1640+10% FBS+1% P/S\t\t\t\t\t生长培养基生长培养基生长培养基生长培养基生长培养基生长培养基\t\t\tRPMI-1640+10% FBS+1% P/SRPMI-1640+10% FBS+1% P/SRPMI-1640+10% FBS+1% P/SRPMI-1640+10% FBS+1% P/SRPMI-1640+10% FBS+1% P/S\t\t\t\t\t\t\t推荐传代比例\t\t\t3×10^5-5×10^5cells/mL\t\t\t\t\t推荐传代比例推荐传代比例推荐传代比例推荐传代比例推荐传代比例推荐传代比例\t\t\t3×10^5-5×10^5cells/mL3×10^5-5×10^5cells/mL3×10^5-5×10^5cells/mL3×10^5-5×10^5cells/mL3×10^5-5×10^5cells/mL\t\t\t\t\t\t\t推荐换液频率\t\t\t2~3次/周\t\t\t\t\t推荐换液频率推荐换液频率推荐换液频率推荐换液频率推荐换液频率推荐换液频率\t\t\t2~3次/周2~3次/周2~3次/周2~3次/周2~3次/周\t\t\t\t\t\t\t倍增时间\t\t\t~30-60小时\t\t\t\t\t倍增时间倍增时间倍增时间倍增时间倍增时间倍增时间\t\t\t~30-60小时~30-60小时~30-60小时~30-60小时~30-60小时\t\t\t\t\t\t\t冻存条件\t\t\t冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO温度:液氮\t\t\t\t\t冻存条件冻存条件冻存条件冻存条件冻存条件冻存条件\t\t\t冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO温度:液氮冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO温度:液氮冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO温度:液氮冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO温度:液氮冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO温度:液氮\t\t\t\t\t\t\t培养条件\t\t\t气相:空气,95%;CO2,5%温度:37℃\t\t\t\t\t培养条件培养条件培养条件培养条件培养条件培养条件\t\t\t气相:空气,95%;CO2,5%温度:37℃气相:空气,95%;CO2,5%温度:37℃气相:空气,95%;CO2,5%温度:37℃气相:空气,95%;CO2,5%温度:37℃气相:空气,95%;CO2,5%温度:37℃\t\t\t\t\t\t\t抗原表达情况\t\t\tH-2d\t\t\t\t\t抗原表达情况抗原表达情况抗原表达情况抗原表达情况抗原表达情况抗原表达情况\t\t\tH-2dH-2dH-2dH-2dH-2d\t\t\t\t\t\t\t注意事项\t\t\t该细胞为悬浮细胞,请注意离心收集细胞悬液;请勿直接倒掉细胞培养液。\t\t\t\t\t注意事项注意事项注意事项注意事项注意事项注意事项\t\t\t该细胞为悬浮细胞,请注意离心收集细胞悬液;请勿直接倒掉细胞培养液。该细胞为悬浮细胞,请注意离心收集细胞悬液;请勿直接倒掉细胞培养液。该细胞为悬浮细胞,请注意离心收集细胞悬液;请勿直接倒掉细胞培养液。该细胞为悬浮细胞,请注意离心收集细胞悬液;请勿直接倒掉细胞培养液。该细胞为悬浮细胞,请注意离心收集细胞悬液;请勿直接倒掉细胞培养液。\t\t\t\t\t\t\t保藏机构\t\t\tATCC; CRL-1580 ATCC; CRL-8008 DSMZ; ACC-43 ECACC; 85011420\t\t\t\t\t保藏机构保藏机构保藏机构保藏机构保藏机构保藏机构\t\t\tATCC; CRL-1580 ATCC; CRL-8008 DSMZ; ACC-43 ECACC; 85011420ATCC; CRL-1580 ATCC; CRL-8008 DSMZ; ACC-43 ECACC; 85011420ATCC; CRL-1580 ATCC; CRL-8008 DSMZ; ACC-43 ECACC; 85011420ATCC; CRL-1580 ATCC; CRL-8008 DSMZ; ACC-43 ECACC; 85011420ATCC; CRL-1580 ATCC; CRL-8008 DSMZ; ACC-43 ECACC; 85011420\t\t\t







1、 细胞传代:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时,弃 25cm2 培养瓶中的培养液,用 PBS 清洗细胞一次;
2)添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 1ml 至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入 5ml 完全培养
液终止消化,再轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至 15ml 离心管中, 1000rpm 离心 5min;
3)弃上清,沉淀细胞用 1-2ml 完全培养基重悬,然后按 1:2 比例进行分瓶传代,最后放入 37℃, 5%CO2 细胞
培养箱中培养;

2、 细胞冻存:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时,弃 25cm2 培养瓶中的培养液,用 PBS 清洗细胞一次;
2)添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 1ml 至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入完全培养液终
止消化,轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至 15ml 离心管中, 1000rpm 离心 5min;
3)用适量的冻存液(FBS: DMSO=9 : 1)重悬细胞,并放置于冻存管中;
4)先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h,然后将其移入-80℃过夜, 24h 后转入液氮中进行长期保存。使用程序
降温盒可直接放入-80℃。

3、细胞复苏:
1)从液氮中取出细胞冻存管(注意:佩戴防爆管面具),快速将其置入 37℃水浴中解冻,直至冻存管中无结
晶,然后用 75%的酒精擦拭冻存管外壁;
2)将冻存管中的细胞移至含 6ml 完全培养基的 15ml 离心管中, 1000rpm 离心 5min;
3)弃上清,沉淀用 6ml 完全培养基重悬,接种 25cm2 培养瓶,于 37℃, 5%CO2 细胞培养箱中培养



P3X63Ag8.653小鼠骨髓瘤细胞(带STR鉴定)收到后处理

细胞在培养瓶中培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口是细胞运输的最好办法。收到细胞回到自己的实验室后,先打开外包装,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超净台内,严格无菌操作。镜下观察:未超过80%汇合度时,可将瓶装的完全培养液移入废液缸中,悬浮细胞需离心处理,加入6ml新鲜完全培养基,放入37℃、5%CO2孵箱培养;超过80%汇合度时,根据情况传代或者冻存,具体操作见细胞培养步骤说明书。
1、 细胞传代:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时,弃 25cm2 培养瓶中的培养液,用 PBS 清洗细胞一次;
2)添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 1ml 至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入 5ml 完全培养
液终止消化,再轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至 15ml 离心管中, 1000rpm 离心 5min;
3)弃上清,沉淀细胞用 1-2ml 完全培养基重悬,然后按 1:2 比例进行分瓶传代,最后放入 37℃, 5%CO2 细胞
培养箱中培养;

2、 细胞冻存:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时,弃 25cm2 培养瓶中的培养液,用 PBS 清洗细胞一次;
2)添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 1ml 至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入完全培养液终
止消化,轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至 15ml 离心管中, 1000rpm 离心 5min;
3)用适量的冻存液(FBS: DMSO=9 : 1)重悬细胞,并放置于冻存管中;
4)先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h,然后将其移入-80℃过夜, 24h 后转入液氮中进行长期保存。使用程序
降温盒可直接放入-80℃。

3、细胞复苏:
1)从液氮中取出细胞冻存管(注意:佩戴防爆管面具),快速将其置入 37℃水浴中解冻,直至冻存管中无结
晶,然后用 75%的酒精擦拭冻存管外壁;
2)将冻存管中的细胞移至含 6ml 完全培养基的 15ml 离心管中, 1000rpm 离心 5min;
3)弃上清,沉淀用 6ml 完全培养基重悬,接种 25cm2 培养瓶,于 37℃, 5%CO2 细胞培养箱中培养



P3X63Ag8.653小鼠骨髓瘤细胞(带STR鉴定)收到后处理

细胞在培养瓶中培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口是细胞运输的最好办法。收到细胞回到自己的实验室后,先打开外包装,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超净台内,严格无菌操作。镜下观察:未超过80%汇合度时,可将瓶装的完全培养液移入废液缸中,悬浮细胞需离心处理,加入6ml新鲜完全培养基,放入37℃、5%CO2孵箱培养;超过80%汇合度时,根据情况传代或者冻存,具体操作见细胞培养步骤说明书。
1、 细胞传代:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时,弃 25cm2 培养瓶中的培养液,用 PBS 清洗细胞一次;
2)添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 1ml 至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入 5ml 完全培养
液终止消化,再轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至 15ml 离心管中, 1000rpm 离心 5min;
3)弃上清,沉淀细胞用 1-2ml 完全培养基重悬,然后按 1:2 比例进行分瓶传代,最后放入 37℃, 5%CO2 细胞
培养箱中培养;

2、 细胞冻存:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时,弃 25cm2 培养瓶中的培养液,用 PBS 清洗细胞一次;
2)添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 1ml 至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入完全培养液终
止消化,轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至 15ml 离心管中, 1000rpm 离心 5min;
3)用适量的冻存液(FBS: DMSO=9 : 1)重悬细胞,并放置于冻存管中;
4)先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h,然后将其移入-80℃过夜, 24h 后转入液氮中进行长期保存。使用程序
降温盒可直接放入-80℃。

3、细胞复苏:
1)从液氮中取出细胞冻存管(注意:佩戴防爆管面具),快速将其置入 37℃水浴中解冻,直至冻存管中无结
晶,然后用 75%的酒精擦拭冻存管外壁;
2)将冻存管中的细胞移至含 6ml 完全培养基的 15ml 离心管中, 1000rpm 离心 5min;
3)弃上清,沉淀用 6ml 完全培养基重悬,接种 25cm2 培养瓶,于 37℃, 5%CO2 细胞培养箱中培养



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细胞在培养瓶中培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口是细胞运输的最好办法。收到细胞回到自己的实验室后,先打开外包装,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超净台内,严格无菌操作。镜下观察:未超过80%汇合度时,可将瓶装的完全培养液移入废液缸中,悬浮细胞需离心处理,加入6ml新鲜完全培养基,放入37℃、5%CO2孵箱培养;超过80%汇合度时,根据情况传代或者冻存,具体操作见细胞培养步骤说明书。