pBluescriptR-FGF12(1同义突变1点突变)人源基因模板质粒

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钦胜生物
上海
2022-07-03 11:43

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产品介绍

pBluescriptR-FGF12(1同义突变1点突变)人源基因模板质粒

pBluescriptR-FGF12(1同义突变1点突变)人源基因模板质粒

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基本信息

基本信息

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别名:\xa0NM_004113.5;EIEE47; FGF12B; FHF1

别名:\xa0NM_004113.5;EIEE47; FGF12B; FHF1

启动子:\xa0无

启动子:\xa0无

原核抗性:\xa0氨苄青霉素Amp

原核抗性:\xa0氨苄青霉素Amp

筛选标记:\xa0无

筛选标记:\xa0无

克隆菌株:\xa0大肠杆菌DH5α

克隆菌株:\xa0大肠杆菌DH5α

培养条件:\xa0LB/37℃

培养条件:\xa0LB/37℃

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质粒图谱

质粒图谱

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pBluescriptR-FGF12(1同义突变1点突变)人源基因模板质粒使用说明:

pBluescriptR-FGF12(1同义突变1点突变)人源基因模板质粒使用说明:

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\xa0 \xa0 \xa01、收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl无菌水溶解质粒,室温放置1min;

\xa0 \xa0 \xa01、收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl无菌水溶解质粒,室温放置1min;

\xa0 \xa0 \xa02、从-80℃冰箱中取出相应的感受态,置于冰盒上解冻,并做好标记;

\xa0 \xa0 \xa02、从-80℃冰箱中取出相应的感受态,置于冰盒上解冻,并做好标记;

\xa0 \xa0 \xa03、取2μl质粒加至100μl感受态中,冰浴30min;

\xa0 \xa0 \xa03、取2μl质粒加至100μl感受态中,冰浴30min;

\xa0 \xa0 \xa04、42℃热激90s,再冰浴2min;

\xa0 \xa0 \xa04、42℃热激90s,再冰浴2min;

\xa0 \xa0 \xa05、加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡培养45min;

\xa0 \xa0 \xa05、加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡培养45min;

\xa0 \xa0 \xa06、6000rpm离心5min,仅留100ul上清混匀菌体沉淀;

\xa0 \xa0 \xa06、6000rpm离心5min,仅留100ul上清混匀菌体沉淀;

\xa0 \xa0 \xa07、混匀后的菌液加至对应抗性的LB平板上,倒入适量玻璃珠,涂匀液体;

\xa0 \xa0 \xa07、混匀后的菌液加至对应抗性的LB平板上,倒入适量玻璃珠,涂匀液体;

\xa0 \xa0 \xa08、将平板正向培养1h,再倒置培养12h~16h;

\xa0 \xa0 \xa08、将平板正向培养1h,再倒置培养12h~16h;

\xa0 \xa0 \xa09、挑取单克隆菌落至对应抗性的LB液体培养基中,震荡培养12h~16h,根据实验需要提取质粒。

\xa0 \xa0 \xa09、挑取单克隆菌落至对应抗性的LB液体培养基中,震荡培养12h~16h,根据实验需要提取质粒。

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pBluescriptR-FGF12(1同义突变1点突变)人源基因模板质粒注意事项:

pBluescriptR-FGF12(1同义突变1点突变)人源基因模板质粒注意事项:

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\xa0 \xa0 \xa0 1、如果您收到的是甘油菌种,请先四区划线,挑取单克隆培养。

\xa0 \xa0 \xa0 1、如果您收到的是甘油菌种,请先四区划线,挑取单克隆培养。

\xa0 \xa0 \xa0 2、如果第二天转化平板长的过多,请将质粒按比例稀释后再转化。

\xa0 \xa0 \xa0 2、如果第二天转化平板长的过多,请将质粒按比例稀释后再转化。

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