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产品名称：人胚胎羊膜细胞(ALP)Elisa试剂盒

产品名称：人胚胎羊膜细胞(ALP)Elisa试剂盒产品名称：人胚胎羊膜细胞(ALP)Elisa试剂盒人胚胎羊膜细胞(ALP)Elisa试剂盒

产品规格：96T

产品规格：96T产品规格：96T

产品用途：科研实验

产品用途：科研实验产品用途：科研实验

产品存储：2-8℃，有效期六个月

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实验原理

实验原理实验原理实验原理

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本水平。用纯化抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入抗体，再与HRP标记的抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品浓度。

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本水平。用纯化抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入抗体，再与HRP标记的抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品浓度。本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本水平。用纯化抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入抗体，再与HRP标记的抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品浓度。

样品收集、处理及保存方法

样品收集、处理及保存方法样品收集、处理及保存方法

1.\xa0 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

1.\xa0 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。1.\xa0 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2.\xa0 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。

2.\xa0 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。2.\xa0 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。

3.\xa0 细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。

3.\xa0 细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。3.\xa0 细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4.\xa0 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。

4.\xa0 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。4.\xa0 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。

5.\xa0 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

5.\xa0 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。5.\xa0 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

自备物品

自备物品自备物品

1.酶标仪（450nm）

1.酶标仪（450nm）1.酶标仪（450nm）

2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3.37℃恒温箱

3.37℃恒温箱3.37℃恒温箱

人胚胎羊膜细胞(ALP)Elisa试剂盒组成

人胚胎羊膜细胞(ALP)Elisa试剂盒组成人胚胎羊膜细胞(ALP)Elisa试剂盒人胚胎羊膜细胞(ALP)Elisa试剂盒组成

1	30倍浓缩洗涤液	20ml×1瓶	7	终止液	6ml×1瓶
2	酶标试剂	6ml×1瓶	8	标准品（480pg/ml）	0.5ml×1瓶
3	酶标包被板	12孔×8条	9	标准品稀释液	1.5ml×1瓶
4	样品稀释液	6ml×1瓶	10	说明书	1份
5	显色剂A液	6ml×1瓶	11	封板膜	2张 \xa0
6	显色剂B液	6ml×1/瓶	12	密封袋	1个

1

30倍浓缩洗涤液

20ml×1瓶

7

终止液

6ml×1瓶

2

酶标试剂

6ml×1瓶

8

标准品（480pg/ml）

0.5ml×1瓶

3

酶标包被板

12孔×8条

9

标准品稀释液

1.5ml×1瓶

4

样品稀释液

6ml×1瓶

10

说明书

1份

5

显色剂A液

6ml×1瓶

11

封板膜

2张 \xa0

6

显色剂B液

6ml×1/瓶

12

密封袋

1个

1

30倍浓缩洗涤液

20ml×1瓶

7

终止液

6ml×1瓶

1

1

11

30倍浓缩洗涤液

30倍浓缩洗涤液

30倍浓缩洗涤液30倍浓缩洗涤液

20ml×1瓶

20ml×1瓶

20ml×1瓶20ml×1瓶

7

7

77

终止液

终止液

终止液终止液

6ml×1瓶

6ml×1瓶

6ml×1瓶6ml×1瓶

2

酶标试剂

6ml×1瓶

8

标准品（480pg/ml）

0.5ml×1瓶

2

2

22

酶标试剂

酶标试剂

酶标试剂酶标试剂

6ml×1瓶

6ml×1瓶

6ml×1瓶6ml×1瓶

8

8

88

标准品（480pg/ml）

标准品（480pg/ml）

标准品（480pg/ml）标准品（480pg/ml）

0.5ml×1瓶

0.5ml×1瓶

0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶

3

酶标包被板

12孔×8条

9

标准品稀释液

1.5ml×1瓶

3

3

33

酶标包被板

酶标包被板

酶标包被板酶标包被板

12孔×8条

12孔×8条

12孔×8条12孔×8条

9

9

99

标准品稀释液

标准品稀释液

标准品稀释液标准品稀释液

1.5ml×1瓶

1.5ml×1瓶

1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶

4

样品稀释液

6ml×1瓶

10

说明书

1份

4

4

44

样品稀释液

样品稀释液

样品稀释液样品稀释液

6ml×1瓶

6ml×1瓶

6ml×1瓶6ml×1瓶

10

10

1010

说明书

说明书

说明书说明书

1份

1份

1份1份

5

显色剂A液

6ml×1瓶

11

封板膜

2张 \xa0

5

5

55

显色剂A液

显色剂A液

显色剂A液显色剂A液

6ml×1瓶

6ml×1瓶

6ml×1瓶6ml×1瓶

11

11

1111

封板膜

封板膜

封板膜封板膜

2张 \xa0

2张 \xa0

2张 \xa02张 \xa0

6

显色剂B液

6ml×1/瓶

12

密封袋

1个

6

6

66

显色剂B液

显色剂B液

显色剂B液显色剂B液

6ml×1/瓶

6ml×1/瓶

6ml×1/瓶6ml×1/瓶

12

12

1212

密封袋

密封袋

密封袋密封袋

1个

1个

1个1个

人胚胎羊膜细胞(ALP)Elisa试剂盒标本要求\xa0

人胚胎羊膜细胞(ALP)Elisa试剂盒标本要求\xa0人胚胎羊膜细胞(ALP)Elisa试剂盒人胚胎羊膜细胞(ALP)Elisa试剂盒人胚胎羊膜细胞(ALP)Elisa试剂盒标本要求\xa0

1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融

1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融

2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

操作步骤

操作步骤操作步骤操作步骤

1.\xa0标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

1.\xa0标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。1.\xa0标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

240pg/ml	5号标准品	150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
120pg/ml	4号标准品	150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
60pg/ml	3号标准品	150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
30pg/ml	2号标准品	150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
15pg/ml	1号标准品	150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液

240pg/ml

5号标准品

150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液

120pg/ml

4号标准品

150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液

60pg/ml

3号标准品

150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液

30pg/ml

2号标准品

150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液

15pg/ml

1号标准品

150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液

240pg/ml

5号标准品

150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液

240pg/ml

240pg/ml

240pg/ml240pg/ml

5号标准品

5号标准品

5号标准品5号标准品

150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液

150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液

150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液

120pg/ml

4号标准品

150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液

120pg/ml

120pg/ml

120pg/ml120pg/ml

4号标准品

4号标准品

4号标准品4号标准品

150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液

150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液

150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液

60pg/ml

3号标准品

150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液

60pg/ml

60pg/ml

60pg/ml60pg/ml

3号标准品

3号标准品

3号标准品3号标准品

150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液

150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液

150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液

30pg/ml

2号标准品

150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液

30pg/ml

30pg/ml

30pg/ml30pg/ml

2号标准品

2号标准品

2号标准品2号标准品

150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液

150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液

150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液

15pg/ml

1号标准品

150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液

15pg/ml

15pg/ml

15pg/ml15pg/ml

1号标准品

1号标准品

1号标准品1号标准品

150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液

150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液

150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液

\xa0 \xa0 2.\xa0加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于\xa0 \xa0 \xa0 \xa0 \xa0酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

\xa0 \xa0 2.\xa0加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于\xa0 \xa0 \xa0 \xa0 \xa0酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。\xa0 \xa0 2.\xa0加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于\xa0 \xa0 \xa0 \xa0 \xa0酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

3.\xa0温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。\xa0\xa0\xa0

3.\xa0温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。\xa0\xa0\xa03.\xa0温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。\xa0\xa0\xa0

4.\xa0配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用

4.\xa0配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用4.\xa0配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用

5.\xa0洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

5.\xa0洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。5.\xa0洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

6.\xa0加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

6.\xa0加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。6.\xa0加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

7.\xa0温育：操作同3。

7.\xa0温育：操作同3。7.\xa0温育：操作同3。

8.\xa0洗涤：操作同5。

8.\xa0洗涤：操作同5。8.\xa0洗涤：操作同5。

9.\xa0显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.

9.\xa0显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.9.\xa0显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.

10.\xa0终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

10.\xa0终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。10.\xa0终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

11.\xa0测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。\xa0测定应在加终止液后15分钟以内进行。

11.\xa0测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。\xa0测定应在加终止液后15分钟以内进行。11.\xa0测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。\xa0测定应在加终止液后15分钟以内进行。

人胚胎羊膜细胞(ALP)Elisa试剂盒操作程序总结：\xa0

人胚胎羊膜细胞(ALP)Elisa试剂盒操作程序总结：\xa0人胚胎羊膜细胞(ALP)Elisa试剂盒人胚胎羊膜细胞(ALP)Elisa试剂盒人胚胎羊膜细胞(ALP)Elisa试剂盒操作程序总结：\xa0\xa0

\xa0

\xa0\xa0

计算

计算计算计算

\xa0\xa0以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。

\xa0\xa0以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。\xa0\xa0以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。

注意事项

注意事项注意事项注意事项

1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。

1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。

2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。

2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。

3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。

3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。

4．\xa0请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。

4．\xa0请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。4．\xa0请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。

5．\xa0封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

5．\xa0封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。5．\xa0封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．底物请避光保存。

6．底物请避光保存。6．底物请避光保存。

7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9．本试剂不同批号组分不得混用。

9．本试剂不同批号组分不得混用。9．本试剂不同批号组分不得混用。

10.\xa0如与英文说明书有异，以英文说明书为准。

10.\xa0如与英文说明书有异，以英文说明书为准。10.\xa0如与英文说明书有异，以英文说明书为准。

欢迎新老客户咨询订购：人胚胎羊膜细胞(ALP)Elisa试剂盒

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