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产品概述

产品概述产品概述Annexin V-AF647／PI荧光双染细胞凋亡检测试剂盒用于鉴定凋亡和坏死细胞。
Annexin V是一种钙离子依赖性磷脂结合蛋白，与磷脂酰丝氨酸PS有高度亲和力，可通过细胞外侧暴露的PS与凋亡早期细胞胞膜结合，将Annexin V标记荧光染料AF647利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡。
碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)可与双链DNA特异性结合，并产生强烈的荧光，正常情况下无法透过细胞膜。由于凋亡晚期或坏死细胞膜丧失完整性，PI可进入细胞内对DNA进行染色，与Annexin V搭配使用，可区分处于不同凋亡时期的细胞。

产品使用说明

产品使用说明产品使用说明（注：本品仅在悬浮培养的细胞中验证，良好的细胞状态是实验的关键。贴壁生长的细胞用于凋亡检测时，可能会因为胰酶消化、吹打等处理导致细胞的坏死或凋亡，对实验结果可能存在不可控的影响，请谨慎处理。）（注：本品仅在悬浮培养的细胞中验证，良好的细胞状态是实验的关键。贴壁生长的细胞用于凋亡检测时，可能会因为胰酶消化、吹打等处理导致细胞的坏死或凋亡，对实验结果可能存在不可控的影响，请谨慎处理。）

本试剂盒中Annexin V Binding Buffer(10×)为10×浓缩液，实验前用去离子水稀释成1×工作液。
例如：取1mL Annexin V Binding Buffer(10×)，加入去离子水定容至10mL即可。

1. 1. 1. 细胞按照实验方案进行凋亡诱导，300g离心5min，弃上清，收集细胞，PBS洗涤一次，轻轻重悬细胞并计数。
2. 1. 1. 取1-5×10^5重悬的细胞，300g离心5min，弃上清。用PBS洗涤细胞一次，离心后弃上清，加入500μL稀释的1×Annexin V Binding Buffer工作液重悬细胞。
      2. 细胞悬液中加入5μL的Annexin V-AF647和5μL的碘化丙啶(PI)染色液。
      3. 轻柔涡旋混匀后，室温避光孵育15-20min。
      4. 反应完成后立即上机检测。如不能及时检测，请于冰上避光静置并于1小时内完成检测。

1. 1. 细胞按照实验方案进行凋亡诱导，300g离心5min，弃上清，收集细胞，PBS洗涤一次，轻轻重悬细胞并计数。

1. 1. 细胞按照实验方案进行凋亡诱导，300g离心5min，弃上清，收集细胞，PBS洗涤一次，轻轻重悬细胞并计数。

1. 细胞按照实验方案进行凋亡诱导，300g离心5min，弃上清，收集细胞，PBS洗涤一次，轻轻重悬细胞并计数。

1. 细胞按照实验方案进行凋亡诱导，300g离心5min，弃上清，收集细胞，PBS洗涤一次，轻轻重悬细胞并计数。

细胞按照实验方案进行凋亡诱导，300g离心5min，弃上清，收集细胞，PBS洗涤一次，轻轻重悬细胞并计数。

细胞按照实验方案进行凋亡诱导，300g离心5min，弃上清，收集细胞，PBS洗涤一次，轻轻重悬细胞并计数。

1. 1. 取1-5×10^5重悬的细胞，300g离心5min，弃上清。用PBS洗涤细胞一次，离心后弃上清，加入500μL稀释的1×Annexin V Binding Buffer工作液重悬细胞。
   2. 细胞悬液中加入5μL的Annexin V-AF647和5μL的碘化丙啶(PI)染色液。
   3. 轻柔涡旋混匀后，室温避光孵育15-20min。
   4. 反应完成后立即上机检测。如不能及时检测，请于冰上避光静置并于1小时内完成检测。

1. 1. 取1-5×10^5重悬的细胞，300g离心5min，弃上清。用PBS洗涤细胞一次，离心后弃上清，加入500μL稀释的1×Annexin V Binding Buffer工作液重悬细胞。
   2. 细胞悬液中加入5μL的Annexin V-AF647和5μL的碘化丙啶(PI)染色液。
   3. 轻柔涡旋混匀后，室温避光孵育15-20min。
   4. 反应完成后立即上机检测。如不能及时检测，请于冰上避光静置并于1小时内完成检测。

1. 取1-5×10^5重悬的细胞，300g离心5min，弃上清。用PBS洗涤细胞一次，离心后弃上清，加入500μL稀释的1×Annexin V Binding Buffer工作液重悬细胞。
2. 细胞悬液中加入5μL的Annexin V-AF647和5μL的碘化丙啶(PI)染色液。
3. 轻柔涡旋混匀后，室温避光孵育15-20min。
4. 反应完成后立即上机检测。如不能及时检测，请于冰上避光静置并于1小时内完成检测。

1. 取1-5×10^5重悬的细胞，300g离心5min，弃上清。用PBS洗涤细胞一次，离心后弃上清，加入500μL稀释的1×Annexin V Binding Buffer工作液重悬细胞。
2. 细胞悬液中加入5μL的Annexin V-AF647和5μL的碘化丙啶(PI)染色液。
3. 轻柔涡旋混匀后，室温避光孵育15-20min。
4. 反应完成后立即上机检测。如不能及时检测，请于冰上避光静置并于1小时内完成检测。

取1-5×10^5重悬的细胞，300g离心5min，弃上清。用PBS洗涤细胞一次，离心后弃上清，加入500μL稀释的1×Annexin V Binding Buffer工作液重悬细胞。

取1-5×10^5重悬的细胞，300g离心5min，弃上清。用PBS洗涤细胞一次，离心后弃上清，加入500μL稀释的1×Annexin V Binding Buffer工作液重悬细胞。

细胞悬液中加入5μL的Annexin V-AF647和5μL的碘化丙啶(PI)染色液。

细胞悬液中加入5μL的Annexin V-AF647和5μL的碘化丙啶(PI)染色液。

轻柔涡旋混匀后，室温避光孵育15-20min。

轻柔涡旋混匀后，室温避光孵育15-20min。

反应完成后立即上机检测。如不能及时检测，请于冰上避光静置并于1小时内完成检测。

反应完成后立即上机检测。如不能及时检测，请于冰上避光静置并于1小时内完成检测。

保存条件

保存条件保存条件4℃可保存1年；Annexin V-AF647和碘化丙啶(PI)染色液需要避光保存。

注意事项

注意事项注意事项

1. 1. 1. 为获得最佳的使用效果，请在3-6个月内使用，Annexin V-AF647禁止冷冻保存；
      2. 染色后宜尽快检测，时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加；
      3. 荧光物质均易发生淬灭，在进行荧光观察时，尽量缩短观察时间，同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存；
      4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

1. 1. 为获得最佳的使用效果，请在3-6个月内使用，Annexin V-AF647禁止冷冻保存；
   2. 染色后宜尽快检测，时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加；
   3. 荧光物质均易发生淬灭，在进行荧光观察时，尽量缩短观察时间，同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存；
   4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

1. 1. 为获得最佳的使用效果，请在3-6个月内使用，Annexin V-AF647禁止冷冻保存；
   2. 染色后宜尽快检测，时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加；
   3. 荧光物质均易发生淬灭，在进行荧光观察时，尽量缩短观察时间，同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存；
   4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

1. 为获得最佳的使用效果，请在3-6个月内使用，Annexin V-AF647禁止冷冻保存；
2. 染色后宜尽快检测，时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加；
3. 荧光物质均易发生淬灭，在进行荧光观察时，尽量缩短观察时间，同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存；
4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

1. 为获得最佳的使用效果，请在3-6个月内使用，Annexin V-AF647禁止冷冻保存；
2. 染色后宜尽快检测，时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加；
3. 荧光物质均易发生淬灭，在进行荧光观察时，尽量缩短观察时间，同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存；
4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

为获得最佳的使用效果，请在3-6个月内使用，Annexin V-AF647禁止冷冻保存；

为获得最佳的使用效果，请在3-6个月内使用，Annexin V-AF647禁止冷冻保存；

染色后宜尽快检测，时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加；

染色后宜尽快检测，时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加；

荧光物质均易发生淬灭，在进行荧光观察时，尽量缩短观察时间，同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存；

荧光物质均易发生淬灭，在进行荧光观察时，尽量缩短观察时间，同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存；

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。。。。 (本试剂产品仅供科学研究或进一步生产使用，不可用于临床诊断或治疗)(本试剂产品仅供科学研究或进一步生产使用，不可用于临床诊断或治疗)
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