\n 培养操作步骤：
1．IKKε和TBK-1双重抑制剂(MRT67307)价格用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；\xa0
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；\xa0
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；\xa0
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中；\xa0
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。\xa0培养操作步骤：
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4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中；\xa04．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中；\xa04．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中；\xa0
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中文名称：IKKε和TBK-1双重抑制剂(MRT67307)价格
英文名称：MRT67307
产品规格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg中文名称：IKKε和TBK-1双重抑制剂(MRT67307)价格
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发货周期：1～3天
MRT67307是一种有效的IKKε和TBK-1双重抑制剂，在0.1mMATP的体外实验中，IC50值为160和19nM，同时有效抑制ULK1和ULK2，IC50值为45和38nM。发货周期：1～3天
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注本品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他用途！注本品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他用途！注本品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他用途！注本品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他用途！注本品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他用途！注本品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他用途！
CAS号1190378-57-4CAS号1190378-57-4CAS号1190378-57-4CAS号1190378-57-4CAS号1190378-57-4
纯度99.02%纯度99.02%纯度99.02%纯度99.02%纯度纯度99.02%
分子量464.6分子量464.6分子量464.6分子量464.6分子量分子量464.6
储存条件-20℃，有效期2年，溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。储存条件-20℃，有效期2年，溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。储存条件-20℃，有效期2年，溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。储存条件-20℃，有效期2年，溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。储存条件储存条件-20℃，有效期2年，溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。
实验报告：
一、分离与培养：
\xa0\xa0\xa0\xa01、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将组织剪成1mm3左右大小；
\xa0\xa0\xa0\xa02、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
\xa0\xa0\xa0\xa03、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织完全被消化；
\xa0\xa0\xa0\xa04、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
\xa0\xa0\xa0\xa05、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
\xa0\xa0\xa0\xa01、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%在室温条件下固定细胞15min；
\xa0\xa0\xa0\xa02、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
\xa0\xa0\xa0\xa03、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
\xa0\xa0\xa0\xa04、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
\xa0\xa0\xa0\xa05、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
\xa0\xa0\xa0\xa06、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
注意事项：
\xa0 \xa0 \xa0 尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响，但为取得良好的使用效果，3-6个月内推荐4℃保存，并适当注意避免反复冻融。
\xa0\xa0\xa0\xa0\xa0\xa0如果有细菌或真菌污染，会严重影响检测效果。
\xa0\xa0\xa0\xa0\xa0\xa0染色后宜尽快检测，时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
\xa0\xa0\xa0\xa0\xa0\xa0如果细胞收集过程中使用了胰酶，需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC，导致染色失败。
\xa0\xa0\xa0\xa0\xa0\xa0荧光物质均易发生淬灭，在进行荧光观察时，尽量缩短观察时间，同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
\xa0\xa0\xa0\xa0\xa0\xa0用于流式细胞仪检测时，如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞，并且通过调整相关设置和参数也无法改善，可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测，这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
\xa0\xa0\xa0\xa0\xa0\xa0需自备PBS。
\xa0\xa0\xa0\xa0\xa0\xa0本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
\xa0\xa0\xa0\xa0\xa0\xa0为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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Antipyrine进口、国产60800200mg实验报告：
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\xa0\xa0\xa0\xa0\xa0\xa0为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。\xa0\xa0\xa0\xa0\xa0\xa0为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。\xa0\xa0\xa0\xa0\xa0\xa0为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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