\n \xa0本试剂盒只能用于科 学研究，不得用于医学诊断,具体各指标使用说明书请联系客服索取，本模板为通用模板，仅供参考。\xa0
鸡维生素C(VC)ELISA试剂盒
试剂盒检测原理：\xa0
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被样本 抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。
用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最 终的黄色。
颜色的深浅和样品中的样本呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。
样品收集、处理及保 存方法
1. \xa0血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何 细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. \xa0血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。\xa0
3. \xa0细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. \xa0组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。\xa0
5. \xa0保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20 ℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品
1.酶标仪（450nm）
2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3.37℃恒温箱
操作注意事项
1. \xa0试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属 于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2. \xa0实验中不 用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。
3. \xa0浓度为0的 S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，最终结果乘以5才是样本实 际浓度。
4. \xa0严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺 序进行温育操作。
5. \xa0所有液体组分使用前充分摇匀。
鸡维生素C(VC)ELISA试剂盒
试剂盒组成\xa0
名称 \xa0 \xa0 \xa0 \xa0 \xa0 \xa0 \xa0 \xa0 \xa0 96孔配置 \xa0 \xa0 \xa048孔配置 \xa0 \xa0 备注
微孔酶标板 \xa0 \xa0 \xa0 \xa0 12孔×8条 \xa0 \xa0 12孔×4条 \xa0 \xa0无
样本稀释液 \xa0 \xa0 \xa0 \xa0 6mL \xa0 \xa0 \xa0 \xa0 \xa0 \xa0 \xa03mL \xa0 \xa0 \xa0 \xa0 \xa0 无
检测抗体-HRP \xa0 \xa010mL \xa0 \xa0 \xa0 \xa0 \xa0 \xa05mL \xa0 \xa0 \xa0 \xa0 \xa0 无
20×洗涤缓冲液 \xa0 25mL \xa0 \xa0 \xa0 \xa0 \xa0 15mL \xa0 \xa0 \xa0 \xa0 \xa0按说明 书进行稀释
底物A \xa0 \xa0 \xa0 \xa0 \xa0 \xa0 \xa0 \xa0 6mL \xa0 \xa0 \xa0 \xa0 \xa0 \xa0 3mL \xa0 \xa0 \xa0 \xa0 \xa0 \xa0无
底物B \xa0 \xa0 \xa0 \xa0 \xa0 \xa0 \xa0 \xa0 6mL \xa0 \xa0 \xa0 \xa0 \xa0 \xa0 3mL \xa0 \xa0 \xa0 \xa0 \xa0 \xa0无
终止液 \xa0 \xa0 \xa0 \xa0 \xa0 \xa0 \xa0 \xa06mL \xa0 \xa0 \xa0 \xa0 \xa0 \xa0 3mL \xa0 \xa0 \xa0 \xa0 \xa0 \xa0无
封板膜 \xa0 \xa0 \xa0 \xa0 \xa0 \xa0 \xa0 \xa02张 \xa0 \xa0 \xa0 \xa0 \xa0 \xa0 \xa0 2张 \xa0 \xa0 \xa0 \xa0 \xa0 \xa0 无
说明书 \xa0 \xa0 \xa0 \xa0 \xa0 \xa0 \xa0 \xa01份 \xa0 \xa0 \xa0 \xa0 \xa0 \xa0 \xa0 1份 \xa0 \xa0 \xa0 \xa0 \xa0 \xa0 无
自封袋 \xa0 \xa0 \xa0 \xa0 \xa0 \xa0 \xa0 \xa01个 \xa0 \xa0 \xa0 \xa0 \xa0 \xa0 \xa0 1个 \xa0 \xa0 \xa0 \xa0 \xa0 \xa0 无
注：标准品浓度都不相同，麻烦联系客服索取相应说明书
试剂的准备：
20×洗涤缓冲液的稀 释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
洗板方法
1. \xa0手工洗板：甩尽孔内液体，每孔加满洗涤液 ，静置1min后甩尽孔内液体，在吸水纸上拍干，如此洗板5次。
2. \xa0自动洗板机：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。
操作步骤
1. \xa0从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板 条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. \xa0设置标准 品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；
3. \xa0样本孔先 加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL；空白孔不加。
4. \xa0除空白孔 外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔 ，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5. \xa0弃去液体 ，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用 洗板机洗板）。
6. \xa0每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育 15min。
7. \xa0每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm 波长处测定各孔的OD值。
结果判断
\xa0绘制标准曲线：在Excel工作表中，以标准品浓度作横坐标，对应OD值作纵坐标，绘制出标准 品线性回归曲线，按曲线方程计算各样本浓度值。
鸡维生素C(VC)ELISA试剂盒
试剂盒性能
1. 准确性：标准品 线性回归与预期浓度相关系数R值，大于等于0.9900。
2. 灵敏度：最低检 测浓度小于（参考说明书）
3. 特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反 应。
4. 重复性：板内、板间变异系数均小于15%。
5. 贮藏：2-8℃，避光防潮保存。
6. 有效期：6个月\xa0
免责声明
1. \xa0试剂盒仅 供研究使用，不得用于临床实验或人体实验，否则所产生的一切后果，由实验者承担，本公司概不负责。\xa0
\xa0 \xa0 严格按照说明书操作，实验者违反说明书操作，后果由实验者 承担。