兔B细胞淋巴瘤因子2（BCL-2）elisa试剂盒

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兔B细胞淋巴瘤因子2（BCL-2）elisa试剂盒实验原理

兔B细胞淋巴瘤因子2（BCL-2）elisa试剂盒兔B细胞淋巴瘤因子2（BCL-2）elisa试剂盒实验原理实验原理实验原理

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中兔B细胞淋巴瘤因子2（BCL-2）水平。用纯化的兔BCL-2抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入BCL-2，再与HRP标记的BCL-2抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的BCL-2呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中兔B细胞淋巴瘤因子2（BCL-2）浓度。 

本试剂盒应用双抗体夹心法测定本试剂盒应用双抗体夹心法测定本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本标本标本中中中兔兔兔B细胞淋巴瘤因子2（BCL-2）B细胞淋巴瘤因子2（BCL-2）B细胞淋巴瘤因子2（BCL-2）B细胞淋巴瘤因子2（BCL-2）水平。用纯化的水平。用纯化的水平。用纯化的兔兔兔BCL-2BCL-2BCL-2BCL-2抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入BCL-2BCL-2BCL-2BCL-2，，，，再与HRP标记的再与HRP标记的再与HRP标记的BCL-2BCL-2BCL-2BCL-2抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后，经过彻底洗涤后，经过彻底洗涤后加加加底物TMB显色。TMB在底物TMB显色。TMB在底物TMB显色。TMB在HRPHRPHRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的BCL-2BCL-2BCL-2BCL-2呈正相关。用酶标仪在呈正相关。用酶标仪在呈正相关。用酶标仪在450450450nm波长下测定吸光度（OD值），nm波长下测定吸光度（OD值），nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线通过标准曲线通过标准曲线计算样品计算样品计算样品中兔中兔中兔B细胞淋巴瘤因子2（BCL-2）B细胞淋巴瘤因子2（BCL-2）B细胞淋巴瘤因子2（BCL-2）B细胞淋巴瘤因子2（BCL-2）浓度。 浓度。 浓度。

兔B细胞淋巴瘤因子2（BCL-2）elisa试剂盒组成 

兔B细胞淋巴瘤因子2（BCL-2）elisa试剂盒兔B细胞淋巴瘤因子2（BCL-2）elisa试剂盒组成 组成 组成

1	30倍浓缩洗涤液	20ml×1瓶	7	终止液	6ml×1瓶
2	酶标试剂	6ml×1瓶	8	标准品（320ng/L）	0.5ml×1瓶
3	酶标包被板	12孔×8条	9	标准品稀释液	1.5ml×1瓶
4	样品稀释液	6ml×1瓶	10	说明书	1份
5	显色剂A液	6ml×1瓶	11	封板膜	2张
6	显色剂B液	6ml×1/瓶	12	密封袋	1个

1

30倍浓缩洗涤液

20ml×1瓶

7

终止液

6ml×1瓶

2

酶标试剂

6ml×1瓶

8

标准品（320ng/L）

0.5ml×1瓶

3

酶标包被板

12孔×8条

9

标准品稀释液

1.5ml×1瓶

4

样品稀释液

6ml×1瓶

10

说明书

1份

5

显色剂A液

6ml×1瓶

11

封板膜

2张

6

显色剂B液

6ml×1/瓶

12

密封袋

1个

1

30倍浓缩洗涤液

20ml×1瓶

7

终止液

6ml×1瓶

1

1

111

30倍浓缩洗涤液

30倍浓缩洗涤液

30倍浓缩洗涤液30倍浓缩洗涤液30倍浓缩洗涤液

20ml×1瓶

20ml×1瓶

20ml20ml20ml×1瓶×1瓶×1瓶

7

7

777

终止液

终止液

终止液终止液终止液

6ml×1瓶

6ml×1瓶

6ml×1瓶6ml×1瓶6ml×1瓶

2

酶标试剂

6ml×1瓶

8

标准品（320ng/L）

0.5ml×1瓶

2

2

222

酶标试剂

酶标试剂

酶标试剂酶标试剂酶标试剂

6ml×1瓶

6ml×1瓶

6ml×1瓶6ml×1瓶6ml×1瓶

8

8

888

标准品（320ng/L）

标准品（320ng/L）

标准标准标准品（320ng/L）品（320ng/L）品（320ng/L）

0.5ml×1瓶

0.5ml×1瓶

0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶

3

酶标包被板

12孔×8条

9

标准品稀释液

1.5ml×1瓶

3

3

333

酶标包被板

酶标包被板

酶酶酶标包被标包被标包被板板板

12孔×8条

12孔×8条

12孔×8条12孔×8条12孔×8条

9

9

999

标准品稀释液

标准品稀释液

标准品标准品标准品稀释液稀释液稀释液

1.5ml×1瓶

1.5ml×1瓶

1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶

4

样品稀释液

6ml×1瓶

10

说明书

1份

4

4

444

样品稀释液

样品稀释液

样品样品样品稀释液稀释液稀释液

6ml×1瓶

6ml×1瓶

6ml×1瓶6ml×1瓶6ml×1瓶

10

10

101010

说明书

说明书

说明书说明书说明书

1份

1份

1份1份1份

5

显色剂A液

6ml×1瓶

11

封板膜

2张

5

5

555

显色剂A液

显色剂A液

显色剂A液显色剂A液显色剂A液

6ml×1瓶

6ml×1瓶

6ml×1瓶6ml×1瓶6ml×1瓶

11

11

111111

封板膜

封板膜

封板膜封板膜封板膜

2张

2张

2张 2张 2张

6

显色剂B液

6ml×1/瓶

12

密封袋

1个

6

6

666

显色剂B液

显色剂B液

显色剂B液显色剂B液显色剂B液

6ml×1/瓶

6ml×1/瓶

6ml6ml6ml×1/瓶×1/瓶×1/瓶

12

12

121212

密封袋

密封袋

密封袋密封袋密封袋

1个

1个

1个1个1个

兔B细胞淋巴瘤因子2（BCL-2）elisa试剂盒标本要求

兔B细胞淋巴瘤因子2（BCL-2）elisa试剂盒兔B细胞淋巴瘤因子2（BCL-2）elisa试剂盒标本要求标本要求标本要求

1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融

1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于将标本放于将标本放于-20-20-20℃保存，但℃保存，但℃保存，但应应应避免反复冻融避免反复冻融避免反复冻融

2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

2．不能检测含NaN3的样品2．不能检测含NaN3的样品2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

兔B细胞淋巴瘤因子2（BCL-2）elisa试剂盒操作步骤

兔B细胞淋巴瘤因子2（BCL-2）elisa试剂盒兔B细胞淋巴瘤因子2（BCL-2）elisa试剂盒操作步骤操作步骤操作步骤

• 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

160ng/L	5号标准品	150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
80ng/L	4号标准品	150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
40ng/L	3号标准品	150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
20ng/L	2号标准品	150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
10ng/L	1号标准品	150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液

160ng/L

5号标准品

150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液

80ng/L

4号标准品

150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液

40ng/L

3号标准品

150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液

20ng/L

2号标准品

150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液

10ng/L

1号标准品

150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液

160ng/L

5号标准品

150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液

160ng/L

160ng/L

160ng/L160ng/L160ng/L

5号标准品

5号标准品

5号标准品5号标准品5号标准品

150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液

150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液

150150150μμμl的原倍标准品加入150l的原倍标准品加入150l的原倍标准品加入150μμμl标准品稀释液l标准品稀释液l标准品稀释液

80ng/L

4号标准品

150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液

80ng/L

80ng/L

80ng/L80ng/L80ng/L

4号标准品

4号标准品

4号标准品4号标准品4号标准品

150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液

150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液

150150150μμμl的5号标准品加入150l的5号标准品加入150l的5号标准品加入150μμμl标准品稀释液l标准品稀释液l标准品稀释液

40ng/L

3号标准品

150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液

40ng/L

40ng/L

40ng/L40ng/L40ng/L

3号标准品

3号标准品

3号标准品3号标准品3号标准品

150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液

150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液

150150150μμμl的4号标准品加入150l的4号标准品加入150l的4号标准品加入150μμμl标准品稀释液l标准品稀释液l标准品稀释液

20ng/L

2号标准品

150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液

20ng/L

20ng/L

20ng/L20ng/L20ng/L

2号标准品

2号标准品

2号标准品2号标准品2号标准品

150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液

150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液

150150150μμμl的3号标准品加入150l的3号标准品加入150l的3号标准品加入150μμμl标准品稀释液l标准品稀释液l标准品稀释液

10ng/L

1号标准品

150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液

10ng/L

10ng/L

10ng/L10ng/L10ng/L

1号标准品

1号标准品

1号标准品1号标准品1号标准品

150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液

150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液

150150150μμμl的2号标准品加入150l的2号标准品加入150l的2号标准品加入150μμμl标准品稀释液l标准品稀释液l标准品稀释液

• 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
• 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
• 配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
• 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
• 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。 
• 温育：操作同3。
• 洗涤：操作同5。
• 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
• 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
• 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。
• 如果您对我们的产品感兴趣或有疑问，你可以通过网页咨询我们的在线客服，或致电：18017847121，我们将热情为您服务。
• 

加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔待测样品孔待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50。在酶标包被板上标准品准确加样50。在酶标包被板上标准品准确加样50μμμl，l，l，待测样品孔中先加样品稀释液40待测样品孔中先加样品稀释液40待测样品孔中先加样品稀释液40μμμl，然后再加待测样品10l，然后再加待测样品10l，然后再加待测样品10μμμl（样品最终稀释度为5倍）。l（样品最终稀释度为5倍）。l（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻轻轻轻轻晃动晃动晃动混匀混匀混匀。。。

温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

温育：用封板膜封板后置37温育：用封板膜封板后置37温育：用封板膜封板后置37℃温育3℃温育3℃温育3000分钟分钟分钟。 。 。

配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用

配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用

洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干甩干甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。 

加酶：每孔加入酶标试剂50加酶：每孔加入酶标试剂50加酶：每孔加入酶标试剂50μμμl，空白孔除外l，空白孔除外l，空白孔除外。 。 。

温育：操作同3。

温育：操作同3。温育：操作同3。温育：操作同3。

洗涤：操作同5。

洗涤：操作同5。洗涤：操作同5。洗涤：操作同5。

显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.

显色：每孔先加入显色剂A50显色：每孔先加入显色剂A50显色：每孔先加入显色剂A50μμμl，再加入显色剂B50l，再加入显色剂B50l，再加入显色剂B50μμμl，轻轻震荡混匀，37l，轻轻震荡混匀，37l，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.℃避光显色15分钟.℃避光显色15分钟.

终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

终止：每孔加终止终止：每孔加终止终止：每孔加终止液50μl，终止反应液50μl，终止反应液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）（此时蓝色立转黄色）（此时蓝色立转黄色）。。。

测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。

测定：以空白空调零，测定：以空白空调零，测定：以空白空调零，444505050nm波长依序测量各孔的nm波长依序测量各孔的nm波长依序测量各孔的吸光吸光吸光度（OD值）度（OD值）度（OD值）。。。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。测定应在加终止液后15分钟以内进行。测定应在加终止液后15分钟以内进行。

如果您对我们的产品感兴趣或有疑问，你可以通过网页咨询我们的在线客服，或致电：18017847121，我们将热情为您服务。

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