Trelief^® SoSoo Cloning Kit
无缝克隆技术Trelief^® SoSoo Cloning Kit
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无缝克隆技术无缝克隆技术【产品简介】【产品简介】【产品简介】【产品简介】【产品简介】【产品简介】【产品简介】【产品简介】【产品简介】【产品简介】
SoSoo重组克隆试剂盒利用同源重组的原理，可快速将1~5个片段定向克降到任意方式线性化的载体中。本试剂盒含有的2×SoSoo Mix可将单个或多个片段定向重组至载体中，克服了酶切位点的限制，产物可直接转化感受态细胞。重组反应可在恒温条件下快速进行（50℃C处理15 min），数小时内即可完成从DNA样品准备到重组产物的转化涂板培养的全部操作。SoSoo重组克隆试剂盒利用同源重组的原理，可快速将1~5个片段定向克降到任意方式线性化的载体中。本试剂盒含有的2×SoSoo Mix可将单个或多个片段定向重组至载体中，克服了酶切位点的限制，产物可直接转化感受态细胞。重组反应可在恒温条件下快速进行（50℃C处理15 min），数小时内即可完成从DNA样品准备到重组产物的转化涂板培养的全部操作。SoSoo重组克隆试剂盒利用同源重组的原理，可快速将1~5个片段定向克降到任意方式线性化的载体中。本试剂盒含有的2×SoSoo Mix可将单个或多个片段定向重组至载体中，克服了酶切位点的限制，产物可直接转化感受态细胞。重组反应可在恒温条件下快速进行（50℃C处理15 min），数小时内即可完成从DNA样品准备到重组产物的转化涂板培养的全部操作。SoSoo重组克隆试剂盒利用同源重组的原理，可快速将1~5个片段定向克降到任意方式线性化的载体中。本试剂盒含有的2×SoSoo Mix可将单个或多个片段定向重组至载体中，克服了酶切位点的限制，产物可直接转化感受态细胞。重组反应可在恒温条件下快速进行（50℃C处理15 min），数小时内即可完成从DNA样品准备到重组产物的转化涂板培养的全部操作。SoSoo重组克隆试剂盒利用同源重组的原理，可快速将重组克隆试剂盒利用同源重组的原理，可快速将1~51~5个片段定向克降到任意方式线性化的载体中。本试剂盒含有的个片段定向克降到任意方式线性化的载体中。本试剂盒含有的2×SoSoo Mix2×SoSoo Mix可将单个或多个片段定向重组至载体中，克服了酶切位点的限制，产物可直接转化感受态细胞。重组反应可在恒温条件下快速进行（可将单个或多个片段定向重组至载体中，克服了酶切位点的限制，产物可直接转化感受态细胞。重组反应可在恒温条件下快速进行（50℃C50℃C处理处理15 min15 min），数小时内即可完成从），数小时内即可完成从DNADNA样品准备到重组产物的转化涂板培养的全部操作。样品准备到重组产物的转化涂板培养的全部操作。

【产品特点】【产品特点】【产品特点】【产品特点】【产品特点】【产品特点】【产品特点】【产品特点】【产品特点】【产品特点】
快速：反应仅需15 min；快速：反应仅需15 min；快速：反应仅需15 min；快速：反应仅需15 min；快速：反应仅需15 min；快速：反应仅需15 min；快速：反应仅需15 min；快速：反应仅需快速：反应仅需15 min；
简单：不受片段酶切位点影响，无需对片段进行酶切；简单：不受片段酶切位点影响，无需对片段进行酶切；简单：不受片段酶切位点影响，无需对片段进行酶切；简单：不受片段酶切位点影响，无需对片段进行酶切；简单：不受片段酶切位点影响，无需对片段进行酶切；简单：不受片段酶切位点影响，无需对片段进行酶切；简单：不受片段酶切位点影响，无需对片段进行酶切；简单：不受片段酶切位点影响，无需对片段进行酶切；简单：不受片段酶切位点影响，无需对片段进行酶切；
高效：阳性率可达95%以上；高效：阳性率可达95%以上；高效：阳性率可达95%以上；高效：阳性率可达95%以上；高效：阳性率可达95%以上；高效：阳性率可达95%以上；高效：阳性率可达95%以上；高效：阳性率可达高效：阳性率可达95%以上；以上；
无缝：不引入额外序列。无缝：不引入额外序列。无缝：不引入额外序列。无缝：不引入额外序列。无缝：不引入额外序列。无缝：不引入额外序列。无缝：不引入额外序列。无缝：不引入额外序列。无缝：不引入额外序列。

【产品组成及保存】【产品组成及保存】【产品组成及保存】【产品组成及保存】【产品组成及保存】【产品组成及保存】【产品组成及保存】【产品组成及保存】【产品组成及保存】【产品组成及保存】
-25℃~-15℃保存1年，避免反复冻融。-25℃~-15℃保存1年，避免反复冻融。-25℃~-15℃保存1年，避免反复冻融。-25℃~-15℃保存1年，避免反复冻融。-25℃~-15℃保存1年，避免反复冻融。-25℃~-15℃保存1年，避免反复冻融。-25℃~-15℃保存1年，避免反复冻融。-25℃~-15℃保存保存11年，避免反复冻融。年，避免反复冻融。

组分	规格（20 次）
2×SoSoo Mix	100 µL
Control Template（5 ng/µL）*	10 µL
Control Vector（10 ng/µL）**	10 µL

组分规格（20 次）2×SoSoo Mix100 µLControl Template（5 ng/µL）*10 µLControl Vector（10 ng/µL）**10 µL组分规格（20 次）组分组分组分组分规格（20 次）规格（20 次）规格（20 次）规格（20 20 次）次）2×SoSoo Mix100 µL2×SoSoo Mix2×SoSoo Mix2×SoSoo Mix2×SoSoo Mix100 µL100 µL100 µL100 µLControl Template（5 ng/µL）*10 µLControl Template（5 ng/µL）*Control Template（5 ng/µL）*Control Template（5 ng/µL）*Control Template（（5 ng/µL5 ng/µL）*）*10 µL10 µL10 µL10 µLControl Vector（10 ng/µL）**10 µLControl Vector（10 ng/µL）**Control Vector（10 ng/µL）**Control Vector（10 ng/µL）**Control Vector（（10 ng/µL10 ng/µL））****10 µL10 µL10 µL10 µL *线性化质粒，抗性为 Amp，含 M13F/R 序列。
**阳性对照片段，大小为1,000 bp。*线性化质粒，抗性为 Amp，含 M13F/R 序列。
**阳性对照片段，大小为1,000 bp。*线性化质粒，抗性为 Amp，含 M13F/R 序列。
**阳性对照片段，大小为1,000 bp。*线性化质粒，抗性为 Amp，含 M13F/R 序列。
**阳性对照片段，大小为1,000 bp。*线性化质粒，抗性为 Amp，含 M13F/R 序列。
**阳性对照片段，大小为1,000 bp。*线性化质粒，抗性为 Amp，含 M13F/R 序列。
**阳性对照片段，大小为1,000 bp。*线性化质粒，抗性为 Amp，含 M13F/R 序列。
**阳性对照片段，大小为1,000 bp。*线性化质粒，抗性为 线性化质粒，抗性为 AmpAmp，含 ，含 M13F/R M13F/R 序列。
**阳性对照片段，大小为1,000 bp。序列。
**阳性对照片段，大小为1,000 bp。

【产品应用】
无缝克隆；【产品应用】【产品应用】【产品应用】【产品应用】【产品应用】【产品应用】【产品应用】【产品应用】【产品应用】
无缝克隆；无缝克隆；无缝克隆；无缝克隆；无缝克隆；无缝克隆；
定点突变；定点突变；定点突变；定点突变；定点突变；定点突变；定点突变；
高通量克隆。高通量克隆。高通量克隆。高通量克隆。高通量克隆。高通量克隆。高通量克隆。

【注意事项】
重叠区域的Tm值尽量一致且>60℃；【注意事项】【注意事项】【注意事项】【注意事项】【注意事项】【注意事项】【注意事项】【注意事项】【注意事项】
重叠区域的Tm值尽量一致且>60℃；重叠区域的Tm值尽量一致且>60℃重叠区域的Tm值尽量一致且>60℃重叠区域的Tm值尽量一致且>60℃重叠区域的重叠区域的Tm值尽量一致且值尽量一致且>60℃>60℃；；；；；
线性化载体和片段PCR产物必须凝胶纯化，常用的分光光度法极易受DNA纯度、DNA稀释液pH等因素影响，测定值和DNA实际浓度往往偏差较大，推荐纯化后通过琼脂糖凝胶电泳检测其质量和浓度；线性化载体和片段PCR产物必须凝胶纯化，常用的分光光度法极易受DNA纯度、DNA稀释液pH等因素影响，测定值和DNA实际浓度往往偏差较大，推荐纯化后通过琼脂糖凝胶电泳检测其质量和浓度；线性化载体和片段PCR产物必须凝胶纯化，常用的分光光度法极易受DNA纯度、DNA稀释液pH等因素影响，测定值和DNA实际浓度往往偏差较大，推荐纯化后通过琼脂糖凝胶电泳检测其质量和浓度线性化载体和片段PCR产物必须凝胶纯化，常用的分光光度法极易受DNA纯度、DNA稀释液pH等因素影响，测定值和DNA实际浓度往往偏差较大，推荐纯化后通过琼脂糖凝胶电泳检测其质量和浓度线性化载体和片段PCR产物必须凝胶纯化，常用的分光光度法极易受DNA纯度、DNA稀释液pH等因素影响，测定值和DNA实际浓度往往偏差较大，推荐纯化后通过琼脂糖凝胶电泳检测其质量和浓度线性化载体和片段线性化载体和片段PCR产物必须凝胶纯化，常用的分光光度法极易受产物必须凝胶纯化，常用的分光光度法极易受DNADNA纯度、纯度、DNADNA稀释液稀释液pHpH等因素影响，测定值和等因素影响，测定值和DNADNA实际浓度往往偏差较大，推荐纯化后通过琼脂糖凝胶电泳检测其质量和浓度实际浓度往往偏差较大，推荐纯化后通过琼脂糖凝胶电泳检测其质量和浓度；；；；；
控制好载体和片段的用量及摩尔比，线性化载体用量在10~100 ng之间，载体和插入片段摩尔比1∶2~1∶10均可，多片段连接时各片段摩尔比为1∶1。控制好载体和片段的用量及摩尔比，线性化载体用量在10~100 ng之间，载体和插入片段摩尔比1∶2~1∶10均可，多片段连接时各片段摩尔比为1∶1。控制好载体和片段的用量及摩尔比，线性化载体用量在10~100 ng之间，载体和插入片段摩尔比1∶2~1∶10均可，多片段连接时各片段摩尔比为1∶1。控制好载体和片段的用量及摩尔比，线性化载体用量在10~100 ng之间，载体和插入片段摩尔比1∶2~1∶10均可，多片段连接时各片段摩尔比为1∶1。控制好载体和片段的用量及摩尔比，线性化载体用量在10~100 ng之间，载体和插入片段摩尔比1∶2~1∶10均可，多片段连接时各片段摩尔比为1∶1。控制好载体和片段的用量及摩尔比，线性化载体用量在控制好载体和片段的用量及摩尔比，线性化载体用量在10~100 ng之间，载体和插入片段摩尔比之间，载体和插入片段摩尔比1∶2~1∶101∶2~1∶10均可，多片段连接时各片段摩尔比为均可，多片段连接时各片段摩尔比为1∶11∶1。。
加样完成后，吹打混匀，低速瞬时离心使所有溶液至离心管底部，重组产物即连即转；加样完成后，吹打混匀，低速瞬时离心使所有溶液至离心管底部，重组产物即连即转；加样完成后，吹打混匀，低速瞬时离心使所有溶液至离心管底部，重组产物即连即转加样完成后，吹打混匀，低速瞬时离心使所有溶液至离心管底部，重组产物即连即转加样完成后，吹打混匀，低速瞬时离心使所有溶液至离心管底部，重组产物即连即转加样完成后，吹打混匀，低速瞬时离心使所有溶液至离心管底部，重组产物即连即转加样完成后，吹打混匀，低速瞬时离心使所有溶液至离心管底部，重组产物即连即转；；；；；
建议每次实验，做阳性片段和阳性质粒的对照。建议每次实验，做阳性片段和阳性质粒的对照。建议每次实验，做阳性片段和阳性质粒的对照。建议每次实验，做阳性片段和阳性质粒的对照。建议每次实验，做阳性片段和阳性质粒的对照。建议每次实验，做阳性片段和阳性质粒的对照。建议每次实验，做阳性片段和阳性质粒的对照。

【操作流程】【操作流程】【操作流程】【操作流程】【操作流程】【操作流程】【操作流程】【操作流程】【操作流程】【操作流程】
按照如下体系配制反应液，混匀瞬时离心后上机。50℃，15 min。按照如下体系配制反应液，混匀瞬时离心后上机。50℃，15 min。按照如下体系配制反应液，混匀瞬时离心后上机。50℃，15 min。按照如下体系配制反应液，混匀瞬时离心后上机。50℃，15 min。按照如下体系配制反应液，混匀瞬时离心后上机。50℃，15 min。按照如下体系配制反应液，混匀瞬时离心后上机。50℃，15 min。按照如下体系配制反应液，混匀瞬时离心后上机。50℃，15 min。按照如下体系配制反应液，混匀瞬时离心后上机。按照如下体系配制反应液，混匀瞬时离心后上机。50℃，，15 min15 min。。

组分	体积
2×SoSoo Mix	5 µL
插入片段 1	X1 µL*
......	......
插入片段 n	Xn µL
线性载体	Y µL *
ddH2O	Up to 10 µL

组分体积2×SoSoo Mix5 µL插入片段 1X1 µL*............插入片段 nXn µL线性载体Y µL *ddH₂OUp to 10 µL组分体积组分组分组分组分体积体积体积体积2×SoSoo Mix5 µL2×SoSoo Mix2×SoSoo Mix2×SoSoo Mix2×SoSoo Mix5 µL5 µL5 µL5 µL插入片段 1X1 µL*插入片段 1插入片段 1插入片段 1插入片段 11X1 µL*X1 µL*X1 µL*X1 µL*............................................................插入片段 nXn µL插入片段 n插入片段 n插入片段 n插入片段 nnXn µLXn µLXn µLXn µL线性载体Y µL *线性载体线性载体线性载体线性载体Y µL *Y µL *Y µL *Y µL *ddH₂OUp to 10 µLddH₂OddHddHddH₂22222OOOUp to 10 µLUp to 10 µLUp to 10 µLUp to 10 µL *载体与插入片段的摩尔比为1：2~1：10。多片段连接时各片段之间摩尔比为1：1。*载体与插入片段的摩尔比为1：2~1：10。多片段连接时各片段之间摩尔比为1：1。*载体与插入片段的摩尔比为1：2~1：10。多片段连接时各片段之间摩尔比为1：1。*载体与插入片段的摩尔比为1：2~1：10。多片段连接时各片段之间摩尔比为1：1。*载体与插入片段的摩尔比为1：2~1：10。多片段连接时各片段之间摩尔比为1：1。*载体与插入片段的摩尔比为1：2~1：10。多片段连接时各片段之间摩尔比为1：1。*载体与插入片段的摩尔比为1：2~1：10。多片段连接时各片段之间摩尔比为1：1。*载体与插入片段的摩尔比为载体与插入片段的摩尔比为11：：2~12~1：：1010。多片段连接时各片段之间摩尔比为。多片段连接时各片段之间摩尔比为11：：11。。
pmols=（质量ng×1000）/（片段长度bp×650 daltons）。pmols=（质量ng×1000）/（片段长度bp×650 daltons）。pmols=（质量ng×1000）/（片段长度bp×650 daltons）。pmols=（质量ng×1000）/（片段长度bp×650 daltons）。pmols=（质量ng×1000）/（片段长度bp×650 daltons）。pmols=（质量ng×1000）/（片段长度bp×650 daltons）。pmols=（质量ng×1000）/（片段长度bp×650 daltons）。pmols=（质量（质量ng×1000ng×1000））//（片段长度（片段长度bp×650 daltonsbp×650 daltons）。）。
公式简化后V载体：V片段=摩尔比×（B载体C片段/B片段C载体）公式简化后V载体：V片段=摩尔比×（B载体C片段/B片段C载体）公式简化后V载体：V片段=摩尔比×（B载体C片段/B片段C载体）公式简化后V载体：V片段=摩尔比×（B载体C片段/B片段C载体）公式简化后V载体：V片段=摩尔比×（B载体C片段/B片段C载体）公式简化后V载体：V片段=摩尔比×（B载体C片段/B片段C载体）公式简化后V载体：V片段=摩尔比×（B载体C片段/B片段C载体）公式简化后公式简化后V载体：载体：VV片段片段==摩尔比摩尔比××（（BB载体载体CC片段片段/B/B片段片段CC载体）载体）
（V表示体积，B表示片段长度，C表示浓度）（V表示体积，B表示片段长度，C表示浓度）（V表示体积，B表示片段长度，C表示浓度）（V表示体积，B表示片段长度，C表示浓度）（V表示体积，B表示片段长度，C表示浓度）（V表示体积，B表示片段长度，C表示浓度）（V表示体积，B表示片段长度，C表示浓度）（（V表示体积，表示体积，BB表示片段长度，表示片段长度，CC表示浓度）表示浓度）
例如：例如：例如：例如：例如：例如：例如：例如：例如：
5 kb线性化载体（20 ng/µL）与2 kb的插入片段（100 ng/µL）以摩尔比1：5连接。载体和片段的体积比计算为：5 kb线性化载体（20 ng/µL）与2 kb的插入片段（100 ng/µL）以摩尔比1：5连接。载体和片段的体积比计算为：5 kb线性化载体（20 ng/µL）与2 kb的插入片段（100 ng/µL）以摩尔比1：5连接。载体和片段的体积比计算为：5 kb线性化载体（20 ng/µL）与2 kb的插入片段（100 ng/µL）以摩尔比1：5连接。载体和片段的体积比计算为：5 kb线性化载体（20 ng/µL）与2 kb的插入片段（100 ng/µL）以摩尔比1：5连接。载体和片段的体积比计算为：5 kb线性化载体（20 ng/µL）与2 kb的插入片段（100 ng/µL）以摩尔比1：5连接。载体和片段的体积比计算为：5 kb线性化载体（20 ng/µL）与2 kb的插入片段（100 ng/µL）以摩尔比1：5连接。载体和片段的体积比计算为：5 kb线性化载体（线性化载体（20 ng/µL20 ng/µL）与）与2 kb2 kb的插入片段（的插入片段（100 ng/µL100 ng/µL）以摩尔比）以摩尔比11：：55连接。载体和片段的体积比计算为：连接。载体和片段的体积比计算为：
即V载体：V片段=1/5×(5×100/2×20)=2.5，所以反应体系为即V载体：V片段=1/5×(5×100/2×20)=2.5，所以反应体系为即V载体：V片段=1/5×(5×100/2×20)=2.5，所以反应体系为即V载体：V片段=1/5×(5×100/2×20)=2.5，所以反应体系为即V载体：V片段=1/5×(5×100/2×20)=2.5，所以反应体系为即V载体：V片段=1/5×(5×100/2×20)=2.5，所以反应体系为即V载体：V片段=1/5×(5×100/2×20)=2.5，所以反应体系为即即V载体：载体：VV片段片段=1/5×(5×100/2×20)=2.5=1/5×(5×100/2×20)=2.5，所以反应体系为，所以反应体系为

组分	体积
2×SoSoo Mix	5 µL
插入片段	1.4 µL
线性载体	3.6 µL
ddH2O	Up to 10 µL

组分体积2×SoSoo Mix5 µL插入片段1.4 µL线性载体3.6 µLddH₂OUp to 10 µL组分体积组分组分组分组分体积体积体积体积2×SoSoo Mix5 µL2×SoSoo Mix2×SoSoo Mix2×SoSoo Mix2×SoSoo Mix5 µL5 µL5 µL5 µL插入片段1.4 µL插入片段插入片段插入片段插入片段1.4 µL1.4 µL1.4 µL1.4 µL线性载体3.6 µL线性载体线性载体线性载体线性载体3.6 µL3.6 µL3.6 µL3.6 µLddH₂OUp to 10 µLddH₂OddHddHddH₂22222OOOUp to 10 µLUp to 10 µLUp to 10 µLUp to 10 µL
【实例分享】【实例分享】【实例分享】【实例分享】【实例分享】【实例分享】【实例分享】【实例分享】【实例分享】【实例分享】
使用Trelief^TM SoSoo Cloning Kit（TSV-S1），分别将 1 kb、5 kb 的目的片段插入载体 pcDNA3.1（+）中，结果显示插入成功率均为100%。使用Trelief^TM SoSoo Cloning Kit（TSV-S1），分别将 1 kb、5 kb 的目的片段插入载体 pcDNA3.1（+）中，结果显示插入成功率均为100%。使用Trelief^TM SoSoo Cloning Kit（TSV-S1），分别将 1 kb、5 kb 的目的片段插入载体 pcDNA3.1（+）中，结果显示插入成功率均为100%。使用Trelief^TM SoSoo Cloning Kit（TSV-S1），分别将 1 kb、5 kb 的目的片段插入载体 pcDNA3.1（+）中，结果显示插入成功率均为100%。使用Trelief^TM SoSoo Cloning Kit（TSV-S1），分别将 1 kb、5 kb 的目的片段插入载体 pcDNA3.1（+）中，结果显示插入成功率均为100%。使用Trelief^TM SoSoo Cloning Kit（TSV-S1），分别将 1 kb、5 kb 的目的片段插入载体 pcDNA3.1（+）中，结果显示插入成功率均为100%。使用Trelief^TM SoSoo Cloning Kit（TSV-S1），分别将 1 kb、5 kb 的目的片段插入载体 pcDNA3.1（+）中，结果显示插入成功率均为100%。使用使用TreliefTrelief ^TMTM SoSoo Cloning Kit（（TSV-S1TSV-S1），分别将 ），分别将 1 kb1 kb、、5 kb 5 kb 的目的片段插入载体 的目的片段插入载体 pcDNA3.1pcDNA3.1（（++）中，结果显示插入成功率均为）中，结果显示插入成功率均为100%100%。。
【问题讨论】【问题讨论】【问题讨论】【问题讨论】【问题讨论】【问题讨论】【问题讨论】【问题讨论】【问题讨论】【问题讨论】
Q1.不长菌落或菌落极少?Q1.不长菌落或菌落极少?Q1.不长菌落或菌落极少?Q1.不长菌落或菌落极少?Q1.不长菌落或菌落极少?Q1.不长菌落或菌落极少不长菌落或菌落极少??
1）感受态效率低1）感受态效率低1）感受态效率低1）感受态效率低1）感受态效率低1）感受态效率低）感受态效率低
使用新制备或妥善冻存的感受态细胞，确保转化效率>107cfu/ ug。每次可设置一组转化质粒的对照实验，以检测感受态细胞的转化效率。使用新制备或妥善冻存的感受态细胞，确保转化效率>107cfu/ ug。每次可设置一组转化质粒的对照实验，以检测感受态细胞的转化效率。使用新制备或妥善冻存的感受态细胞，确保转化效率>107cfu/ ug。每次可设置一组转化质粒的对照实验，以检测感受态细胞的转化效率。使用新制备或妥善冻存的感受态细胞，确保转化效率>107cfu/ ug。每次可设置一组转化质粒的对照实验，以检测感受态细胞的转化效率。使用新制备或妥善冻存的感受态细胞，确保转化效率>107cfu/ ug。每次可设置一组转化质粒的对照实验，以检测感受态细胞的转化效率。使用新制备或妥善冻存的感受态细胞，确保转化效率使用新制备或妥善冻存的感受态细胞，确保转化效率>107cfu/ ug。每次可设置一组转化质粒的对照实验，以检测感受态细胞的转化效率。。每次可设置一组转化质粒的对照实验，以检测感受态细胞的转化效率。
2）线性化克隆载体和插入片段扩增产物的使用量不足或过量，或者比例不佳。2）线性化克隆载体和插入片段扩增产物的使用量不足或过量，或者比例不佳。2）2）2）22））线性化克隆载体和插入片段扩增产物的使用量不足或过量，或者比例不佳线性化克隆载体和插入片段扩增产物的使用量不足或过量，或者比例不佳线性化克隆载体和插入片段扩增产物的使用量不足或过量，或者比例不佳线性化克隆载体和插入片段扩增产物的使用量不足或过量，或者比例不佳线性化克隆载体和插入片段扩增产物的使用量不足或过量，或者比例不佳。。。。。
3）PCR产物未纯化或紫外照射时间过长在365nm长波紫外下切胶纯化，短波紫外会损伤DNA。3）PCR产物未纯化或紫外照射时间过长在365nm长波紫外下切胶纯化，短波紫外会损伤DNA。3）P3）P3）P33））PPCR产物未纯化或紫外照射时间过长在365nm长波紫外下切胶纯化，短波紫外会损伤DNA。CR产物未纯化或紫外照射时间过长在365nm长波紫外下切胶纯化，短波紫外会损伤DNA。CR产物未纯化或紫外照射时间过长在365nm长波紫外下切胶纯化，短波紫外会损伤DNA。CR产物未纯化或紫外照射时间过长在产物未纯化或紫外照射时间过长在365nm365nm长波紫外下切胶纯化，短波紫外会损伤长波紫外下切胶纯化，短波紫外会损伤DNADNA。。
4）线性载体和插入片段不纯，抑制反应4）线性载体和插入片段不纯，抑制反应4）线性载体和插入片段不纯，抑制反应4）线性载体和插入片段不纯，抑制反应4）线性载体和插入片段不纯，抑制反应4）线性载体和插入片段不纯，抑制反应）线性载体和插入片段不纯，抑制反应
实验证明连接体系中FDTA，胍盐等会显著降低重组效率，可再次纯化去除盐分的干扰。DNA纯化产物推荐溶解保存在pH8.0的ddH2O中。实验证明连接体系中FDTA，胍盐等会显著降低重组效率，可再次纯化去除盐分的干扰。DNA纯化产物推荐溶解保存在pH8.0的ddH2O中。实验证明连接体系中FDTA，胍盐等会显著降低重组效率，可再次纯化去除盐分的干扰。DNA纯化产物推荐溶解保存在pH8.0的ddH实验证明连接体系中FDTA，胍盐等会显著降低重组效率，可再次纯化去除盐分的干扰。DNA纯化产物推荐溶解保存在pH8.0的ddH实验证明连接体系中FDTA，胍盐等会显著降低重组效率，可再次纯化去除盐分的干扰。DNA纯化产物推荐溶解保存在pH8.0的ddH实验证明连接体系中实验证明连接体系中FDTA，胍盐等会显著降低重组效率，可再次纯化去除盐分的干扰。，胍盐等会显著降低重组效率，可再次纯化去除盐分的干扰。DNADNA纯化产物推荐溶解保存在纯化产物推荐溶解保存在pH8.0pH8.0的的ddHddH22222O中。O中。O中。O中。中。
5）平板抗生素使用错误或浓度过高核查平板抗性以及浓度是否正确。5）平板抗生素使用错误或浓度过高核查平板抗性以及浓度是否正确。5555）））））平板抗生素使用错误或浓度过高核查平板抗性以及浓度是否正确。平板抗生素使用错误或浓度过高核查平板抗性以及浓度是否正确。平板抗生素使用错误或浓度过高核查平板抗性以及浓度是否正确。平板抗生素使用错误或浓度过高核查平板抗性以及浓度是否正确。平板抗生素使用错误或浓度过高核查平板抗性以及浓度是否正确。

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北京擎科生物科技有限公司（Tsingke Biotechnology Co., Ltd.）是一家合成生物学国家高新技术企业，从事合成基因组学与生物合成产品的研究及开发。业务范围涵盖合成基因组学产品及服务、生命科学研究设备及原料、生物制造CRO/CDMO三大方向。北京擎科生物科技有限公司（Tsingke Biotechnology Co., Ltd.）是一家合成生物学国家高新技术企业，从事合成基因组学与生物合成产品的研究及开发。业务范围涵盖合成基因组学产品及服务、生命科学研究设备及原料、生物制造CRO/CDMO三大方向。北京擎科生物科技有限公司（北京擎科生物科技有限公司（北京擎科生物科技有限公司（北京擎科生物科技有限公司（Tsingke Biotechnology Co., Ltd.Tsingke Biotechnology Co., Ltd.Tsingke Biotechnology Co., Ltd.）是一家合成生物学国家高新技术企业，从事合成基因组学与生物合成产品的研究及开发。业务范围涵盖合成基因组学产品及服务、生命科学研究设备及原料、生物制造）是一家合成生物学国家高新技术企业，从事合成基因组学与生物合成产品的研究及开发。业务范围涵盖合成基因组学产品及服务、生命科学研究设备及原料、生物制造）是一家合成生物学国家高新技术企业，从事合成基因组学与生物合成产品的研究及开发。业务范围涵盖合成基因组学产品及服务、生命科学研究设备及原料、生物制造）是一家合成生物学国家高新技术企业，从事合成基因组学与生物合成产品的研究及开发。业务范围涵盖合成基因组学产品及服务、生命科学研究设备及原料、生物制造CRO/CDMOCRO/CDMOCRO/CDMO三大方向。三大方向。三大方向。三大方向。
公司总部位于北京，运营实体和实验室遍布全国，业务覆盖中国并延伸至美国、德国等多个海外国家，为全球约12万用户提供服务与产品。截至2021年09月，公司现有员工1700名，拥有122项专利及核心技术，其中超53项为发明专利。使用擎科生物服务和产品客户发表文章累计超过4340篇，影响因子累计达到14481.39。公司总部位于北京，运营实体和实验室遍布全国，业务覆盖中国并延伸至美国、德国等多个海外国家，为全球约12万用户提供服务与产品。截至2021年09月，公司现有员工1700名，拥有122项专利及核心技术，其中超53项为发明专利。使用擎科生物服务和产品客户发表文章累计超过4340篇，影响因子累计达到14481.39。公司总部位于北京，运营实体和实验室遍布全国，业务覆盖中国并延伸至美国、德国等多个海外国家，为全球约公司总部位于北京，运营实体和实验室遍布全国，业务覆盖中国并延伸至美国、德国等多个海外国家，为全球约公司总部位于北京，运营实体和实验室遍布全国，业务覆盖中国并延伸至美国、德国等多个海外国家，为全球约公司总部位于北京，运营实体和实验室遍布全国，业务覆盖中国并延伸至美国、德国等多个海外国家，为全球约121212万用户提供服务与产品。截至万用户提供服务与产品。截至万用户提供服务与产品。截至万用户提供服务与产品。截至202120212021年年年年090909月，公司现有员工月，公司现有员工月，公司现有员工月，公司现有员工170017001700名，拥有名，拥有名，拥有名，拥有122122122项专利及核心技术，其中超项专利及核心技术，其中超项专利及核心技术，其中超项专利及核心技术，其中超535353项为发明专利。使用擎科生物服务和产品客户发表文章累计超过项为发明专利。使用擎科生物服务和产品客户发表文章累计超过项为发明专利。使用擎科生物服务和产品客户发表文章累计超过项为发明专利。使用擎科生物服务和产品客户发表文章累计超过434043404340篇，影响因子累计达到篇，影响因子累计达到篇，影响因子累计达到篇，影响因子累计达到14481.3914481.3914481.39。。。。
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本试剂产品仅供科学研究或进一步生产使用,不可用于临床诊断或治疗。本试剂产品仅供科学研究或进一步生产使用,不可用于临床诊断或治疗。