山羊白介素4(IL-4)ELISA试剂盒

本试剂盒仅供研究使用。

使用目的：
本试剂盒用于测定山羊血清，血浆及相关液体样本中白介素4(IL-4)含量。



实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中白介素4(IL-4)水平。用纯化的白介素4(IL-4)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入白介素4(IL-4)，再与HRP标记的白介素4(IL-4)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的白介素4(IL-4)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中白介素4(IL-4)浓度。
试剂盒组成 山羊白介素4(IL-4)ELISA试剂盒

本试剂盒仅供研究使用。

使用目的：
本试剂盒用于测定山羊血清，血浆及相关液体样本中白介素4(IL-4)含量。



实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中白介素4(IL-4)水平。用纯化的白介素4(IL-4)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入白介素4(IL-4)，再与HRP标记的白介素4(IL-4)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的白介素4(IL-4)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中白介素4(IL-4)浓度。
试剂盒组成 山羊白介素4(IL-4)ELISA试剂盒山羊白介素4(IL-4)ELISA试剂盒山羊白介素4(IL-4)ELISA试剂盒

本试剂盒仅供研究使用。

使用目的：使用目的：
本试剂盒用于测定山羊山羊血清，血浆及相关液体样本中血清，血浆及相关液体样本中白介素4(IL-4)白介素4(IL-4)白介素4(IL-4)含量含量。



实验原理实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中白介素4(IL-4)白介素4(IL-4)白介素4(IL-4)水平。用纯化的白介素4(IL-4)白介素4(IL-4)白介素4(IL-4)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入白介素4(IL-4)白介素4(IL-4)白介素4(IL-4)，，再与HRP标记的白介素4(IL-4)白介素4(IL-4)白介素4(IL-4)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的白介素4(IL-4)白介素4(IL-4)白介素4(IL-4)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中白介素4(IL-4)白介素4(IL-4)白介素4(IL-4)浓浓度。
试剂盒组成 试剂盒组成

1	30倍浓缩洗涤液	20ml×1瓶	7	终止液	6ml×1瓶
2	酶标试剂	6ml×1瓶	8	标准品（120ng/L）	0.5ml×1瓶
3	酶标包被板	12孔×8条	9	标准品稀释液	1.5ml×1瓶
4	样品稀释液	6ml×1瓶	10	说明书	1份
5	显色剂A液	6ml×1瓶	11	封板膜	2张
6	显色剂B液	6ml×1/瓶	12	密封袋	1个

130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品（120ng/L）0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张 6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶111130倍浓缩洗涤液30倍浓缩洗涤液30倍浓缩洗涤液30倍浓缩洗涤液20ml×1瓶20ml×1瓶20ml×1瓶20ml×1瓶7777终止液终止液终止液终止液6ml×1瓶6ml×1瓶6ml×1瓶6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品（120ng/L）0.5ml×1瓶2222酶标试剂酶标试剂酶标试剂酶标试剂6ml×1瓶6ml×1瓶6ml×1瓶6ml×1瓶8888标准品（120ng/L）标准品（120ng/L）标准品（120ng/L）标准品（120ng/L）0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶3333酶标包被板酶标包被板酶标包被板酶标包被板12孔×8条12孔×8条12孔×8条12孔×8条9999标准品稀释液标准品稀释液标准品稀释液标准品稀释液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份4444样品稀释液样品稀释液样品稀释液样品稀释液6ml×1瓶6ml×1瓶6ml×1瓶6ml×1瓶10101010说明书说明书说明书说明书1份1份1份1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张 5555显色剂A液显色剂A液显色剂A液显色剂A液6ml×1瓶6ml×1瓶6ml×1瓶6ml×1瓶11111111封板膜封板膜封板膜封板膜2张 2张 2张 2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个6666显色剂B液显色剂B液显色剂B液显色剂B液6ml×1/瓶6ml×1/瓶6ml×1/瓶6ml×1/瓶12121212密封袋密封袋密封袋密封袋1个1个1个1个 标本要求
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。



操作步骤标本要求
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。



操作步骤标本要求标本要求
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。



操作步骤操作步骤

1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

60ng/L	5号标准品	150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
30 ng/L	4号标准品	150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
15 ng/L	3号标准品	150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
7.5 ng/L	2号标准品	150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
3.75 ng/L	1号标准品	150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液

60ng/L5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液30 ng/L4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液15 ng/L3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液7.5 ng/L2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液3.75 ng/L1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液60ng/L5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液60ng/L60ng/L60ng/L60ng/L5号标准品5号标准品5号标准品5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液30 ng/L4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液30 ng/L30 ng/L30 ng/L30 ng/L4号标准品4号标准品4号标准品4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液15 ng/L3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液15 ng/L15 ng/L15 ng/L15 ng/L3号标准品3号标准品3号标准品3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液7.5 ng/L2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液7.5 ng/L7.5 ng/L7.5 ng/L7.5 ng/L2号标准品2号标准品2号标准品2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液3.75 ng/L1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液3.75 ng/L3.75 ng/L3.75 ng/L3.75 ng/L1号标准品1号标准品1号标准品1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液

1. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
2. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
3. 配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。
4. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
5. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
6. 温育：操作同3。
7. 洗涤：操作同5。
8. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10分钟。
9. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
10. 测定：以空白孔调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。

配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。

洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

温育：操作同3。

温育：操作同3。温育：操作同3。温育：操作同3。

洗涤：操作同5。

洗涤：操作同5。洗涤：操作同5。洗涤：操作同5。

显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10分钟。

显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10分钟。显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10分钟。显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10分钟。

终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

测定：以空白孔调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

测定：以空白孔调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。测定：以空白孔调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。测定：以空白孔调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
操作程序总结：


计算
以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。




注意事项
1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。操作程序总结：


计算
以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。




注意事项
1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。操作程序总结：操作程序总结：


计算计算
以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。




注意事项注意事项
1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。4. 请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。4. 请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。4. 请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。5. 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。5. 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。5. 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。 6．底物请避光保存。
7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9．本试剂不同批号组分不得混用。
保存条件及有效期
1．试剂盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6个 6．底物请避光保存。
7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9．本试剂不同批号组分不得混用。
保存条件及有效期
1．试剂盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6个 6．底物请避光保存。
7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9．本试剂不同批号组分不得混用。
保存条件及有效期保存条件及有效期
1．试剂盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6个