人转化生长因子β3酶联免疫吸附测定试剂盒
HumanTGF-β3 ELISA Kit
本产品冰袋运输；保存于4℃(其中 标准品 需保存于-20℃)，保质期6个月；标准品如存放于4℃，1~2周内有效。

货号规格
HJ10796次

产品特点
g人转化生长因子β3酶联免疫吸附测定试剂盒人转化生长因子β3酶联免疫吸附测定试剂盒人转化生长因子β3酶联免疫吸附测定试剂盒人转化生长因子β3酶联免疫吸附测定试剂盒
HumanTGF-β3 ELISA KitHumanHumanHumanHuman TGF-β3 ELISA KitTGF-β3 ELISA KitTGF-β3 ELISA KitTGF-β3 ELISA Kit
本产品冰袋运输；保存于4℃(其中 标准品 需保存于-20℃)，保质期6个月；标准品如存放于4℃，1~2周内有效。本产品冰袋本产品冰袋本产品冰袋本产品冰袋运输；保存于运输；保存于运输；保存于运输；保存于4444℃℃℃℃((((其中 其中 其中 其中 标准品标准品标准品标准品标准品标准品 需保存于 需保存于 需保存于 需保存于-----20202020℃℃℃℃))))，保质期，保质期，保质期，保质期6666个月个月个月个月；；；；标准品标准品标准品标准品标准品标准品如存放于4如存放于4如存放于4如存放于4℃℃℃℃，1~2周内有效。，1~2周内有效。，1~2周内有效。，1~2周内有效。

货号规格货号规格货号规格货号规格
HJ10796次HJ107HJ107 96次96次

产品特点产品特点产品特点产品特点产品特点
gggd高灵敏度——多次重复结果表明，最小检出量为29.4 pg/mL；
gd高特异性——与人的TGF-β1、latent TGF-β1、TGF-β2、TGF-βRⅡ等均无交叉反应；
gd高灵敏度——多次重复结果表明，最小检出量为29.4 pg/mL；
gdd高灵敏度高灵敏度高灵敏度——————多次重复结果表明，最小检出量为29.4 pg/mL；多次重复结果表明，最小检出量为29.4 pg/mL；
ggd高特异性——与人的TGF-β1、latent TGF-β1、TGF-β2、TGF-βRⅡ等均无交叉反应；
gdd高特异性高特异性高特异性——————与人的TGF-β1、latent TGF-β1、TGF-β2、TGF-βRⅡ等均无交叉反应；与人的TGF-β1、latent TGF-β1、TGF-β2、TGF-βRⅡ等均无交叉反应；
ggd重复性好——板内，板间变异系数均小于10%。

产品简介
good本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法检测样品中人转化生长因子β3(TGF-β3)的浓度。人TGF-β3捕获抗体已经预包被于酶标板上，当加入样品或标准品时，其中的人TGF-β3会与捕获抗体结合，而其它游离成分则会通过洗涤被除去。接着，再加入生物素化的抗人TGF-β3抗体后，抗人TGF-β3抗体与人TGF-β3接合，形成夹心的免疫复合物，其它游离成分则通过洗涤被除去。随后加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的亲合素，生物素与亲合素特异性结合，这样亲合素上标记的HRP就与夹心的免疫复合物连接起来，而其它游离成分则通过洗涤被除去。最后加入显色剂，若样品中存在人TGF-β3，则会形成免疫复合物，其上连接的HRP会催化无色的显色剂氧化生成蓝色物质，而后加入终止液，最终产物呈黄色。通过酶标仪检测，读其450 nm处的OD值，人TGF-β3浓度与OD450值之间呈正比，通过检测标准品绘制标准曲线，对照未知样品中OD值，即可计算出样品中人TGF-β3的浓度。

背景简介
good转化生长因子β3(TGF-β3)隶属于TGF-β超家族，与该家族中其它成员有类似的结构和功能。成熟的人TGF-β3是含有112个氨基酸的多肽，通常与LAP以复合物的形式分泌，该复合物可由血纤维蛋白溶酶、基质金属蛋白酶、血小板反应蛋白1等裂解而活化。成熟的人TGF-β3与小鼠、狗、马有100%的同源性，与大鼠有99%的同源性。
goodTGF-β3能调控免疫反应及细胞增殖，介导上皮与间质细胞的转化。也有报道称TGF-β3参与软骨形成及肺部的发育等。TGF-β3还在颚裂愈合过程中的细胞粘附，细胞外基质形成等过程中发挥了重要作用。

产品内容d重复性好——板内，板间变异系数均小于10%。dd重复性好重复性好重复性好——————板内，板间变异系数均小于10%。板内，板间变异系数均小于10%。

产品简介产品简介产品简介产品简介
good本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法检测样品中人转化生长因子β3(TGF-β3)的浓度。人TGF-β3捕获抗体已经预包被于酶标板上，当加入样品或标准品时，其中的人TGF-β3会与捕获抗体结合，而其它游离成分则会通过洗涤被除去。接着，再加入生物素化的抗人TGF-β3抗体后，抗人TGF-β3抗体与人TGF-β3接合，形成夹心的免疫复合物，其它游离成分则通过洗涤被除去。随后加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的亲合素，生物素与亲合素特异性结合，这样亲合素上标记的HRP就与夹心的免疫复合物连接起来，而其它游离成分则通过洗涤被除去。最后加入显色剂，若样品中存在人TGF-β3，则会形成免疫复合物，其上连接的HRP会催化无色的显色剂氧化生成蓝色物质，而后加入终止液，最终产物呈黄色。通过酶标仪检测，读其450 nm处的OD值，人TGF-β3浓度与OD450值之间呈正比，通过检测标准品绘制标准曲线，对照未知样品中OD值，即可计算出样品中人TGF-β3的浓度。goodgood本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法检测样品中人转化生长因子β3(TGF-β3)的浓度。人TGF-β3捕获抗体已经预包被于酶标板上，当加入样品或标准品时，其中的人TGF-β3会与捕获抗体结合，而其它游离成分则会通过洗涤被除去。接着，再加入生物素化的抗人TGF-β3抗体后，抗人TGF-β3抗体与人TGF-β3接合，形成夹心的免疫复合物，其它游离成分则通过洗涤被除去。随后加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的亲合素，生物素与亲合素特异性结合，这样亲合素上标记的HRP就与夹心的免疫复合物连接起来，而其它游离成分则通过洗涤被除去。最后加入显色剂，若样品中存在人TGF-β3，则会形成免疫复合物，其上连接的HRP会催化无色的显色剂氧化生成蓝色物质，而后加入终止液，最终产物呈黄色。通过酶标仪检测，读其450 nm处的OD值，人TGF-β3浓度与OD450值之间呈正比，通过检测标准品绘制标准曲线，对照未知样品中OD值，即可计算出样品中人TGF-β3的浓度。本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法检测样品中人转化生长因子β3(TGF-β3)的浓度。人TGF-β3捕获抗体已经预包被于酶标板上，当加入样品或标准品时，其中的人TGF-β3会与捕获抗体结合，而其它游离成分则会通过洗涤被除去。接着，再加入生物素化的抗人TGF-β3抗体后，抗人TGF-β3抗体与人TGF-β3接合，形成夹心的免疫复合物，其它游离成分则通过洗涤被除去。随后加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的亲合素，生物素与亲合素特异性结合，这样亲合素上标记的HRP就与夹心的免疫复合物连接起来，而其它游离成分则通过洗涤被除去。最后加入显色剂，若样品中存在人TGF-β3，则会形成免疫复合物，其上连接的HRP会催化无色的显色剂氧化生成蓝色物质，而后加入终止液，最终产物呈黄色。通过酶标仪检测，读其450 nm处的OD值，人TGF-β3浓度与OD450值之间呈正比，通过检测标准品绘制标准曲线，对照未知样品中OD值，即可计算出样品中人TGF-β3的浓度。

背景简介背景简介背景简介背景简介
good转化生长因子β3(TGF-β3)隶属于TGF-β超家族，与该家族中其它成员有类似的结构和功能。成熟的人TGF-β3是含有112个氨基酸的多肽，通常与LAP以复合物的形式分泌，该复合物可由血纤维蛋白溶酶、基质金属蛋白酶、血小板反应蛋白1等裂解而活化。成熟的人TGF-β3与小鼠、狗、马有100%的同源性，与大鼠有99%的同源性。
goodTGF-β3能调控免疫反应及细胞增殖，介导上皮与间质细胞的转化。也有报道称TGF-β3参与软骨形成及肺部的发育等。TGF-β3还在颚裂愈合过程中的细胞粘附，细胞外基质形成等过程中发挥了重要作用。goodgood转化生长因子β3(TGF-β3)隶属于TGF-β超家族，与该家族中其它成员有类似的结构和功能。成熟的人TGF-β3是含有112个氨基酸的多肽，通常与LAP以复合物的形式分泌，该复合物可由血纤维蛋白溶酶、基质金属蛋白酶、血小板反应蛋白1等裂解而活化。成熟的人TGF-β3与小鼠、狗、马有100%的同源性，与大鼠有99%的同源性。转化生长因子β3(TGF-β3)隶属于TGF-β超家族，与该家族中其它成员有类似的结构和功能。成熟的人TGF-β3是含有112个氨基酸的多肽，通常与LAP以复合物的形式分泌，该复合物可由血纤维蛋白溶酶、基质金属蛋白酶、血小板反应蛋白1等裂解而活化。成熟的人TGF-β3与小鼠、狗、马有100%的同源性，与大鼠有99%的同源性。
goodgoodTGF-β3能调控免疫反应及细胞增殖，介导上皮与间质细胞的转化。也有报道称TGF-β3参与软骨形成及肺部的发育等。TGF-β3还在颚裂愈合过程中的细胞粘附，细胞外基质形成等过程中发挥了重要作用。TGF-β3能调控免疫反应及细胞增殖，介导上皮与间质细胞的转化。也有报道称TGF-β3参与软骨形成及肺部的发育等。TGF-β3还在颚裂愈合过程中的细胞粘附，细胞外基质形成等过程中发挥了重要作用。

产品内容产品内容产品内容产品内容

组分	体积或数量
人TGF-β3预包被板	12条
标准品稀释液(5×)	10mL
人TGF-β3标准品	≥2支(冻干)
人TGF-β3生物素化抗体	10mL
HRP标记的亲和素	10mL
浓缩洗涤液(20×)	30mL
显色剂TMB	10mL
终止液	5mL
HCl(1N)	3mL
NaOH(1.2N)	3mL
封板胶纸	3张

组分体积或数量人TGF-β3预包被板12条标准品稀释液(5×)10mL人TGF-β3标准品≥2支(冻干)人TGF-β3生物素化抗体10mLHRP标记的亲和素10mL浓缩洗涤液(20×)30mL显色剂TMB10mL终止液5mLHCl(1N)3mLNaOH(1.2N)3mL封板胶纸3张组分体积或数量组分组分组分组分组分组分组分组分组分组分体积或数量体积或数量体积或数量体积或数量体积或数量体积或数量体积或数量体积或数量体积或数量体积或数量体积或数量体积或数量人TGF-β3预包被板12条人TGF-β3预包被板人TGF-β3预包被板人TGF-β3预包被板人TGF-β3预包被板人TGF-β3预包被板人TGF-人TGF-人TGF-人人TGF-TGF-ββββ33333预包被板预包被板预包被板预包被板预包被板12条12条12条12条12条12条12条12条12条条标准品稀释液(5×)10mL标准品稀释液(5×)标准品稀释液(5×)标准品稀释液(5×)标准品稀释液(5×)标准品稀释液(5×)标准品稀释液标准品稀释液标准品稀释液标准品稀释液标准品稀释液(((((5555×××××)))))10mL10mL10mL10mL10mL111110000 mLmLmLmLmL人TGF-β3标准品≥2支(冻干)人TGF-β3标准品人TGF-β3标准品人TGF-β3标准品人TGF-β3标准品人TGF-β3标准品人人人人人TGF-TGF-TGF-TGF-ββββ33333标准品标准品标准品标准品标准品≥2支(冻干)≥2支(冻干)≥2支(冻干)≥2支(冻干)≥2支(冻干)≥≥≥≥≥2支2支2支2支支(((((冻干冻干冻干冻干冻干)))))人TGF-β3生物素化抗体10mL人TGF-β3生物素化抗体人TGF-β3生物素化抗体人TGF-β3生物素化抗体人TGF-β3生物素化抗体人TGF-β3生物素化抗体人人人人人TGF-TGF-TGF-TGF-ββββ33333生物素化抗体生物素化抗体生物素化抗体生物素化抗体生物素化抗体10mL10mL10mL10mL10mL11110000 mLmLmLmLmLHRP标记的亲和素10mLHRP标记的亲和素HRP标记的亲和素HRP标记的亲和素HRP标记的亲和素HRP标记的亲和素HRPHRPHRPHRP标记的标记的标记的标记的标记的亲和素亲和素亲和素亲和素亲和素10mL10mL10mL10mL10mL11110000 mLmLmLmLmL浓缩洗涤液(20×)30mL浓缩洗涤液(20×)浓缩洗涤液(20×)浓缩洗涤液(20×)浓缩洗涤液(20×)浓缩洗涤液(20×)浓缩洗涤液浓缩洗涤液浓缩洗涤液浓缩洗涤液浓缩洗涤液(((((20202020×××××)))))30mL30mL30mL30mL30mL33330000 mLmLmLmLmL显色剂TMB10mL显色剂TMB显色剂TMB显色剂TMB显色剂TMB显色剂TMB显色剂显色剂显色剂显色剂显色剂TMBTMBTMBTMB10mL10mL10mL10mL10mL11110000 mLmLmLmLmL终止液5mL终止液终止液终止液终止液终止液终终终终终止液止液止液止液止液5mL5mL5mL5mL5mL5555 mLmLmLmLmLHCl(1N)3mLHCl(1N)HCl(1N)HCl(1N)HCl(1N)HCl(1N)HClHClHClHClHCl(((((11111NNNNN)))))3mL3mL3mL3mL3mL33333 mLmLmLmLmLNaOH(1.2N)3mLNaOH(1.2N)NaOH(1.2N)NaOH(1.2N)NaOH(1.2N)NaOH(1.2N)NaOHNaOHNaOHNaOHNaOH(((((1.1.1.1.22222NNNNN)))))3mL3mL3mL3mL3mL33333 mLmLmLmLmL封板胶纸3张封板胶纸封板胶纸封板胶纸封板胶纸封板胶纸封板胶纸封板胶纸封板胶纸封板胶纸封板胶纸3张3张3张3张3张3张3张3张3张张
操作步骤操作步骤操作步骤操作步骤操作步骤操作步骤goodgoodgoodgood◆ ◆ ◆ ◆ ◆ ◆ ◆ 样品制备
good◆gg1. 根据样品种类选择相应的处理方法：
good◆ 样1. 根A. 细胞上清：将细胞培养上清液100~500×g离心5min，去除悬浮物后即可；
good◆ 样1. 根B. 血清样品：将全血在室温下静置0.5~2 h，待其自然凝固并析出血清后，离心取黄色上清即可(4℃，1,000~2,000×g，10min)，注意请勿吸取沉淀，制备好的血清需置于冰上待用，请勿在其中添加任何防腐剂或抗凝剂；
good◆ 样1. 根C. 血浆样品：使用EDTA对全血进行抗凝处理后，混合均匀置于冰上，离心取黄色上清即可(4℃，1,000~2,000×g，10min)，注意请勿吸取沉淀，制备好的血浆需置于冰上待用；样品制备样品制备样品制备
good◆gggood◆gg1. 根据样品种类选择相应的处理方法：根据样品种类选择相应的处理方法：根据样品种类选择相应的处理方法：
good◆ 样1. 根good◆ 样1. 根A. 细胞上清：将细胞培养上清液100~500×g离心5min，去除悬浮物后即可；细胞上清：将细胞培养上清液100~500×细胞上清：将细胞培养上清液100~500×gggg离心5离心5 min，去除悬浮物后即可；min，去除悬浮物后即可；
good◆ 样1. 根good◆ 样1. 根B. 血清样品：将全血在室温下静置0.5~2 h，待其自然凝固并析出血清后，离心取黄色上清即可(4℃，1,000~2,000×g，10min)，注意请勿吸取沉淀，制备好的血清需置于冰上待用，请勿在其中添加任何防腐剂或抗凝剂；血清样品：将全血在室温下静置0.5~2 h，待其自然凝固血清样品：将全血在室温下静置0.5~2 h，待其自然凝固并析出血清并析出血清并析出血清后，离心取黄色上清即可(4℃，1,000~2,000×后，离心取黄色上清即可(4℃，1,000~2,000×gggg，10，10 min)，注意请勿吸取沉淀，制备好的血清需置于冰上待用，请勿在其中添加任何防腐剂或抗凝剂；min)，注意请勿吸取沉淀，制备好的血清需置于冰上待用，请勿在其中添加任何防腐剂或抗凝剂；
good◆ 样1. 根good◆ 样1. 根C. 血浆样品：使用EDTA对全血进行抗凝处理后，混合均匀置于冰上，离心取黄色上清即可(4℃，1,000~2,000×g，10min)，注意请勿吸取沉淀，制备好的血浆需置于冰上待用；血浆样品：使用EDTA对全血进行抗凝处理后，混合均匀置于冰上，离心取黄色上清即可(4℃，1,000~2,000×血浆样品：使用EDTA对全血进行抗凝处理后，混合均匀置于冰上，离心取黄色上清即可(4℃，1,000~2,000×gggg，10，10 min)，注意请勿吸取沉淀，制备好的血浆需置于冰上待用；min)，注意请勿吸取沉淀，制备好的血浆需置于冰上待用；注意：① 人血清或血浆样品中因TGF-β3含量较高，需稀释后再进行检测；
注意：②若待测样品无法及时检测，样品制备完成后，请分装冻存于-20℃，避免反复冻融；
注意：③ 请保证待测样品清澈透明，检测前如发现样品中有悬浮物，需通过离心去除；
注意：④ 为了保证检测结果准确，请勿使用溶血、黄疸、高血脂或污染的样品。注意：① 人血清或血浆样品中因TGF-β3含量较高，需稀释后再进行检测；
注意：②若待测样品无法及时检测，样品制备完成后，请分装冻存于-20℃，避免反复冻融；
注意：③ 请保证待测样品清澈透明，检测前如发现样品中有悬浮物，需通过离心去除；
注意：④ 为了保证检测结果准确，请勿使用溶血、黄疸、高血脂或污染的样品。注意：① 人血清或血浆样品中因TGF-β3含量较高，需稀释后再进行检测；注意：① 人血清或血浆样品中因TGF-β3含量较高，需稀释后再进行检测；注意：① 人血清或血浆样品中因TGF-β3含量较高，需稀释后再进行检测；
注意：注意：注意：②②② 若待测样品无法及时检测，样品制备完成后，请分装冻存于-20℃，避免反复冻融；若待测样品无法及时检测，样品制备完成后，请分装冻存于-20℃，避免反复冻融；若待测样品无法及时检测，样品制备完成后，请分装冻存于-20℃，避免反复冻融；
注意：注意：注意：③ 请保证待测样品清澈透明，检测前如发现样品中有悬浮物，需通过离心去除；③ 请保证待测样品清澈透明，检测前如发现样品中有悬浮物，需通过离心去除；③ 请保证待测样品清澈透明，检测前如发现样品中有悬浮物，需通过离心去除；
注意：注意：注意：④ 为了保证检测结果准确，请勿使用溶血、黄疸、高血脂或污染的样品。④ 为了保证检测结果准确，请勿使用溶血、黄疸、高血脂或污染的样品。④ 为了保证检测结果准确，请勿使用溶血、黄疸、高血脂或污染的样品。
goodgoodgoodgood◆ ◆ ◆ ◆ ◆ ◆ ◆ 检测准备工作
good◆gg2. 试剂盒自冰箱取出后，请置于室温平衡20min；检测完成后，剩余试剂请及时置于4℃保存；
good◆gg3. 将浓缩洗涤液(20×)用双蒸水或去离子水稀释为1×洗涤液；
good◆gg4. 将标准品稀释液(5×)用双蒸水或去离子水稀释为1×标准品稀释液；
good◆gg5. 按标准品标签上注明的复溶体积，用1×标准品稀释液复溶使标准品终浓度达到2,000 pg/mL，室温操作，请严格控制在25~28℃，静置15~20min后轻轻混悬，用移液器吹打数次，使其彻底溶解，然后按下表用1×标准品稀释液倍比梯度稀释后依次加入检测孔中。(最高浓度为2,000 pg/mL，将1×标准品稀释液作为浓度0 pg/mL。)检测准备工作检测准备工作检测准备工作
good◆gggood◆gg2. 试剂盒自冰箱取出后，请置于室温平衡20min；检测完成后，剩余试剂请及时置于4℃保存；试剂盒自冰箱取出后，请置于室温平衡20试剂盒自冰箱取出后，请置于室温平衡20 min；检测完成后，剩余试剂请及时置于4℃保存；min；检测完成后，剩余试剂请及时置于4℃保存；
good◆gggood◆gg3. 将浓缩洗涤液(20×)用双蒸水或去离子水稀释为1×洗涤液；将将 浓缩洗涤液浓缩洗涤液浓缩洗涤液(((202020×××))) 用双蒸水或去离子水稀释为1×洗涤液；用双蒸水或去离子水稀释为1×洗涤液；
good◆gggood◆gg4. 将标准品稀释液(5×)用双蒸水或去离子水稀释为1×标准品稀释液；将将 标准品稀释液标准品稀释液标准品稀释液(((555×)×)×) 用双蒸水或去离子水稀释为1×标准品稀释液；用双蒸水或去离子水稀释为1×标准品稀释液；
good◆gggood◆gg5. 按标准品标签上注明的复溶体积，用1×标准品稀释液复溶使标准品终浓度达到2,000 pg/mL，室温操作，请严格控制在25~28℃，静置15~20min后轻轻混悬，用移液器吹打数次，使其彻底溶解，然后按下表用1×标准品稀释液倍比梯度稀释后依次加入检测孔中。(最高浓度为2,000 pg/mL，将1×标准品稀释液作为浓度0 pg/mL。)按标准品标签上注明的复溶体积，用1×标准品稀释液复溶使标准品终浓度达到2,000 pg/mL，室温操作，按标准品标签上注明的复溶体积，用1×标准品稀释液复溶使标准品终浓度达到2,000 pg/mL，室温操作，请严格控制在25~28℃请严格控制在25~28℃请严格控制在25~28℃，静置15~20，静置15~20 min后轻轻混悬，用移液器吹打数次，使其彻底溶解，然后按下表用1×标准品稀释液倍比梯度稀释后依次加入检测孔中。(最高浓度为2,000 pg/mL，将1×标准品稀释液作为浓度0 pg/mL。)min后轻轻混悬，用移液器吹打数次，使其彻底溶解，然后按下表用1×标准品稀释液倍比梯度稀释后依次加入检测孔中。(最高浓度为2,000 pg/mL，将1×标准品稀释液作为浓度0 pg/mL。)

管号	稀释液用量(μL)	复溶后标准品用量(μL)	标准品的最终浓度(pg/mL)
A	0	250	2,000
B	250	250	1,000
C	250	250(从B管中取)	500
D	250	250(从C管中取)	250
E	250	250(从D管中取)	125
F	250	250(从E管中取)	62.5
G	250	0	0

管号稀释液用量(μL)复溶后标准品用量(μL)标准品的最终浓度(pg/mL)A02502,000B2502501,000C250250(从B管中取)500D250250(从C管中取)250E250250(从D管中取)125F250250(从E管中取)62.5G25000管号稀释液用量(μL)复溶后标准品用量(μL)标准品的最终浓度(pg/mL)管号管号管号管号管号管号管号管号稀释液用量(μL)稀释液用量(μL)稀释液用量(μL)稀释液用量(稀释液用量(稀释液用量(稀释液用量稀释液用量(μLμLμLμL)))))复溶后标准品用量(μL)复溶后标准品用量(μL)复溶后标准品用量(μL)复溶后标准品用量(复溶后标准品用量(复溶后标准品用量(复溶后标准品用量复溶后标准品用量(μLμLμLμL)))))标准品的最终浓度(pg/mL)标准品的最终浓度(pg/mL)标准品的最终浓度(pg/mL)标准品的最终浓度(标准品的最终浓度(标准品的最终浓度(标准品的最终浓度标准品的最终浓度(pppppgggg/////mLmLmLmLmL)))))A02502,000AAAAAAAA000000002502502502502502502502502,0002,0002,0002,2,2,2,2,000000000000B2502501,000BBBBBBBB2502502502502502502502502502502502502502502502501,0001,0001,0001,0001,0001,0001,0001,000C250250(从B管中取)500CCCCCCCC250250250250250250250250250(从B管中取)250(从B管中取)250(从B管中取)2222555550000(((((从B管中取从B管中取从B管中取从从BB管中取管中取)))))500500500500500500500500D250250(从C管中取)250DDDDDDDD250250250250250250250250250(从C管中取)250(从C管中取)250(从C管中取)2222555550000(((((从从从从从CCCCC管中取管中取管中取管中取管中取)))))250250250250250250250250E250250(从D管中取)125EEEEEEEE250250250250250250250250250(从D管中取)250(从D管中取)250(从D管中取)2222555550000(((((从从从从从DDDDD管中取管中取管中取管中取管中取)))))125125125125125125125125F250250(从E管中取)62.5FFFFFFFF250250250250250250250250250(从E管中取)250(从E管中取)250(从E管中取)2222555550000(((((从从从从从EEEEE管中取管中取管中取管中取管中取)))))62.562.562.562.562.562.562.562.5G25000GGGGGGGG2502502502502502502502500000000000000000
注意：标准品复溶加样后，剩余部分请丢弃。注意：标准品复溶加样后，剩余部分请丢弃。注意：标准品复溶加样后，剩余部分请丢弃。注意：标准品复溶加样后，剩余部分请丢弃。注意：标准品复溶加样后，剩余部分请丢弃。注意：标准品复溶加样后，剩余部分请丢弃。
goodgoodgoodgood◆ 样品活化与稀释◆ 样品活化与稀释◆ ◆ ◆ ◆ ◆ 样品活化与稀释样品活化与稀释样品活化与稀释样品活化与稀释
good◆gg6. 样品中的TGF-β3大部分以无活性的复合物形式存在，检测前必须进行活化以释放有活性的TGF-β3蛋白。本试剂盒提供1N HCl对样品进行活化，以及1.2N NaOH来进行中和，具体步骤如下：
good◆ 样1. 根A. 细胞上清：取125μL样品置于全新的离心管或玻璃管中，加入25μL1N HCl，混匀，室温孵育10min进行活化，接着再加入25μL1.2N NaOH进行中和，为计算方便，可再加入825μL1×标准品稀释液使样品稀释至8倍，混匀。注意计算结果时应乘以稀释倍数；
good◆ 样1. 根B. 血清血浆样品：取40μL样品置于全新的离心管或玻璃管中，加入20μL1N HCl，混匀，室温孵育10min进行活化，接着再加入20μL1.2N NaOH进行中和。对于人的血清、血浆样本，建议从8倍开始稀释，即在中和后的溶液中加入240μL1×样本稀释液，混匀。注意结果计算时应乘以稀释倍数。如后续检测时样品中TGF-β3浓度过高，超过标准曲线最高点，请适度加大稀释倍数后重新检测；good◆gggood◆gg6. 样品中的TGF-β3大部分以无活性的复合物形式存在，检测前必须进行活化以释放有活性的TGF-β3蛋白。本试剂盒提供1N HCl对样品进行活化，以及1.2N NaOH来进行中和，具体步骤如下：样品样品样品样品中的TGF-β中的TGF-β中的中的TGF-βTGF-β3333大部分以无活性的复合物形式存在大部分以无活性的复合物形式存在大部分以无活性的复合物形式存在大部分以无活性的复合物形式存在，，，，检测前必须检测前必须检测前必须检测前必须进行进行进行进行活化以释放有活性的TGF-β活化以释放有活性的TGF-β活化以释放有活性的活化以释放有活性的TGF-βTGF-β3333蛋白。本试剂盒提供1蛋白。本试剂盒提供1蛋白。本试剂盒提供蛋白。本试剂盒提供1 N HClN HClN HCl对样品对样品对样品对样品进行活化，进行活化，进行活化，进行活化，以及以及以及以及1.21.21.2 N NaOH来N NaOH来N NaOH来来进行进行进行进行中和，中和，中和，中和，具体步骤如下：具体步骤如下：具体步骤如下：具体步骤如下：
good◆ 样1. 根good◆ 样1. 根A. 细胞上清：取125μL样品置于全新的离心管或玻璃管中，加入25μL1N HCl，混匀，室温孵育10min进行活化，接着再加入25μL1.2N NaOH进行中和，为计算方便，可再加入825μL1×标准品稀释液使样品稀释至8倍，混匀。注意计算结果时应乘以稀释倍数；细胞上清细胞上清细胞上清细胞上清：：：：取1取1取取125252525 μL样品μL样品μL样品样品置于置于置于置于全新的离心管或玻璃管全新的离心管或玻璃管全新的离心管或玻璃管全新的离心管或玻璃管中中中中，加入2，加入2，加入，加入225555 μLμLμL 111 N HCl，混匀，室温孵育10N HCl，混匀，室温孵育10N HCl，混匀，室温孵育，混匀，室温孵育110minminminmin进行活化进行活化进行活化进行活化，接着，接着，接着，接着再加入2再加入2再加入再加入225555 μLμLμL 1.21.21.2 N NaOH进行中和，为计算方便，N NaOH进行中和，为计算方便，N NaOH进行中和，为计算方便，进行中和，为计算方便，可再可再可再可再加入加入加入加入825825825825 μLμLμL 111××××标准品稀释液使样品稀释标准品稀释液使样品稀释标准品稀释液使样品稀释标准品稀释液使样品稀释至8至8至至88倍，混匀。注意计算结果时应乘以稀释倍数倍，混匀。注意计算结果时应乘以稀释倍数倍，混匀。注意计算结果时应乘以稀释倍数倍，混匀。注意计算结果时应乘以稀释倍数；；；；
good◆ 样1. 根good◆ 样1. 根B. 血清血浆样品：取40μL样品置于全新的离心管或玻璃管中，加入20μL1N HCl，混匀，室温孵育10min进行活化，接着再加入20μL1.2N NaOH进行中和。对于人的血清、血浆样本，建议从8倍开始稀释，即在中和后的溶液中加入240μL1×样本稀释液，混匀。注意结果计算时应乘以稀释倍数。如后续检测时样品中TGF-β3浓度过高，超过标准曲线最高点，请适度加大稀释倍数后重新检测；血清血浆样品血清血浆样血清血浆样血清血浆样品品品：：：：取取取取4444000 μL样品μL样品μL样品样品置于置于置于置于全新的离心管或玻璃管全新的离心管或玻璃管全新的离心管或玻璃管全新的离心管或玻璃管中，加入中，加入中，加入中，加入202020 μLμLμL 111 N HClN HClN HCl，混匀，室温孵育，混匀，室温孵育，混匀，室温孵育，混匀，室温孵育101010min进行活化，接着min进行活化，接着minmin进行活化，接着进行活化，接着再加入20再加入20再加入再加入220 μLμLμL 1.21.21.2 N NaOH进行中和N NaOH进行中和N NaOH进行中和进行中和。对于人的血清、血浆样本，建议从8倍开始稀释，即在中和后的溶液中加入24。对于人的血清、血浆样本，建议从8倍开始稀释，即在中和后的溶液中加入24。对于人的血清、血浆样本，建议从。对于人的血清、血浆样本，建议从88倍开始稀释，即在中和后的溶液中加入倍开始稀释，即在中和后的溶液中加入2424000 μLμLμL1111××××样本稀释液，混匀。注意结果计算时应乘以稀释倍数。如后续检测时样品中TGF样本稀释液，混匀。注意结果计算时应乘以稀释倍数。如后续检测时样品中TGF样本稀释液，混匀。注意结果计算时应乘以稀释倍数。如后续检测时样品中样本稀释液，混匀。注意结果计算时应乘以稀释倍数。如后续检测时样品中TGFTGF-β-β-β3浓度过高，超过标准曲线最高点，请适度加大稀释倍数后重新检测；3浓度过高，超过标准曲线最高点，请适度加大稀释倍数后重新检测；33浓度过高，超过标准曲线最高点，请适度加大稀释倍数后重新检测；浓度过高，超过标准曲线最高点，请适度加大稀释倍数后重新检测；注意：人TGF-β3标准品无需活化。注意：人TGF-β3标准品无需活化。注意注意注意注意注意：：：：：人人人人人TGF-βTGF-βTGF-βTGF-β33333标准品标准品标准品标准品标准品无无无无无需活化需活化需活化需活化需活化。。。。。
good◆ 检测流程
good◆gg7. 通过计算确定一次实验所需的板条数，取出所需板条放置于框架内，多余的板条请放回铝箔袋密封，保存于4℃；goodgoodgood◆ ◆ ◆ ◆ ◆ 检测流程
good◆gg7. 通过计算确定一次实验所需的板条数，取出所需板条放置于框架内，多余的板条请放回铝箔袋密封，保存于4℃；检测流程检测流程
good◆gggood◆gg7. 通过计算确定一次实验所需的板条数，取出所需板条放置于框架内，多余的板条请放回铝箔袋密封，保存于4℃；通过计算确定一次实验所需的板条数，取出所需板条放置于框架内，多余的板条请放回铝箔袋密封，保存于4℃；注意：① 请查阅相关文献确定样品中待检测蛋白的大致浓度，若其大于或小于本试剂盒的最高或最低标准品浓度，请将样品适当稀释或浓缩后再进行检测；
注意：②整个加样过程不宜超过10 min，否则可能会影响检测结果。
good◆gg8. 将不同浓度标准品以及活化中和并稀释后的样品(100μL/孔)分别加入相应孔中，用封板胶纸封住反应孔，室温孵育120min；
注意：① 请查阅相关文献确定样品中待检测蛋白的大致浓度，若其大于或小于本试剂盒的最高或最低标准品浓度，请将样品适当稀释或浓缩后再进行检测；
注意：②整个加样过程不宜超过10 min，否则可能会影响检测结果。
good◆gg9. 洗板5次，每孔1×洗涤液用量为300μL，注入与吸出间隔15~30s，洗完后将板倒扣在厚吸水纸上拍干；
注意：洗涤过程至关重要，洗涤不充分会导致结果产生较大误差。
good◆gg10. 加入人TGF-β3生物素化抗体(100μL/孔，无需稀释)。用封板胶纸封住反应孔，室温孵育60min；
注意：检测血清和血浆样品时，检测抗体的孵育时间应适当延长。
good◆gg11. 洗板5次，方法同步骤9；
good◆gg12. 加入HRP标记的亲和素(100μL/孔，无需稀释)。用封板胶纸封住反应孔，避光室温孵育20min；
good◆gg13. 洗板5次，方法同步骤9；
good◆gg14. 加入显色剂TMB(100μL/孔)，避光室温孵育10~20min；
注意：在保存和使用时，请勿将TMB接触氧化剂和金属。
good◆gg15. 加入终止液(50μL/孔)，混匀后即刻使用酶标仪测量OD450，同时设定540nm或570nm作为校正波长，即可计算得到校正吸光度值(OD450－OD540或OD450－OD570)；
注意：读取OD值建议在10 min内完成。注意：① 请查阅相关文献确定样品中待检测蛋白的大致浓度，若其大于或小于本试剂盒的最高或最低标准品浓度，请将样品适当稀释或浓缩后再进行检测；
注意：②整个加样过程不宜超过10 min，否则可能会影响检测结果。
good◆gg8. 将不同浓度标准品以及活化中和并稀释后的样品(100μL/孔)分别加入相应孔中，用封板胶纸封住反应孔，室温孵育120min；
注意：① 请查阅相关文献确定样品中待检测蛋白的大致浓度，若其大于或小于本试剂盒的最高或最低标准品浓度，请将样品适当稀释或浓缩后再进行检测；
注意：②整个加样过程不宜超过10 min，否则可能会影响检测结果。
good◆gg9. 洗板5次，每孔1×洗涤液用量为300μL，注入与吸出间隔15~30s，洗完后将板倒扣在厚吸水纸上拍干；
注意：洗涤过程至关重要，洗涤不充分会导致结果产生较大误差。
good◆gg10. 加入人TGF-β3生物素化抗体(100μL/孔，无需稀释)。用封板胶纸封住反应孔，室温孵育60min；
注意：检测血清和血浆样品时，检测抗体的孵育时间应适当延长。
good◆gg11. 洗板5次，方法同步骤9；
good◆gg12. 加入HRP标记的亲和素(100μL/孔，无需稀释)。用封板胶纸封住反应孔，避光室温孵育20min；
good◆gg13. 洗板5次，方法同步骤9；
good◆gg14. 加入显色剂TMB(100μL/孔)，避光室温孵育10~20min；
注意：在保存和使用时，请勿将TMB接触氧化剂和金属。
good◆gg15. 加入终止液(50μL/孔)，混匀后即刻使用酶标仪测量OD450，同时设定540nm或570nm作为校正波长，即可计算得到校正吸光度值(OD450－OD540或OD450－OD570)；
注意：读取OD值建议在10 min内完成。注意：① 请查阅相关文献确定样品中待检测蛋白的大致浓度，若其大于或小于本试剂盒的最高或最低标准品浓度，请将样品适当稀释或浓缩后再进行检测；注意：① 请查阅相关文献确定样品中待检测蛋白的大致浓度，若其大于或小于本试剂盒的最高或最低标准品浓度，请将样品适当稀释或浓缩后再进行检测；注意：① 请查阅相关文献确定样品中待检测蛋白的大致浓度，若其大于或小于本试剂盒的最高或最低标准品浓度，请将样品适当稀释或浓缩后再进行检测；
注意：注意：注意：②②② 整个加样过程不宜超过10 min，否则可能会影响检测结果。整个加样过程不宜超过10 min，否则可能会影响检测结果。整个加样过程不宜超过10 min，否则可能会影响检测结果。
good◆gggood◆gg8. 将不同浓度标准品以及活化中和并稀释后的样品(100将不同浓度标准品以及活化中和并稀释后的样品(100将不同浓度标准品以及活化中和并稀释后的样品(100μLμLμL///孔)分别加入相应孔中，用封板胶纸封住反应孔，室温孵育120孔)分别加入相应孔中，用封板胶纸封住反应孔，室温孵育120孔)分别加入相应孔中，用封板胶纸封住反应孔，室温孵育120min；min；min；
注意：① 请查阅相关文献确定样品中待检测蛋白的大致浓度，若其大于或小于本试剂盒的最高或最低标准品浓度，请将样品适当稀释或浓缩后再进行检测；注意：① 请查阅相关文献确定样品中待检测蛋白的大致浓度，若其大于或小于本试剂盒的最高或最低标准品浓度，请将样品适当稀释或浓缩后再进行检测；注意：① 请查阅相关文献确定样品中待检测蛋白的大致浓度，若其大于或小于本试剂盒的最高或最低标准品浓度，请将样品适当稀释或浓缩后再进行检测；
注意：注意：注意：②②② 整个加样过程不宜超过10 min，否则可能会影响检测结果。整个加样过程不宜超过10 min，否则可能会影响检测结果。整个加样过程不宜超过10 min，否则可能会影响检测结果。
good◆gggood◆gg9. 洗板5次，每孔洗板5次，每孔洗板5次，每孔1×1×1×洗涤液洗涤液洗涤液用量用量用量为30为30为30000μL，注入与吸出间隔15μL，注入与吸出间隔15μL，注入与吸出间隔15~~~333000s，洗完后s，洗完后s，洗完后将板倒扣在厚吸水纸上拍干将板倒扣在厚吸水纸上拍干将板倒扣在厚吸水纸上拍干；；；
注意：洗涤过程至关重要，洗涤不充分会导致结果产生较大误差。注意：洗涤过程至关重要，洗涤不充分会导致结果产生较大误差。注意：洗涤过程至关重要，洗涤不充分会导致结果产生较大误差。
good◆gggood◆gg10. 加入加入加入人人人TGF-βTGF-βTGF-β333生物素化抗体生物素化抗体生物素化抗体(((101010000μLμLμL///孔孔孔，无需稀释)，无需稀释)，无需稀释)。用封板胶纸封住反应孔，室温孵育6。用封板胶纸封住反应孔，室温孵育6。用封板胶纸封住反应孔，室温孵育6000min；min；min；
注意：检测血清和血浆样品时，检测抗体的孵育时间应适当延长。注意：检测血清和血浆样品时，检测抗体的孵育时间应适当延长。注意：检测血清和血浆样品时，检测抗体的孵育时间应适当延长。
good◆gggood◆gg11. 洗板5次，洗板5次，洗板5次，方法同步骤9；方法同步骤9；方法同步骤9；
good◆gggood◆gg12. 加入加入加入HRPHRPHRP标记的标记的标记的亲和素亲和素亲和素(((101010000μLμLμL///孔孔孔，无需稀释)，无需稀释)，无需稀释)。用封板胶纸封住反应孔，避光室温孵育2。用封板胶纸封住反应孔，避光室温孵育2。用封板胶纸封住反应孔，避光室温孵育2000min；min；min；
good◆gggood◆gg13. 洗板5次，洗板5次，洗板5次，方法同步骤9；方法同步骤9；方法同步骤9；
good◆gggood◆gg14. 加入加入加入显色剂TMB显色剂TMB显色剂TMB(((101010000μLμLμL///孔孔孔)))，避光室温孵育，避光室温孵育，避光室温孵育10~10~10~222000min；min；min；
注意：在保存和使用时，请勿将TMB接触氧化剂和金属。注意：在保存和使用时，请勿将TMB接触氧化剂和金属。注意：在保存和使用时，请勿将TMB接触氧化剂和金属。
good◆gggood◆gg15. 加入加入加入终止液终止液终止液(50(50(50μLμLμL///孔孔孔)，)，)，混匀后即刻混匀后即刻混匀后即刻使用酶标仪使用酶标仪使用酶标仪测量OD450测量OD450测量OD450，同时设定540，同时设定540，同时设定540nm或570nm或570nm或570nm作为校正波长，即可计算得到校正吸光度值(ODnm作为校正波长，即可计算得到校正吸光度值(ODnm作为校正波长，即可计算得到校正吸光度值(OD450450450－－－OD540OD540OD540或或或ODODOD450450450－OD570)；－OD570)；－OD570)；
注意：读取OD值建议在10 min内完成。注意：读取OD值建议在10 min内完成。注意：读取OD值建议在10 min内完成。
good◆ 数据分析
good◆gg16. 绘制标准曲线。以标准品浓度作横坐标，OD值作纵坐标，利用计算机软件作四参数逻辑(4-PL)曲线拟合创建标准曲线，通过样品的OD值即可在标准曲线上计算出其相应浓度。goodgoodgood◆ 数据分析◆ ◆ ◆ ◆ 数据分析数据分析数据分析
good◆gg16. 绘制标准曲线。以标准品浓度作横坐标，OD值作纵坐标，利用计算机软件作四参数逻辑(4-PL)曲线拟合创建标准曲线，通过样品的OD值即可在标准曲线上计算出其相应浓度。good◆gggood◆gg16. 绘制标准曲线。以标准品浓度作横坐标，OD值作纵坐标，利用计算机软件作四参数逻辑(4-PL)曲线拟合创建标准曲线，通过样品的OD值即可在标准曲线上计算出其相应浓度。绘制标准曲线。以标准品浓度作横坐标，OD值作纵坐标，利用计算机软件作四参数逻辑(4-PL)曲线拟合创建标准曲线，通过样品的OD值即可在标准曲线上计算出其相应浓度。注意：①复孔OD值在20%的差异范围内结果才有效，复孔OD值取平均后可作为测量值；
注意：② 每个标准品或样品的OD值应减去本底校正孔的OD值；
注意：③ 若样品OD值高于标准曲线上限，应适当稀释后重测，计算浓度时应乘以稀释倍数。注意：①复孔OD值在20%的差异范围内结果才有效，复孔OD值取平均后可作为测量值；
注意：② 每个标准品或样品的OD值应减去本底校正孔的OD值；
注意：③ 若样品OD值高于标准曲线上限，应适当稀释后重测，计算浓度时应乘以稀释倍数。注意：①注意：①注意：① 复孔OD值在20%的差异范围内结果才有效，复孔OD值取平均后可作为测量值；复孔OD值在20%的差异范围内结果才有效，复孔OD值取平均后可作为测量值；复孔OD值在20%的差异范围内结果才有效，复孔OD值取平均后可作为测量值；
注意：注意：注意：② 每个标准品或样品的OD值应减去本底校正孔的OD值；② 每个标准品或样品的OD值应减去本底校正孔的OD值；② 每个标准品或样品的OD值应减去本底校正孔的OD值；
注意：注意：注意：③ 若样品OD值高于标准曲线上限，应适当稀释后重测，计算浓度时应乘以稀释倍数。③ 若样品OD值高于标准曲线上限，应适当稀释后重测，计算浓度时应乘以稀释倍数。③ 若样品OD值高于标准曲线上限，应适当稀释后重测，计算浓度时应乘以稀释倍数。
good◆ goodgoodgood◆ ◆ ◆ ◆ ◆ 标准曲线范例标准曲线范例标准曲线范例标准曲线范例人转化生长因子β3参考标准曲线人转化生长因子β3参考标准曲线人转化生长因子β3参考标准曲线人转化生长因子β3参考标准曲线人转化生长因子β3参考标准曲线

注意事项注意事项注意事项注意事项注意事项good1. 浓缩洗涤液低温情况下可能会出现结晶，请水浴加热使结晶完全溶解后再配制工作液；good1. 浓缩洗涤液低温情况下可能会出现结晶，请水浴加热使结晶完全溶解后再配制工作液；goodgood1. 1. 1. 浓缩洗涤液浓缩洗涤液浓缩洗涤液浓缩洗涤液 低温情况下可能会出现结晶，请水浴加热使结晶完全溶解后再配制工作液；低温情况下可能会出现结晶，请水浴加热使结晶完全溶解后再配制工作液；低温情况下可能会出现结晶，请水浴加热使结晶完全溶解后再配制工作液；good2. 严禁混用不同批号试剂盒的组分；good2. 严禁混用不同批号试剂盒的组分；goodgood2. 2. 2. 严禁混用不同批号试剂盒的组分；严禁混用不同批号试剂盒的组分；严禁混用不同批号试剂盒的组分；good3. 加样过程请避免产生气泡，实验操作过程中一定要保证试剂充分混匀，否则会使结果产生较大误差；good3. 加样过程请避免产生气泡，实验操作过程中一定要保证试剂充分混匀，否则会使结果产生较大误差；goodgood3. 3. 3. 加样过程请避免产生气泡，实验操作过程中一定要保证试剂充分混匀，否则会使结果产生较大误差；加样过程请避免产生气泡，实验操作过程中一定要保证试剂充分混匀，否则会使结果产生较大误差；加样过程请避免产生气泡，实验操作过程中一定要保证试剂充分混匀，否则会使结果产生较大误差；good4. 说明书中提到的室温条件，请严格控制在25~28℃；good4. 说明书中提到的室温条件，请严格控制在25~28℃；goodgood4. 4. 4. 说明书中提到的室温条件，请严格控制在25~28℃；说明书中提到的说明书中提到的室温条件，请严格控制在25~28℃；；good5. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作；
good6. 本产品仅限科研使用。good5. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作；
good6. goodgood5. 5. 5. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作；为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作；为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作；
goodgood6. 6. 6. 本产品仅限科研使用。本产品仅限科研使用。