Azure B（天青Ⅰ、天青B）Azure B（天青Ⅰ、天青B）Azure BAzure BAzure B（天青Ⅰ、天青B）（天青Ⅰ、天青B）（天青Ⅰ、天青B）
产品名称： 天青B产品名称： 天青B

英文名称：Azure B

英文名称：Azure B

产品及特点： 有绿色光泽的深棕色结晶。系亚甲蓝氧化而成的各种混合物,主要是天青A和B。在水溶液中呈蓝色,微溶于乙醇显红棕色荧光。可用作血液染色剂中的重要成分，尤其是 Lillie 改良的姬姆萨染色剂 。

产品及特点： 有绿色光泽的深棕色结晶。系亚甲蓝氧化而成的各种混合物,主要是天青A和B。在水溶液中呈蓝色,微溶于乙醇显红棕色荧光。可用作血液染色剂中的重要成分，尤其是 Lillie 改良的姬姆萨染色剂 。

成分及包装： 塑料瓶内包装，热封袋外包装，无使用手册。

成分及包装： 塑料瓶内包装，热封袋外包装，无使用手册。

运输及保存： 常温运输和密封保存，有效期2年。

运输及保存： 常温运输和密封保存，有效期2年。Azure B（天青Ⅰ、天青B）实验步骤Azure B（天青Ⅰ、天青B）实验步骤Azure BAzure BAzure B（天青Ⅰ、天青B）（天青Ⅰ、天青B）（天青Ⅰ、天青B）实验步骤实验步骤实验步骤 
1. 石蜡切片置于67℃烘箱中，烘片2小时，脱蜡至水，用pH7.4的PBS冲洗三次，每次3分钟（3×3’）。1. 石蜡切片置于67℃烘箱中，烘片2小时，脱蜡至水，用pH7.4的PBS冲洗三次，每次3分钟（3×3’）。1. 石蜡切片置于石蜡切片置于67℃烘箱中，烘片℃烘箱中，烘片2小时，脱蜡至水，用小时，脱蜡至水，用pH7.4的的PBS冲洗三次，每次冲洗三次，每次3分钟（分钟（3××3’）。’）。
2. 取一定量pH=6.0柠檬酸盐缓冲液，加入微波盒中，微波加热至沸腾，将脱蜡水化后的组织切片置于耐高温塑料切片架上，放入已沸腾的缓冲液中，中档微波处理10分钟，取出微波盒流水自然泠却，从缓冲液中取出玻片，先用蒸馏水冲洗两次，之后用PBS冲洗2×3’。（注：不是所有的抗体都需要微波修复的，视具体情况而定）2. 取一定量pH=6.0柠檬酸盐缓冲液，加入微波盒中，微波加热至沸腾，将脱蜡水化后的组织切片置于耐高温塑料切片架上，放入已沸腾的缓冲液中，中档微波处理10分钟，取出微波盒流水自然泠却，从缓冲液中取出玻片，先用蒸馏水冲洗两次，之后用PBS冲洗2×3’。（注：不是所有的抗体都需要微波修复的，视具体情况而定）2. 取一定量取一定量pH=6.0柠檬酸盐缓冲液，加入微波盒中，微波加热至沸腾，将脱蜡水化后的组织切片置于耐高温塑料切片架上，放入已沸腾的缓冲液中，中档微波处理柠檬酸盐缓冲液，加入微波盒中，微波加热至沸腾，将脱蜡水化后的组织切片置于耐高温塑料切片架上，放入已沸腾的缓冲液中，中档微波处理10分钟，取出微波盒流水自然泠却，从缓冲液中取出玻片，先用蒸馏水冲洗两次，之后用分钟，取出微波盒流水自然泠却，从缓冲液中取出玻片，先用蒸馏水冲洗两次，之后用PBS冲洗冲洗2××3’。（注：不是所有的抗体都需要微波修复的，视具体情况而定）’。（注：不是所有的抗体都需要微波修复的，视具体情况而定）
3. 每张切片加1滴3%H2O2，室温下孵育10分钟，以阻断内源性过氧化物酶的活性。PBS冲洗3×3’。3. 每张切片加1滴3%H2O2，室温下孵育10分钟，以阻断内源性过氧化物酶的活性。PBS冲洗3×3’。3. 每张切片加每张切片加1滴滴3%H2O2，室温下孵育，室温下孵育10分钟，以阻断内源性过氧化物酶的活性。分钟，以阻断内源性过氧化物酶的活性。PBS冲洗冲洗3××3’。’。
4. 除去PBS液，每张切片加1滴相应的第一抗体（相应稀释倍数），室温下孵育2小时。4. 除去PBS液，每张切片加1滴相应的第一抗体（相应稀释倍数），室温下孵育2小时。4. 除去除去PBS液，每张切片加液，每张切片加1滴相应的第一抗体（相应稀释倍数），室温下孵育滴相应的第一抗体（相应稀释倍数），室温下孵育2小时。小时。
5. PBS冲洗3×5’。除去PBS液，每张切片加1滴聚合物增强剂，室温下孵育20分钟。PBS冲洗3×3’。5. PBS冲洗3×5’。除去PBS液，每张切片加1滴聚合物增强剂，室温下孵育20分钟。PBS冲洗3×3’。5. PBS冲洗冲洗3××5’。除去’。除去PBS液，每张切片加液，每张切片加1滴聚合物增强剂，室温下孵育滴聚合物增强剂，室温下孵育20分钟。分钟。PBS冲洗冲洗3××3’。’。
6. 除去PBS液，每张切片加1滴酶标抗鼠/兔聚合物，室温下孵育30分钟。PBS冲洗3×5’。6. 除去PBS液，每张切片加1滴酶标抗鼠/兔聚合物，室温下孵育30分钟。PBS冲洗3×5’。6. 除去除去PBS液，每张切片加液，每张切片加1滴酶标抗鼠滴酶标抗鼠/兔聚合物，室温下孵育兔聚合物，室温下孵育30分钟。分钟。PBS冲洗冲洗3××5’。’。
7. 除去PBS液，每张切片加1滴新鲜配制的DAB液（二氨基联苯胺），显微镜下观察5分钟。7. 除去PBS液，每张切片加1滴新鲜配制的DAB液（二氨基联苯胺），显微镜下观察5分钟。7. 除去除去PBS液，每张切片加液，每张切片加1滴新鲜配制的滴新鲜配制的DAB液（二氨基联苯胺），显微镜下观察液（二氨基联苯胺），显微镜下观察5分钟。分钟。
8. 苏木素复染，0.1%HCl分化，自来水冲洗，蓝化，切片经梯度酒精脱水干燥，二甲苯透明，中性树胶封固，晾干后观察。8. 苏木素复染，0.1%HCl分化，自来水冲洗，蓝化，切片经梯度酒精脱水干燥，二甲苯透明，中性树胶封固，晾干后观察。8. 苏木素复染，苏木素复染，0.1%HCl分化，自来水冲洗，蓝化，切片经梯度酒精脱水干燥，二甲苯透明，中性树胶封固，晾干后观察。分化，自来水冲洗，蓝化，切片经梯度酒精脱水干燥，二甲苯透明，中性树胶封固，晾干后观察。
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一、Azure B（天青Ⅰ、天青B）特点一、Azure B（天青Ⅰ、天青B）特点一、一、Azure BAzure BAzure B（天青Ⅰ、天青B）（天青Ⅰ、天青B）（天青Ⅰ、天青B）特点特点特点
1. 在切片加上一抗后，第二抗体标记多聚螯合物酶（HRP）的复合物与一抗结合，在多聚螯合物上有大量的HRP分子，使抗原信号有显著的放大，其敏感性较SABC、SP法高。1. 在切片加上一抗后，第二抗体标记多聚螯合物酶（HRP）的复合物与一抗结合，在多聚螯合物上有大量的HRP分子，使抗原信号有显著的放大，其敏感性较SABC、SP法高。1. 在切片加上一抗后，第二抗体标记多聚螯合物酶（在切片加上一抗后，第二抗体标记多聚螯合物酶（HRP）的复合物与一抗结合，在多聚螯合物上有大量的）的复合物与一抗结合，在多聚螯合物上有大量的HRP分子，使抗原信号有显著的放大，其敏感性较分子，使抗原信号有显著的放大，其敏感性较SABC、、SP法高。法高。
2. 由于多聚物在体内不存在，又不使用生物素，从而避免了由于生物素引起的非特异性背景染色，背景比SABC、SP法清晰。2. 由于多聚物在体内不存在，又不使用生物素，从而避免了由于生物素引起的非特异性背景染色，背景比SABC、SP法清晰。2. 由于多聚物在体内不存在，又不使用生物素，从而避免了由于生物素引起的非特异性背景染色，背景比由于多聚物在体内不存在，又不使用生物素，从而避免了由于生物素引起的非特异性背景染色，背景比SABC、、SP法清晰。法清晰。