还原型谷胱甘肽测定试剂盒(微板法)规格

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2021-02-23 22:00

上海研生实业有限公司

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王经理
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产品属性
数量26
英文名Reduced glutathione (GSH) assay kit
CAS号详见说明书
保质期详见说明书
供应商上海研生
保存条件低温冷藏
规格详见说明书
产品说明
中文名称:还原型谷胱甘肽测定试剂盒(微板法)规格
英文名称:Reduced glutathione (GSH) assay kit
产品规格:96T
发货周期:1~3天
发货周期:1~3天

检测指标:还原型谷胱甘肽;GSH
本试剂盒可测动物血清、血浆、组织以及全血、红细胞、培养细胞、培养液中的谷胱甘肽(GSH)的含量。谷胱甘肽(GSH)是一种低分子清除剂,它可清除O2-、H2O2、LOOH。谷胱甘肽是谷氨酸、甘氨酸和半胱氨酸组成的一种三肽,是组织中主要的非蛋白质的巯基化合物,并且是GSH—PX和GST两种酶类的底物,为这二种酶分解氢过氧化物所必需,它并且能稳定含巯基的酶和防止血红蛋白及其它辅因子受氧化损伤,最近还证明GSH也参与使维生素E恢复到还原态的作用,缺乏或耗竭GSH会促使许多化学物质或环境因素产生中毒作用或加重其中毒作用,这可能与增加氧化损伤有关,因而GSH的量的多少是衡量机体抗氧化能力大小的重要因素。
产品优点如下:
1、操作简便:全程约20分钟,可测96例左右样本。
2、稳定性好:试剂盒2~8℃至少存放6个月;呈色稳定,显色后1小时吸光度不变。
6、测试面广:可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产等,效果均佳。
3、再现性好:批内CV=1.3%,批间CV=4.36%。
4、回收试验: X =99.5%。
5、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。
6、测试面广:可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产等,效果均佳。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
培养操作步骤:
1.还原型谷胱甘肽测定试剂盒(微板法)规格用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布; 
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片); 
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时; 
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中; 
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。 
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MG7Ag高车前素
monocyte chemotactic protein 5D-(-)-奎宁酸
monocyte chemotactic protein 3去氧基醉椒素
Monocyte chemotactic protein 1丹酚酸C
Herpes simplex virus 23,7-O-二咖啡酰奎宁酸
monoamine oxidaseβ-蜕皮激素
Big Endothelin酰哈巴苷
注意事项:
尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响,但为取得良好的使用效果,3-6个月内推荐4℃保存,并适当注意避免反复冻融。
如果有细菌或真菌污染,会严重影响检测效果。
染色后宜尽快检测,时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
如果细胞收集过程中使用了胰酶,需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC,导致染色失败。
荧光物质均易发生淬灭,在进行荧光观察时,尽量缩短观察时间,同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
用于流式细胞仪检测时,如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞,并且通过调整相关设置和参数也无法改善,可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测,这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
需自备PBS。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。