诺氏疟原虫探针法荧光定量PCR试剂盒
Plasmodium knowlesi
产品及特点
1.即开即用,用户只需要提供样品DNA模板。
2.引物和探针经过优化,灵敏性高。
3.提供阳性对照,便于区分假阴性样品。
4.特异性高,引物是根据非洲猪瘟病毒高度保守区设计,不会跟其他病毒的DNA发生交叉反应。
5.本产品足够50次20μL体系的探针法荧光定量PCR反应。
本产品只能用于科研。诺氏疟原虫探针法荧光定量PCR试剂盒
Plasmodium knowlesi
产品及特点
1.即开即用,用户只需要提供样品DNA模板。
2.引物和探针经过优化,灵敏性高。
3.提供阳性对照,便于区分假阴性样品。
4.特异性高,引物是根据非洲猪瘟病毒高度保守区设计,不会跟其他病毒的DNA发生交叉反应。
5.本产品足够50次20μL体系的探针法荧光定量PCR反应。
本产品只能用于科研。诺氏疟原虫探针法荧光定量PCR试剂盒诺氏疟原虫探针法荧光定量PCR试剂盒诺氏疟原虫探针法荧光定量PCR试剂盒诺氏疟原虫探针法荧光定量PCR试剂盒诺氏疟原虫探针法荧光定量诺氏疟原虫探针法荧光定量PCR试剂盒
Plasmodium knowlesiPlasmodium knowlesiPlasmodium knowlesiPlasmodium knowlesiPlasmodium knowlesi
产品及特点产品及特点产品及特点产品及特点产品及特点产品及特点
1.即开即用,用户只需要提供样品1.即开即用,用户只需要提供样品1.即开即用,用户只需要提供样品
DNADNADNA
模板。模板。模板。模板。
2.引物和探针经过优化,灵敏性高。2.引物和探针经过优化,灵敏性高。2.引物和探针经过优化,灵敏性高。
3.提供阳性对照,便于区分假阴性样品。3.提供阳性对照,便于区分假阴性样品。3.提供阳性对照,便于区分假阴性样品。
4.特异性高,引物是根据非洲猪瘟病毒高度保守区设计,不会跟其他病毒的4.特异性高,引物是根据非洲猪瘟病毒高度保守区设计,不会跟其他病毒的4.特异性高,引物是根据非洲猪瘟病毒高度保守区设计,不会跟其他病毒的
DNADNADNA
发生交叉反应。发生交叉反应。发生交叉反应。发生交叉反应。
5.本产品足够5.本产品足够5.本产品足够
505050
次次次次
202020
μμμ
LLL
体系的探针法荧光定量体系的探针法荧光定量体系的探针法荧光定量体系的探针法荧光定量
PCRPCRPCR
反应。反应。反应。反应。
本产品只能用于科研。本产品只能用于科研。本产品只能用于科研。本产品只能用于科研。
规格及成分规格及成分规格及成分规格及成分规格及成分规格及成分规格及成分规格及成分
| 编号 | 成分 | 规格 |
| 试剂一 | 2×Probe qPCR MagicMix | 0.5 mL(本色盖) |
| 试剂二 | 荧光PCR专用模板稀释液 | 1 mL(黄盖) |
| 试剂三 | 诺氏疟原虫PCR引物 | 100 μL(白盖) |
| 试剂四 | 诺氏疟原虫qPCR探针 | 100 μL(棕色管) |
| 试剂五 | 诺氏疟原虫阳性对照2.0 (1×10E8拷贝/μL) | 50 μL(红盖) |
| 试剂六 | 核酸释释剂试用装 | 50次(2.5mL) |
| 使用手册 | 1 份 |
| 编号 | 成分 | 规格 |
| 试剂一 | 2×Probe qPCR MagicMix | 0.5 mL(本色盖) |
| 试剂二 | 荧光PCR专用模板稀释液 | 1 mL(黄盖) |
| 试剂三 | 诺氏疟原虫PCR引物 | 100 μL(白盖) |
| 试剂四 | 诺氏疟原虫qPCR探针 | 100 μL(棕色管) |
| 试剂五 | 诺氏疟原虫阳性对照2.0 (1×10E8拷贝/μL) | 50 μL(红盖) |
| 试剂六 | 核酸释释剂试用装 | 50次(2.5mL) |
| 使用手册 | 1 份 |
| 编号 | 成分 | 规格 |
编号 | 编号编号编号编号编号编号编号
成分 | 成分成分成分成分成分成分成分
规格 | 规格规格规格规格规格规格规格
| 试剂一 | 2×Probe qPCR MagicMix | 0.5 mL(本色盖) |
试剂一 | 试剂一试剂一试剂一试剂一试剂一
2×Probe qPCR MagicMix | 2×Probe qPCR MagicMix2×Probe qPCR MagicMix2×Probe qPCR MagicMix2×Probe qPCR MagicMix2×Probe qPCR MagicMix
0.5 mL(本色盖) | 0.5 mL(本色盖)0.5 mL(本色盖)0.5 mL(本色盖)0.5 mL(本色盖)0.5 mL(本色盖)
| 试剂二 | 荧光PCR专用模板稀释液 | 1 mL(黄盖) |
试剂二 | 试剂二试剂二试剂二试剂二试剂二
荧光PCR专用模板稀释液 | 荧光PCR专用模板稀释液荧光PCR专用模板稀释液荧光PCR专用模板稀释液荧光PCR专用模板稀释液荧光PCR专用模板稀释液
1 mL(黄盖) | 1 mL(黄盖)1 mL(黄盖)1 mL(黄盖)1 mL(黄盖)1 mL(黄盖)
| 试剂三 | 诺氏疟原虫PCR引物 | 100 μL(白盖) |
试剂三 | 试剂三试剂三试剂三试剂三试剂三
诺氏疟原虫PCR引物 | 诺氏疟原虫PCR引物诺氏疟原虫PCR引物诺氏疟原虫PCR诺氏疟原虫PCR诺氏疟原虫
PCRPCR
引物引物引物
100 μL(白盖) | 100 μL(白盖)100 μL(白盖)100 μL(白盖)100 μL(白盖)100 μL(白盖)
| 试剂四 | 诺氏疟原虫qPCR探针 | 100 μL(棕色管) |
试剂四 | 试剂四试剂四试剂四试剂四试剂四
诺氏疟原虫qPCR探针 | 诺氏疟原虫qPCR探针诺氏疟原虫qPCR探针诺氏疟原虫qPCR诺氏疟原虫qPCR诺氏疟原虫
qPCRqPCR
探针探针探针
100 μL(棕色管) | 100 μL(棕色管)100 μL(棕色管)100 μL(棕色管)100 μL(棕色管)100 μL(棕色管)
| 试剂五 | 诺氏疟原虫阳性对照2.0 (1×10E8拷贝/μL) | 50 μL(红盖) |
试剂五 | 试剂五试剂五试剂五试剂五试剂五
诺氏疟原虫阳性对照2.0 (1×10E8拷贝/μL) | 诺氏疟原虫阳性对照2.0
(1×10E8拷贝/μL)诺氏疟原虫阳性对照2.0
(1×10E8拷贝/μL)诺氏疟原虫阳性对照2.0诺氏疟原虫阳性对照2.0诺氏疟原虫阳性对照
2.02.0
(1×10E8(1×10E8(1×10E8
拷贝拷贝拷贝
/μL)/μL)/μL)
50 μL(红盖) | 50 μL(红盖)50 μL(红盖)50 μL(红盖)50 μL(红盖)50 μL(红盖)
| 试剂六 | 核酸释释剂试用装 | 50次(2.5mL) |
试剂六 | 试剂六试剂六试剂六试剂六试剂六
核酸释释剂试用装 | 核酸释释剂试用装核酸释释剂试用装核酸释释剂试用装核酸释释剂试用装核酸释释剂试用装
50次(2.5mL) | 50次(2.5mL)50次(2.5mL)50次(2.5mL)50次(2.5mL)50次(2.5mL)
| 使用手册 | 1 份 |
| 使用手册 | 使用手册使用手册使用手册使用手册使用手册
1 份 | 1 份1 份1 份1 份1 份
运输及保存:低温运输,-20℃保存,保存期限为12个月。
自备试剂:样品DNA。
使用方法一、稀释标准曲线样品(以10E2-10E7拷贝/μL这6个10倍稀释度为例)。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供无传染性的DNA片段作为阳性对照。
1.标记6个离心管,分别为7,6,5,4,3,2。
2.用带芯枪头分别加入45 μL荧光PCR专用模板稀释液,最好用带芯枪头,下同)。
3.在7号管中加入5 μL 1×10E8拷贝/μL 的阳性对照(试剂盒提供),充分震荡1分钟,得1×10E7拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
4.换枪头,在6号管中加入5 μL 1×10E7拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得1×10E6拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
5.换枪头,在5号管中加入5 μL 1×10E6拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得1×10E5拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
6.重复上面的操作直到得到6个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
二、样品DNA的制备
7.如果有N个样品,最好设置N+2个提取,多出的一个是PC(样品制备阳性对照),一个是NC(样品制备阴性对照)。可以用10μL阳性对照的10000倍稀释液再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样,以此作为PC。另外用水作为NC。
8.用自选方法纯化样品的DNA,本试剂盒跟市场上大多数病毒DNA提取试剂盒兼容。也可以选购本公司的柱式病毒DNAout。本试剂盒免费赠送50次免DNA提取的核酸释放剂试用装,该释放剂的裂解液可以直接作为PCR模板,省略了DNA提取步骤。运输及保存:低温运输,-20℃保存,保存期限为12个月。
自备试剂:样品DNA。
使用方法一、稀释标准曲线样品(以10E2-10E7拷贝/μL这6个10倍稀释度为例)。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供无传染性的DNA片段作为阳性对照。
1.标记6个离心管,分别为7,6,5,4,3,2。
2.用带芯枪头分别加入45 μL荧光PCR专用模板稀释液,最好用带芯枪头,下同)。
3.在7号管中加入5 μL 1×10E8拷贝/μL 的阳性对照(试剂盒提供),充分震荡1分钟,得1×10E7拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
4.换枪头,在6号管中加入5 μL 1×10E7拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得1×10E6拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
5.换枪头,在5号管中加入5 μL 1×10E6拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得1×10E5拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
6.重复上面的操作直到得到6个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
二、样品DNA的制备
7.如果有N个样品,最好设置N+2个提取,多出的一个是PC(样品制备阳性对照),一个是NC(样品制备阴性对照)。可以用10μL阳性对照的10000倍稀释液再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样,以此作为PC。另外用水作为NC。
8.用自选方法纯化样品的DNA,本试剂盒跟市场上大多数病毒DNA提取试剂盒兼容。也可以选购本公司的柱式病毒DNAout。本试剂盒免费赠送50次免DNA提取的核酸释放剂试用装,该释放剂的裂解液可以直接作为PCR模板,省略了DNA提取步骤。运输及保存:运输及保存:运输及保存:运输及保存:运输及保存:运输及保存:
低温运输,-20℃保存,保存期限为低温运输,-20℃保存,保存期限为低温运输,低温运输,-20℃保存,保存期限为
121212
个月。个月。个月。个月。
自备试剂:自备试剂:自备试剂:自备试剂:自备试剂:自备试剂:
样品DNA。样品DNA。样品样品DNA。
使用方法使用方法使用方法使用方法使用方法使用方法
一、稀释标准曲线样品(以10E2-10E7拷贝一、稀释标准曲线样品(以10E2-10E7拷贝一、稀释标准曲线样品(以10E2-10E7拷贝一、稀释标准曲线样品(以10E2-10E7拷贝一、稀释标准曲线样品(以一、稀释标准曲线样品(以10E2-10E7拷贝
/////
μμμμμ
LLLLL
这这这这这这
66666
个个个个个个
1010101010
倍稀释度为例)。倍稀释度为例)。倍稀释度为例)。倍稀释度为例)。倍稀释度为例)。倍稀释度为例)。
由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供无传染性的DNA片段作为阳性对照。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供无传染性的DNA片段作为阳性对照。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供无传染性的由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供无传染性的DNA片段作为阳性对照。
1.标记1.标记1.标记
666
个离心管,分别为个离心管,分别为个离心管,分别为个离心管,分别为
777
,,,,
666
,,,,
555
,,,,
444
,,,,
333
,,,,
222
。。。。
2.用带芯枪头分别加入2.用带芯枪头分别加入2.用带芯枪头分别加入
45 45 45
μμμ
LLL
荧光荧光荧光荧光
PCRPCRPCR
专用模板稀释液,最好用带芯枪头,下同)。专用模板稀释液,最好用带芯枪头,下同)。专用模板稀释液,最好用带芯枪头,下同)。专用模板稀释液,最好用带芯枪头,下同)。
3.在3.在3.在
777
号管中加入号管中加入号管中加入号管中加入
5 5 5
μμμ
L 1L 1L 1
×××
10E810E810E8
拷贝拷贝拷贝拷贝
///
μμμ
L L L
的阳性对照的阳性对照的阳性对照的阳性对照
(((
试剂盒提供试剂盒提供试剂盒提供试剂盒提供
)))
,充分震荡,充分震荡,充分震荡,充分震荡
111
分钟,得分钟,得分钟,得分钟,得
111
×××
10E710E710E7
拷贝拷贝拷贝拷贝
///
μμμ
LLL
的标准曲线样品。放冰上待用。的标准曲线样品。放冰上待用。的标准曲线样品。放冰上待用。的标准曲线样品。放冰上待用。
4.换枪头,在4.换枪头,在4.换枪头,在
666
号管中加入号管中加入号管中加入号管中加入
5 5 5
μμμ
L 1L 1L 1
×××
10E710E710E7
拷贝拷贝拷贝拷贝
///
μμμ
L L L
的阳性对照的阳性对照的阳性对照的阳性对照
(((
上步稀释所得上步稀释所得上步稀释所得上步稀释所得
)))
,充分震荡,充分震荡,充分震荡,充分震荡
111
分钟,得分钟,得分钟,得分钟,得
111
×××
10E610E610E6
拷贝拷贝拷贝拷贝
///
μμμ
LLL
的标准曲线样品。放冰上待用。的标准曲线样品。放冰上待用。的标准曲线样品。放冰上待用。的标准曲线样品。放冰上待用。
5.换枪头,在5.换枪头,在5.换枪头,在
555
号管中加入号管中加入号管中加入号管中加入
5 5 5
μμμ
L 1L 1L 1
×××
10E610E610E6
拷贝拷贝拷贝拷贝
///
μμμ
L L L
的阳性对照的阳性对照的阳性对照的阳性对照
(((
上步稀释所得上步稀释所得上步稀释所得上步稀释所得
)))
,充分震荡,充分震荡,充分震荡,充分震荡
111
分钟,得分钟,得分钟,得分钟,得
111
×××
10E510E510E5
拷贝拷贝拷贝拷贝
///
μμμ
LLL
的标准曲线样品。放冰上待用。的标准曲线样品。放冰上待用。的标准曲线样品。放冰上待用。的标准曲线样品。放冰上待用。
6.重复上面的操作直到得到6.重复上面的操作直到得到6.重复上面的操作直到得到
666
个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
二、样品DNA的制备二、样品DNA的制备二、样品DNA的制备二、样品DNA的制备二、样品二、样品DNA的制备
7.如果有7.如果有7.如果有
NNN
个样品,最好设置个样品,最好设置个样品,最好设置个样品,最好设置
N+2N+2N+2
个提取,多出的一个是个提取,多出的一个是个提取,多出的一个是个提取,多出的一个是
PCPCPC
(样品制备阳性对照),一个是(样品制备阳性对照),一个是(样品制备阳性对照),一个是(样品制备阳性对照),一个是
NCNCNC
(样品制备阴性对照)。可以用(样品制备阴性对照)。可以用(样品制备阴性对照)。可以用(样品制备阴性对照)。可以用
101010
μμμ
LLL
阳性对照的阳性对照的阳性对照的阳性对照的
100001000010000
倍稀释液再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样,以此作为倍稀释液再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样,以此作为倍稀释液再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样,以此作为倍稀释液再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样,以此作为
PCPCPC
。另外用水作为。另外用水作为。另外用水作为。另外用水作为
NCNCNC
。。。。
8.用自选方法纯化样品的8.用自选方法纯化样品的8.用自选方法纯化样品的
DNADNADNA
,本试剂盒跟市场上大多数病毒,本试剂盒跟市场上大多数病毒,本试剂盒跟市场上大多数病毒,本试剂盒跟市场上大多数病毒
DNADNADNA
提取试剂盒兼容。也可以选购本公司的柱式病毒提取试剂盒兼容。也可以选购本公司的柱式病毒提取试剂盒兼容。也可以选购本公司的柱式病毒提取试剂盒兼容。也可以选购本公司的柱式病毒
DNAoutDNAoutDNAout
。本试剂盒免费赠送。本试剂盒免费赠送。本试剂盒免费赠送。本试剂盒免费赠送
505050
次免次免次免次免
DNADNADNA
提取的核酸释放剂试用装,该释放剂的裂解液可以直接作为提取的核酸释放剂试用装,该释放剂的裂解液可以直接作为提取的核酸释放剂试用装,该释放剂的裂解液可以直接作为提取的核酸释放剂试用装,该释放剂的裂解液可以直接作为
PCRPCRPCR
模板,省略了模板,省略了模板,省略了模板,省略了
DNADNADNA
提取步骤。提取步骤。提取步骤。提取步骤。
三、Probe qPCR反应(20μL体系,在样品制备室进行)
9.如果只做1次重复,则标记N+9个PCR管,其中N+2个用于上步得到的N+2个样品,1个用于PCR阴性对照,6个用于标准曲线样品。
10.在标记管中按下表加入各成分(本表只列出一次重复。样品管和阴性对照设置完毕后才设置阳性对照,并且阳性对照样品要等所有管子盖上盖子储存好后最后加):三、Probe qPCR反应(20μL体系,在样品制备室进行)
9.如果只做1次重复,则标记N+9个PCR管,其中N+2个用于上步得到的N+2个样品,1个用于PCR阴性对照,6个用于标准曲线样品。
10.在标记管中按下表加入各成分(本表只列出一次重复。样品管和阴性对照设置完毕后才设置阳性对照,并且阳性对照样品要等所有管子盖上盖子储存好后最后加):三、Probe qPCR反应(三、Probe qPCR反应(三、Probe qPCR反应(三、Probe qPCR反应(三、三、Probe qPCR反应(
2020202020
μμμμμ
LLLLL
体系,在样品制备室进行)体系,在样品制备室进行)体系,在样品制备室进行)体系,在样品制备室进行)体系,在样品制备室进行)体系,在样品制备室进行)
9.如果只做9.如果只做9.如果只做
111
次重复,则标记次重复,则标记次重复,则标记次重复,则标记
N+9N+9N+9
个个个个
PCRPCRPCR
管,其中管,其中管,其中管,其中
N+2N+2N+2
个用于上步得到的个用于上步得到的个用于上步得到的个用于上步得到的
N+2N+2N+2
个样品,个样品,个样品,个样品,
111
个用于个用于个用于个用于
PCRPCRPCR
阴性对照,阴性对照,阴性对照,阴性对照,
666
个用于标准曲线样品。个用于标准曲线样品。个用于标准曲线样品。个用于标准曲线样品。
10.在标记管中按下表加入各成分(本表只列出一次重复。样品管和阴性对照设置完毕后才设置阳性对照,并且阳性对照样品要等所有管子盖上盖子储存好后最后加):10.在标记管中按下表加入各成分(本表只列出一次重复。样品管和阴性对照设置完毕后才设置阳性对照,并且阳性对照样品要等所有管子盖上盖子储存好后最后加):10.在标记管中按下表加入各成分(本表只列出一次重复。样品管和阴性对照设置完毕后才设置阳性对照,并且阳性对照样品要等所有管子盖上盖子储存好后最后加):
| 成份 | N+2 个 样品管 | PCR 阴性 对照管 | 标准曲线 样品管(2-7管) |
| 2×Probe qPCR MagicMix | 10μL | 10μL | 各10μL |
| 诺氏疟原虫qPCR探针 | 2μL | 2μL | 各2μL |
诺氏疟原虫 PCR引物混合液 | 2μL | 2μL | 各2μL |
| 待测样品DNA模板 | 6μL | 不加 | 不加 |
| 第7步所得标准曲线样品稀释液(2-7号) | 不加 | 不加 | 各6μL(2号样到2号管,3号样到3号管…) |
| 成份 | N+2 个 样品管 | PCR 阴性 对照管 | 标准曲线 样品管(2-7管) |
| 2×Probe qPCR MagicMix | 10μL | 10μL | 各10μL |
| 诺氏疟原虫qPCR探针 | 2μL | 2μL | 各2μL |
诺氏疟原虫 PCR引物混合液 | 2μL | 2μL | 各2μL |
| 待测样品DNA模板 | 6μL | 不加 | 不加 |
| 第7步所得标准曲线样品稀释液(2-7号) | 不加 | 不加 | 各6μL(2号样到2号管,3号样到3号管…) |
| 成份 | N+2 个 样品管 | PCR 阴性 对照管 | 标准曲线 样品管(2-7管) |
成份 | 成份成份成份成份成份成份成份成份
N+2 个 样品管 | N+2 个
样品管N+2 个
样品管N+2 个
样品管N+2 个N+2 个N+2 个N+2 个N+2 个
样品管样品管样品管样品管样品管
PCR 阴性 对照管 | PCR 阴性
对照管PCR 阴性
对照管PCR 阴性
对照管PCR 阴性PCR 阴性PCR 阴性PCR 阴性PCR 阴性
对照管对照管对照管对照管对照管
标准曲线 样品管(2-7管) | 标准曲线
样品管(2-7管)标准曲线
样品管(2-7管)标准曲线
样品管(2-7管)标准曲线标准曲线标准曲线标准曲线标准曲线
样品管(样品管(样品管(样品管(样品管(
2-72-72-72-72-7
管)管)管)管)管)
| 2×Probe qPCR MagicMix | 10μL | 10μL | 各10μL |
2×Probe qPCR MagicMix | 2×Probe qPCR MagicMix2×Probe qPCR MagicMix2×Probe qPCR MagicMix2×2×2×
Probe qPCR MagicMixProbe qPCR MagicMixProbe qPCR MagicMix
10μL | 10μL10μL10μL10μ10μ10μ
LLL
10μL | 10μL10μL10μL10μ10μ10μ
LLL
各10μL | 各10μL各10μL各10μL各10μ各10μ各10μ
LLL
| 诺氏疟原虫qPCR探针 | 2μL | 2μL | 各2μL |
诺氏疟原虫qPCR探针 | 诺氏疟原虫qPCR探针诺氏疟原虫qPCR探针诺氏疟原虫qPCR探针诺氏疟原虫诺氏疟原虫诺氏疟原虫
qPCRqPCRqPCR
探针探针探针
2μL | 2μL2μL2μL2μL2μL2μL
2μL | 2μL2μL2μL2μL2μL2μL
各2μL | 各2μL各2μL各2μL各2μL各2μL各2μL
诺氏疟原虫 PCR引物混合液 | 2μL | 2μL | 各2μL |
诺氏疟原虫 PCR引物混合液 | 诺氏疟原虫
PCR引物混合液诺氏疟原虫
PCR引物混合液诺氏疟原虫
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PCR引物混合液PCR引物混合液PCR引物混合液
2μL | 2μL2μL2μL2μL2μL2μL
2μL | 2μL2μL2μL2μL2μL2μL
各2μL | 各2μL各2μL各2μL各2μL各2μL各2μL
| 待测样品DNA模板 | 6μL | 不加 | 不加 |
待测样品DNA模板 | 待测样品DNA模板待测样品DNA模板待测样品DNA模板待测样品待测样品待测样品
DNADNADNA
模板模板模板
6μL | 6μL6μL6μL6μ6μ6μ
LLL
不加 | 不加不加不加不加不加不加
不加 | 不加不加不加不加不加不加
| 第7步所得标准曲线样品稀释液(2-7号) | 不加 | 不加 | 各6μL(2号样到2号管,3号样到3号管…) |
第7步所得标准曲线样品稀释液(2-7号) | 第7步所得标准曲线样品稀释液(2-7号)第7步所得标准曲线样品稀释液(2-7号)第7步所得标准曲线样品稀释液(2-7号)第第第
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11.盖上盖子后上机,按下面参数进行PCR: 11.盖上盖子后上机,按下面参数进行PCR: 11.盖上盖子后上机,按下面参数进行 11.盖上盖子后上机,按下面参数进行 11.盖上盖子后上机,按下面参数进行
PCRPCRPCR
::::
| 过程 | 温度 | 时间 |
| 预变性 | 94℃ | 5 min |
PCR 反应 (40 个循环) | 94℃ | 0.5 min |
| 55℃ | 0.5 min(采集FAM通道的荧光信号) |
| 72℃ | 0.5 min |
| 最后延伸 | 72℃ | 10 min |
| 过程 | 温度 | 时间 |
| 预变性 | 94℃ | 5 min |
PCR 反应 (40 个循环) | 94℃ | 0.5 min |
| 55℃ | 0.5 min(采集FAM通道的荧光信号) |
| 72℃ | 0.5 min |
| 最后延伸 | 72℃ | 10 min |
| 过程 | 温度 | 时间 |
过程 | 过程过程过程过程过程过程过程过程
温度 | 温度温度温度温度温度温度温度温度
时间 | 时间时间时间时间时间时间时间时间
| 预变性 | 94℃ | 5 min |
预变性 | 预变性预变性预变性预变性预变性预变性
94℃ | 94℃94℃94℃94℃94℃94℃
5 min | 5 min5 min5 min5 min5 min5 min
PCR 反应 (40 个循环) | 94℃ | 0.5 min |
PCR 反应 (40 个循环) | PCR 反应
(40 个循环)PCR 反应
(40 个循环)PCR 反应
(40 个循环)PCR 反应PCR 反应PCR 反应
(40 个循环)(40 个循环)(40 个循环)
94℃ | 94℃94℃94℃94℃94℃94℃
0.5 min | 0.5 min0.5 min0.5 min0.5 min0.5 min0.5 min
| 55℃ | 0.5 min(采集FAM通道的荧光信号) |
55℃ | 55℃55℃55℃55℃55℃55℃
0.5 min(采集FAM通道的荧光信号) | 0.5 min(采集FAM通道的荧光信号)0.5 min(采集FAM通道的荧光信号)0.5 min(采集FAM通道的荧光信号)0.5 min(采集0.5 min(采集0.5 min(采集
FAMFAMFAM
通道的荧光信号)通道的荧光信号)通道的荧光信号)
| 72℃ | 0.5 min |
72℃ | 72℃72℃72℃72℃72℃72℃
0.5 min | 0.5 min0.5 min0.5 min0.5 min0.5 min0.5 min
| 最后延伸 | 72℃ | 10 min |
最后延伸 | 最后延伸最后延伸最后延伸最后延伸最后延伸最后延伸
72℃ | 72℃72℃72℃72℃72℃72℃
10 min | 10 min10 min10 min10 min10 min10 min
- 数据处理
12.如果把本试剂盒用于定量检测,则以阳性对照浓度的log值为横轴,以Ct值为纵轴,绘制标准曲线。再以待测样品的Ct值从标准曲线上推算出样品DNA浓度的log值,再推算出其浓度。
13.如果把本试剂盒用于定性检测,只判断阳性或阴性,则阴性对照Ct必须大于或等于40。阳性对照必须有荧光对数增长,有典型扩增曲线,Ct值应该小于或等于30。对待测样品,如果其Ct大于或等于40则为阴性,如果小于或等于35则为阳性。如果在35-40之间,则重复一次。重复实验的Ct值如果大于或等于40则为阴性,如果小于40,则为阳性。
荧光定量试剂对低丰度基因进行扩增定量时,较易出现无信号或者非特异性扩增,且Ct值常大于30。通过加大样本量或反应体系,亦无显著改观。其中一个重要的原因是目的基因浓度较低时,Taq酶不能有效结合到目的扩增区域,导致扩增失败。
荧光定量PCR试剂多年研发经验的基础上研发而成的定量试剂,该产品采用了抗体法热启动Taq酶。抗体与Taq酶紧密结合,在50℃反应30min条件下,仍然可以封闭95%以上的酶活,有效抑制了Taq酶结合到非目的扩增区域,限制了由于引物非特异性退火而导致的非特异性扩增。同时,配方添加了提升PCR反应扩增效率的因子,大大提升扩增效率,保证定量结果的可靠性,非常适合低浓度模板的扩增。
3.产品特点
★灵敏度高:可检测个位拷贝数的基因
★特异性高:有效避免非特异性扩增的出现
★稳定性高:复孔间差异小,实验结果重复性强
★扩增性能优:扩增效率高,荧光信号强
数据处理
12.如果把本试剂盒用于定量检测,则以阳性对照浓度的log值为横轴,以Ct值为纵轴,绘制标准曲线。再以待测样品的Ct值从标准曲线上推算出样品DNA浓度的log值,再推算出其浓度。
13.如果把本试剂盒用于定性检测,只判断阳性或阴性,则阴性对照Ct必须大于或等于40。阳性对照必须有荧光对数增长,有典型扩增曲线,Ct值应该小于或等于30。对待测样品,如果其Ct大于或等于40则为阴性,如果小于或等于35则为阳性。如果在35-40之间,则重复一次。重复实验的Ct值如果大于或等于40则为阴性,如果小于40,则为阳性。
荧光定量试剂对低丰度基因进行扩增定量时,较易出现无信号或者非特异性扩增,且Ct值常大于30。通过加大样本量或反应体系,亦无显著改观。其中一个重要的原因是目的基因浓度较低时,Taq酶不能有效结合到目的扩增区域,导致扩增失败。
荧光定量PCR试剂多年研发经验的基础上研发而成的定量试剂,该产品采用了抗体法热启动Taq酶。抗体与Taq酶紧密结合,在50℃反应30min条件下,仍然可以封闭95%以上的酶活,有效抑制了Taq酶结合到非目的扩增区域,限制了由于引物非特异性退火而导致的非特异性扩增。同时,配方添加了提升PCR反应扩增效率的因子,大大提升扩增效率,保证定量结果的可靠性,非常适合低浓度模板的扩增。
3.产品特点
★灵敏度高:可检测个位拷贝数的基因
★特异性高:有效避免非特异性扩增的出现
★稳定性高:复孔间差异小,实验结果重复性强
★扩增性能优:扩增效率高,荧光信号强数据处理
12.如果把本试剂盒用于定量检测,则以阳性对照浓度的log值为横轴,以Ct值为纵轴,绘制标准曲线。再以待测样品的Ct值从标准曲线上推算出样品DNA浓度的log值,再推算出其浓度。
13.如果把本试剂盒用于定性检测,只判断阳性或阴性,则阴性对照Ct必须大于或等于40。阳性对照必须有荧光对数增长,有典型扩增曲线,Ct值应该小于或等于30。对待测样品,如果其Ct大于或等于40则为阴性,如果小于或等于35则为阳性。如果在35-40之间,则重复一次。重复实验的Ct值如果大于或等于40则为阴性,如果小于40,则为阳性。
荧光定量试剂对低丰度基因进行扩增定量时,较易出现无信号或者非特异性扩增,且Ct值常大于30。通过加大样本量或反应体系,亦无显著改观。其中一个重要的原因是目的基因浓度较低时,Taq酶不能有效结合到目的扩增区域,导致扩增失败。
荧光定量PCR试剂多年研发经验的基础上研发而成的定量试剂,该产品采用了抗体法热启动Taq酶。抗体与Taq酶紧密结合,在50℃反应30min条件下,仍然可以封闭95%以上的酶活,有效抑制了Taq酶结合到非目的扩增区域,限制了由于引物非特异性退火而导致的非特异性扩增。同时,配方添加了提升PCR反应扩增效率的因子,大大提升扩增效率,保证定量结果的可靠性,非常适合低浓度模板的扩增。
3.产品特点
★灵敏度高:可检测个位拷贝数的基因
★特异性高:有效避免非特异性扩增的出现
★稳定性高:复孔间差异小,实验结果重复性强
★扩增性能优:扩增效率高,荧光信号强数据处理
12.如果把本试剂盒用于定量检测,则以阳性对照浓度的log值为横轴,以Ct值为纵轴,绘制标准曲线。再以待测样品的Ct值从标准曲线上推算出样品DNA浓度的log值,再推算出其浓度。
13.如果把本试剂盒用于定性检测,只判断阳性或阴性,则阴性对照Ct必须大于或等于40。阳性对照必须有荧光对数增长,有典型扩增曲线,Ct值应该小于或等于30。对待测样品,如果其Ct大于或等于40则为阴性,如果小于或等于35则为阳性。如果在35-40之间,则重复一次。重复实验的Ct值如果大于或等于40则为阴性,如果小于40,则为阳性。
荧光定量试剂对低丰度基因进行扩增定量时,较易出现无信号或者非特异性扩增,且Ct值常大于30。通过加大样本量或反应体系,亦无显著改观。其中一个重要的原因是目的基因浓度较低时,Taq酶不能有效结合到目的扩增区域,导致扩增失败。
荧光定量PCR试剂多年研发经验的基础上研发而成的定量试剂,该产品采用了抗体法热启动Taq酶。抗体与Taq酶紧密结合,在50℃反应30min条件下,仍然可以封闭95%以上的酶活,有效抑制了Taq酶结合到非目的扩增区域,限制了由于引物非特异性退火而导致的非特异性扩增。同时,配方添加了提升PCR反应扩增效率的因子,大大提升扩增效率,保证定量结果的可靠性,非常适合低浓度模板的扩增。
3.产品特点
★灵敏度高:可检测个位拷贝数的基因
★特异性高:有效避免非特异性扩增的出现
★稳定性高:复孔间差异小,实验结果重复性强
★扩增性能优:扩增效率高,荧光信号强数据处理数据处理数据处理数据处理数据处理数据处理
12.如果把本试剂盒用于定量检测,则以阳性对照浓度的12.如果把本试剂盒用于定量检测,则以阳性对照浓度的12.如果把本试剂盒用于定量检测,则以阳性对照浓度的
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值为横轴,以值为横轴,以值为横轴,以值为横轴,以
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值为纵轴,绘制标准曲线。再以待测样品的值为纵轴,绘制标准曲线。再以待测样品的值为纵轴,绘制标准曲线。再以待测样品的值为纵轴,绘制标准曲线。再以待测样品的
CtCtCt
值从标准曲线上推算出样品值从标准曲线上推算出样品值从标准曲线上推算出样品值从标准曲线上推算出样品
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浓度的浓度的浓度的浓度的
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值,再推算出其浓度。值,再推算出其浓度。值,再推算出其浓度。值,再推算出其浓度。
13.如果把本试剂盒用于定性检测,只判断阳性或阴性,则阴性对照13.如果把本试剂盒用于定性检测,只判断阳性或阴性,则阴性对照13.如果把本试剂盒用于定性检测,只判断阳性或阴性,则阴性对照
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必须大于或等于必须大于或等于必须大于或等于必须大于或等于
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。阳性对照必须有荧光对数增长,有典型扩增曲线,。阳性对照必须有荧光对数增长,有典型扩增曲线,。阳性对照必须有荧光对数增长,有典型扩增曲线,。阳性对照必须有荧光对数增长,有典型扩增曲线,
CtCtCt
值应该小于或等于值应该小于或等于值应该小于或等于值应该小于或等于
303030
。对待测样品,如果其。对待测样品,如果其。对待测样品,如果其。对待测样品,如果其
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大于或等于大于或等于大于或等于大于或等于
404040
则为阴性,如果小于或等于则为阴性,如果小于或等于则为阴性,如果小于或等于则为阴性,如果小于或等于
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则为阳性。如果在则为阳性。如果在则为阳性。如果在则为阳性。如果在
35-4035-4035-40
之间,则重复一次。重复实验的之间,则重复一次。重复实验的之间,则重复一次。重复实验的之间,则重复一次。重复实验的
CtCtCt
值如果大于或等于值如果大于或等于值如果大于或等于值如果大于或等于
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则为阴性,如果小于则为阴性,如果小于则为阴性,如果小于则为阴性,如果小于
404040
,则为阳性。,则为阳性。,则为阳性。,则为阳性。
荧光定量试剂对低丰度基因进行扩增定量时,较易出现无信号或者非特异性扩增,且Ct值常大于荧光定量试剂对低丰度基因进行扩增定量时,较易出现无信号或者非特异性扩增,且Ct值常大于荧光定量试剂对低丰度基因进行扩增定量时,较易出现无信号或者非特异性扩增,且荧光定量试剂对低丰度基因进行扩增定量时,较易出现无信号或者非特异性扩增,且Ct值常大于
303030
。通过加大样本量或反应体系,亦无显著改观。其中一个重要的原因是目的基因浓度较低时,。通过加大样本量或反应体系,亦无显著改观。其中一个重要的原因是目的基因浓度较低时,。通过加大样本量或反应体系,亦无显著改观。其中一个重要的原因是目的基因浓度较低时,。通过加大样本量或反应体系,亦无显著改观。其中一个重要的原因是目的基因浓度较低时,
TaqTaqTaq
酶不能有效结合到目的扩增区域,导致扩增失败。酶不能有效结合到目的扩增区域,导致扩增失败。酶不能有效结合到目的扩增区域,导致扩增失败。酶不能有效结合到目的扩增区域,导致扩增失败。
荧光定量PCR试剂多年研发经验的基础上研发而成的定量试剂,该产品采用了抗体法热启动荧光定量PCR试剂多年研发经验的基础上研发而成的定量试剂,该产品采用了抗体法热启动荧光定量荧光定量PCR试剂多年研发经验的基础上研发而成的定量试剂,该产品采用了抗体法热启动
TaqTaqTaq
酶。抗体与酶。抗体与酶。抗体与酶。抗体与
TaqTaqTaq
酶紧密结合,在酶紧密结合,在酶紧密结合,在酶紧密结合,在
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TaqTaqTaq
酶结合到非目的扩增区域,限制了由于引物非特异性退火而导致的非特异性扩增。同时,配方添加了提升酶结合到非目的扩增区域,限制了由于引物非特异性退火而导致的非特异性扩增。同时,配方添加了提升酶结合到非目的扩增区域,限制了由于引物非特异性退火而导致的非特异性扩增。同时,配方添加了提升酶结合到非目的扩增区域,限制了由于引物非特异性退火而导致的非特异性扩增。同时,配方添加了提升
PCRPCRPCR
反应扩增效率的因子,大大提升扩增效率,保证定量结果的可靠性,非常适合低浓度模板的扩增。反应扩增效率的因子,大大提升扩增效率,保证定量结果的可靠性,非常适合低浓度模板的扩增。反应扩增效率的因子,大大提升扩增效率,保证定量结果的可靠性,非常适合低浓度模板的扩增。反应扩增效率的因子,大大提升扩增效率,保证定量结果的可靠性,非常适合低浓度模板的扩增。
3.产品特点3.产品特点3.产品特点
★灵敏度高:可检测个位拷贝数的基因★灵敏度高:可检测个位拷贝数的基因★灵敏度高:可检测个位拷贝数的基因
★特异性高:有效避免非特异性扩增的出现★特异性高:有效避免非特异性扩增的出现★特异性高:有效避免非特异性扩增的出现
★稳定性高:复孔间差异小,实验结果重复性强★稳定性高:复孔间差异小,实验结果重复性强★稳定性高:复孔间差异小,实验结果重复性强
★扩增性能优:扩增效率高,荧光信号强★扩增性能优:扩增效率高,荧光信号强★扩增性能优:扩增效率高,荧光信号强
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!