腰果源性成分核酸检测试剂盒（PCR-荧光探针法）腰果源性成分核酸检测试剂盒（PCR-荧光探针法）腰果源性成分核酸检测试剂盒（PCR-荧光探针法）腰果源性成分核酸检测试剂盒（PCR-荧光探针法）腰果源性成分核酸检测试剂盒（PCR-荧光探针法）腰果源性成分核酸检测试剂盒（腰果源性成分核酸检测试剂盒（PCR-荧光探针法）荧光探针法）
腰果源性成分核酸检测试剂盒（一管式 PCR-荧光探针法）腰果源性成分核酸检测试剂盒（一管式 PCR-荧光探针法）腰果源性成分核酸检测试剂盒（一管式 PCR-荧光探针法）腰果源性成分核酸检测试剂盒（一管式 PCR-荧光探针法）腰果源性成分核酸检测试剂盒（一管式腰果源性成分核酸检测试剂盒（一管式 PCR-荧光探针法）荧光探针法）
◆ 产品说明◆ 产品说明◆ 产品说明◆ 产品说明◆ 产品说明产品说明
物种鉴定系列中的过敏原鉴定试剂，可针对食品中过敏原成分的特异核酸片段进行扩增，通过实时扩增曲线判定结果。本产品用于食品及其原料中过敏原腰果成分的检测，检出限为 0.01%。物种鉴定系列中的过敏原鉴定试剂，可针对食品中过敏原成分的特异核酸片段进行扩增，通过实时扩增曲线判定结果。本产品用于食品及其原料中过敏原腰果成分的检测，检出限为 0.01%。物种鉴定系列中的过敏原鉴定试剂，可针对食品中过敏原成分的特异核酸片段进行扩增，通过实时扩增曲线判定结果。本产品用于食品及其原料中过敏原腰果成分的检测，检出限为 0.01%。物种鉴定系列中的过敏原鉴定试剂，可针对食品中过敏原成分的特异核酸片段进行扩增，通过实时扩增曲线判定结果。本产品用于食品及其原料中过敏原腰果成分的检测，检出限为 0.01%。物种鉴定系列中的过敏原鉴定试剂，可针对食品中过敏原成分的特异核酸片段进行扩增，通过实时扩增曲线判定结果。本产品用于食品及其原料中过敏原腰果成分的检测，检出限为物种鉴定系列中的过敏原鉴定试剂，可针对食品中过敏原成分的特异核酸片段进行扩增，通过实时扩增曲线判定结果。本产品用于食品及其原料中过敏原腰果成分的检测，检出限为 0.01%。。
◆ 产品组成（96 测试）◆ 产品组成（96 测试）◆ 产品组成（96 测试）◆ 产品组成（96 测试）◆ 产品组成（产品组成（96 96 测试）测试）
试剂含量试剂含量试剂含量试剂含量试剂试剂 含量含量
A-腰果源-P 20μL × 8 管× 12 排A-腰果源-P 20μL × 8 管× 12 排A-腰果源-P 20μL × 8 管× 12 排A-腰果源-P 20μL × 8 管× 12 排A-腰果源腰果源-P 20μL × 8 -P 20μL × 8 管管× 12 × 12 排排
NG-P 100μL × 3 支NG-P 100μL × 3 支NG-P 100μL × 3 支NG-P 100μL × 3 支NG-P 100μL × 3 支支
PG-腰果源-P 100μL × 2 支PG-腰果源-P 100μL × 2 支PG-腰果源-P 100μL × 2 支PG-腰果源-P 100μL × 2 支PG-腰果源腰果源-P 100μL × 2 -P 100μL × 2 支支
◆ 适用仪器◆ 适用仪器◆ 适用仪器◆ 适用仪器◆ 适用仪器适用仪器
ABI 7500、CFX 96、Mx 3005P、LineGene9600 等实时荧光 PCR 仪。ABI 7500、CFX 96、Mx 3005P、LineGene9600 等实时荧光 PCR 仪。ABI 7500、CFX 96、Mx 3005P、LineGene9600 等实时荧光 PCR 仪。ABI 7500、CFX 96、Mx 3005P、LineGene9600 等实时荧光 PCR 仪。ABI 7500、、CFX 96CFX 96、、Mx 3005PMx 3005P、、LineGene9600 LineGene9600 等实时荧光 等实时荧光 PCR PCR 仪。仪。
◆ 自备耗材和仪器◆ 自备耗材和仪器◆ 自备耗材和仪器◆ 自备耗材和仪器◆ 自备耗材和仪器自备耗材和仪器
①冰盒；②移液器（0.5-10μL，10-100μL，100-1000μL）及配套灭菌吸头；③离心机；④涡旋混匀器；⑤金属浴。①冰盒；②移液器（0.5-10μL，10-100μL，100-1000μL）及配套灭菌吸头；③离心机；④涡旋混匀器；⑤金属浴。①冰盒；②移液器（0.5-10μL，10-100μL，100-1000μL）及配套灭菌吸头；③离心机；④涡旋混匀器；⑤金属浴。①冰盒；②移液器（0.5-10μL，10-100μL，100-1000μL）及配套灭菌吸头；③离心机；④涡旋混匀器；⑤金属浴。①冰盒；冰盒；②②移液器（移液器（0.5-10μL0.5-10μL，，10-100μL10-100μL，，100-1000μL100-1000μL）及配套灭菌吸头；）及配套灭菌吸头；③③离心机；离心机；④④涡旋混匀器；涡旋混匀器；⑤⑤金属浴。金属浴。

◆ 注意事项◆ 注意事项◆ 注意事项◆ 注意事项◆ 注意事项注意事项
1．本试剂检测灵敏度高。为了防止污染，实验要分区操作。1．本试剂检测灵敏度高。为了防止污染，实验要分区操作。1．本试剂检测灵敏度高。为了防止污染，实验要分区操作。1．本试剂检测灵敏度高。为了防止污染，实验要分区操作。1．本试剂检测灵敏度高。为了防止污染，实验要分区操作。．本试剂检测灵敏度高。为了防止污染，实验要分区操作。
1）第一区：样本制备区。1）第一区：样本制备区。1）第一区：样本制备区。1）第一区：样本制备区。1）第一区：样本制备区。）第一区：样本制备区。
2）第二区：模板添加区。2）第二区：模板添加区。2）第二区：模板添加区。2）第二区：模板添加区。2）第二区：模板添加区。）第二区：模板添加区。
3）第三区：扩增及产物分析区。3）第三区：扩增及产物分析区。3）第三区：扩增及产物分析区。3）第三区：扩增及产物分析区。3）第三区：扩增及产物分析区。）第三区：扩增及产物分析区。
★ 分区之间最好进行物理性隔离，避免人为因素造成的污染。★ 分区之间最好进行物理性隔离，避免人为因素造成的污染。★ 分区之间最好进行物理性隔离，避免人为因素造成的污染。★ 分区之间最好进行物理性隔离，避免人为因素造成的污染。★ 分区之间最好进行物理性隔离，避免人为因素造成的污染。分区之间最好进行物理性隔离，避免人为因素造成的污染。
2．实验过程中穿戴工作服和乳胶手套，不同区域独立使用工具，需更换手套和实验服。2．实验过程中穿戴工作服和乳胶手套，不同区域独立使用工具，需更换手套和实验服。2．实验过程中穿戴工作服和乳胶手套，不同区域独立使用工具，需更换手套和实验服。2．实验过程中穿戴工作服和乳胶手套，不同区域独立使用工具，需更换手套和实验服。2．实验过程中穿戴工作服和乳胶手套，不同区域独立使用工具，需更换手套和实验服。．实验过程中穿戴工作服和乳胶手套，不同区域独立使用工具，需更换手套和实验服。
3．严格按照操作步骤操作，试剂配制和加样等步骤请严格按照说明书要求在冰盒上操作。3．严格按照操作步骤操作，试剂配制和加样等步骤请严格按照说明书要求在冰盒上操作。3．严格按照操作步骤操作，试剂配制和加样等步骤请严格按照说明书要求在冰盒上操作。3．严格按照操作步骤操作，试剂配制和加样等步骤请严格按照说明书要求在冰盒上操作。3．严格按照操作步骤操作，试剂配制和加样等步骤请严格按照说明书要求在冰盒上操作。．严格按照操作步骤操作，试剂配制和加样等步骤请严格按照说明书要求在冰盒上操作。
4．反应液中的成分对光敏感，应避光保存。试剂使用前要完全解冻，但应避免反复冻融，推荐使用前离心 30秒，并按检测频次将反应液以适当体积分管保存。4．反应液中的成分对光敏感，应避光保存。试剂使用前要完全解冻，但应避免反复冻融，推荐使用前离心 30秒，并按检测频次将反应液以适当体积分管保存。4．反应液中的成分对光敏感，应避光保存。试剂使用前要完全解冻，但应避免反复冻融，推荐使用前离心 30秒，并按检测频次将反应液以适当体积分管保存。4．反应液中的成分对光敏感，应避光保存。试剂使用前要完全解冻，但应避免反复冻融，推荐使用前离心 30秒，并按检测频次将反应液以适当体积分管保存。4．反应液中的成分对光敏感，应避光保存。试剂使用前要完全解冻，但应避免反复冻融，推荐使用前离心 ．反应液中的成分对光敏感，应避光保存。试剂使用前要完全解冻，但应避免反复冻融，推荐使用前离心 3030秒，并按检测频次将反应液以适当体积分管保存。秒，并按检测频次将反应液以适当体积分管保存。
5．反应结束后，扩增管请置于密封袋内丢弃，当日清理，开盖易造成气溶胶污染，禁止开盖。5．反应结束后，扩增管请置于密封袋内丢弃，当日清理，开盖易造成气溶胶污染，禁止开盖。5．反应结束后，扩增管请置于密封袋内丢弃，当日清理，开盖易造成气溶胶污染，禁止开盖。5．反应结束后，扩增管请置于密封袋内丢弃，当日清理，开盖易造成气溶胶污染，禁止开盖。5．反应结束后，扩增管请置于密封袋内丢弃，当日清理，开盖易造成气溶胶污染，禁止开盖。．反应结束后，扩增管请置于密封袋内丢弃，当日清理，开盖易造成气溶胶污染，禁止开盖。
6．不同批号试剂请勿混合使用，在有效期内使用。6．不同批号试剂请勿混合使用，在有效期内使用。6．不同批号试剂请勿混合使用，在有效期内使用。6．不同批号试剂请勿混合使用，在有效期内使用。6．不同批号试剂请勿混合使用，在有效期内使用。．不同批号试剂请勿混合使用，在有效期内使用。
◆样品处理◆样品处理◆样品处理◆样品处理◆样品处理样品处理
参照《SN/T 1961.4-2013 出口食品过敏原成分检测 第 4 部分：实时荧光 PCR 方法检测腰果成分》或其他标准处理样品，制备的样本保存待用。参照《SN/T 1961.4-2013 出口食品过敏原成分检测 第 4 部分：实时荧光 PCR 方法检测腰果成分》或其他标准处理样品，制备的样本保存待用。参照《SN/T 1961.4-2013 出口食品过敏原成分检测 第 4 部分：实时荧光 PCR 方法检测腰果成分》或其他标准处理样品，制备的样本保存待用。参照《SN/T 1961.4-2013 出口食品过敏原成分检测 第 4 部分：实时荧光 PCR 方法检测腰果成分》或其他标准处理样品，制备的样本保存待用。参照《参照《SN/T 1961.4-2013 出口食品过敏原成分检测 第 出口食品过敏原成分检测 第 4 4 部分：实时荧光 部分：实时荧光 PCR PCR 方法检测腰果成分》或其他标准处理样品，制备的样本保存待用。方法检测腰果成分》或其他标准处理样品，制备的样本保存待用。
样品的采集和制备是过敏原成分鉴别的重要步骤，防止交叉污染的措施按照 GB/T 27403 中的规定执行。详细步骤请按照标准操作或查阅食安通软件。样品的采集和制备是过敏原成分鉴别的重要步骤，防止交叉污染的措施按照 GB/T 27403 中的规定执行。详细步骤请按照标准操作或查阅食安通软件。样品的采集和制备是过敏原成分鉴别的重要步骤，防止交叉污染的措施按照 GB/T 27403 中的规定执行。详细步骤请按照标准操作或查阅食安通软件。样品的采集和制备是过敏原成分鉴别的重要步骤，防止交叉污染的措施按照 GB/T 27403 中的规定执行。详细步骤请按照标准操作或查阅食安通软件。样品的采集和制备是过敏原成分鉴别的重要步骤，防止交叉污染的措施按照样品的采集和制备是过敏原成分鉴别的重要步骤，防止交叉污染的措施按照 GB/T 27403 中的规定执行。详细步骤请按照标准操作或查阅食安通软件。中的规定执行。详细步骤请按照标准操作或查阅食安通软件。
◆ 实验操作◆ 实验操作◆ 实验操作◆ 实验操作◆ 实验操作实验操作
1.模板制备（样本制备区）1.模板制备（样本制备区）1.模板制备（样本制备区）1.模板制备（样本制备区）1.模板制备（样本制备区）模板制备（样本制备区）
建议使用配套动物基因组 DNA 提取试剂盒，具体过程详见产品说明书。建议使用配套动物基因组 DNA 提取试剂盒，具体过程详见产品说明书。建议使用配套动物基因组 DNA 提取试剂盒，具体过程详见产品说明书。建议使用配套动物基因组 DNA 提取试剂盒，具体过程详见产品说明书。建议使用配套动物基因组建议使用配套动物基因组 DNA 提取试剂盒，具体过程详见产品说明书。提取试剂盒，具体过程详见产品说明书。
2.添加模板（模板添加区，放置于冰盒上进行）2.添加模板（模板添加区，放置于冰盒上进行）2.添加模板（模板添加区，放置于冰盒上进行）2.添加模板（模板添加区，放置于冰盒上进行）2.添加模板（模板添加区，放置于冰盒上进行）添加模板（模板添加区，放置于冰盒上进行）
剪下所需测试数的已含有反应液的 PCR 管，放置在室温待解冻后，离心 30 秒后揭开封口膜，向每管反应液中分别加入 5μL 模板，顺序为 NG、待测样品模板、PG-腰果源-P。盖好配套的 PCR 管盖后，涡旋混匀 30s，离心请于-20℃条件下保存，有效期 12 个月1min，立即进行 PCR 扩增反应。剪下所需测试数的已含有反应液的 PCR 管，放置在室温待解冻后，离心 30 秒后揭开封口膜，向每管反应液中分别加入 5μL 模板，顺序为 NG、待测样品模板、PG-腰果源-P。盖好配套的 PCR 管盖后，涡旋混匀 30s，离心请于-20℃条件下保存，有效期 12 个月1min，立即进行 PCR 扩增反应。剪下所需测试数的已含有反应液的 PCR 管，放置在室温待解冻后，离心 30 秒后揭开封口膜，向每管反应液中分别加入 5μL 模板，顺序为 NG、待测样品模板、PG-腰果源-P。盖好配套的 PCR 管盖后，涡旋混匀 30s，离心请于-20℃条件下保存，有效期 12 个月1min，立即进行 PCR 扩增反应。剪下所需测试数的已含有反应液的 PCR 管，放置在室温待解冻后，离心 30 秒后揭开封口膜，向每管反应液中分别加入 5μL 模板，顺序为 NG、待测样品模板、PG-腰果源-P。盖好配套的 PCR 管盖后，涡旋混匀 30s，离心请于-20℃条件下保存，有效期 12 个月1min，立即进行 PCR 扩增反应。剪下所需测试数的已含有反应液的剪下所需测试数的已含有反应液的 PCR 管，放置在室温待解冻后，离心 管，放置在室温待解冻后，离心 30 30 秒后揭开封口膜，向每管反应液中分别加入 秒后揭开封口膜，向每管反应液中分别加入 5μL 5μL 模板，顺序为 模板，顺序为 NGNG、待测样品模板、、待测样品模板、PG-PG-腰果源腰果源-P-P。盖好配套的 。盖好配套的 PCR PCR 管盖后，涡旋混匀 管盖后，涡旋混匀 30s30s，离心请于，离心请于-20℃-20℃条件下保存，有效期 条件下保存，有效期 12 12 个月个月1min1min，立即进行 ，立即进行 PCR PCR 扩增反应。扩增反应。
3.扩增反应（扩增及产物分析区）3.扩增反应（扩增及产物分析区）3.扩增反应（扩增及产物分析区）3.扩增反应（扩增及产物分析区）3.扩增反应（扩增及产物分析区）扩增反应（扩增及产物分析区）
使用荧光定量 PCR 仪，荧光基团选择 FAM，淬灭基团选择 TAMRA。使用荧光定量 PCR 仪，荧光基团选择 FAM，淬灭基团选择 TAMRA。使用荧光定量 PCR 仪，荧光基团选择 FAM，淬灭基团选择 TAMRA。使用荧光定量 PCR 仪，荧光基团选择 FAM，淬灭基团选择 TAMRA。使用荧光定量使用荧光定量 PCR 仪，荧光基团选择 仪，荧光基团选择 FAMFAM，淬灭基团选择 ，淬灭基团选择 TAMRATAMRA。。
按下列条件设置扩增反应：按下列条件设置扩增反应：按下列条件设置扩增反应：按下列条件设置扩增反应：按下列条件设置扩增反应：按下列条件设置扩增反应：
PCR 循环 荧光收集位点PCR 循环 荧光收集位点PCR 循环 荧光收集位点PCR 循环 荧光收集位点PCR 循环 荧光收集位点循环 荧光收集位点
50℃ 2 分钟 1 个循环 —50℃ 2 分钟 1 个循环 —50℃ 2 分钟 1 个循环 —50℃ 2 分钟 1 个循环 —50℃ 2 分钟 分钟 1 1 个循环 个循环 ——
95℃ 10 分钟 1 个循环 —95℃ 10 分钟 1 个循环 —95℃ 10 分钟 1 个循环 —95℃ 10 分钟 1 个循环 —95℃ 10 分钟 分钟 1 1 个循环 个循环 ——
95℃ 15 秒95℃ 15 秒95℃ 15 秒95℃ 15 秒95℃ 15 秒秒
45 个循环45 个循环45 个循环45 个循环45 个循环个循环
—————
58℃ 1 分钟 ※58℃ 1 分钟 ※58℃ 1 分钟 ※58℃ 1 分钟 ※58℃ 1 分钟 分钟 ※※
4.基线和阈值设定4.基线和阈值设定4.基线和阈值设定4.基线和阈值设定4.基线和阈值设定基线和阈值设定
基线调整取 3-15 个循环的荧光信号，阈值线应超过阴性对照扩增曲线的最高点。基线调整取 3-15 个循环的荧光信号，阈值线应超过阴性对照扩增曲线的最高点。基线调整取 3-15 个循环的荧光信号，阈值线应超过阴性对照扩增曲线的最高点。基线调整取 3-15 个循环的荧光信号，阈值线应超过阴性对照扩增曲线的最高点。基线调整取基线调整取 3-15 个循环的荧光信号，阈值线应超过阴性对照扩增曲线的最高点。个循环的荧光信号，阈值线应超过阴性对照扩增曲线的最高点。
◆ 结果判定◆ 结果判定◆ 结果判定◆ 结果判定◆ 结果判定结果判定
检测样品 Ct 值≤35，则判定为被检样品阳性，检出过敏原腰果成分。检测样品 Ct 值≤35，则判定为被检样品阳性，检出过敏原腰果成分。检测样品 Ct 值≤35，则判定为被检样品阳性，检出过敏原腰果成分。检测样品 Ct 值≤35，则判定为被检样品阳性，检出过敏原腰果成分。检测样品检测样品 Ct 值值≤35≤35，则判定为被检样品阳性，检出过敏原腰果成分。，则判定为被检样品阳性，检出过敏原腰果成分。
检测样品 Ct 值≥40，则判定为被检样品阴性，未检出过敏原腰果成分。检测样品 Ct 值≥40，则判定为被检样品阴性，未检出过敏原腰果成分。检测样品 Ct 值≥40，则判定为被检样品阴性，未检出过敏原腰果成分。检测样品 Ct 值≥40，则判定为被检样品阴性，未检出过敏原腰果成分。检测样品检测样品 Ct 值值≥40≥40，则判定为被检样品阴性，未检出过敏原腰果成分。，则判定为被检样品阴性，未检出过敏原腰果成分。
检测样品 35＜Ct 值＜40，则重复一次。如再次扩增后 Ct 值仍为＜40.0，则判定为被检样品阳性，检出过敏原腰果成分。如再次扩增后 Ct 值≥40，则判定为被检样品阴性，未检出过敏原腰果成分。检测样品 35＜Ct 值＜40，则重复一次。如再次扩增后 Ct 值仍为＜40.0，则判定为被检样品阳性，检出过敏原腰果成分。如再次扩增后 Ct 值≥40，则判定为被检样品阴性，未检出过敏原腰果成分。检测样品 35＜Ct 值＜40，则重复一次。如再次扩增后 Ct 值仍为＜40.0，则判定为被检样品阳性，检出过敏原腰果成分。如再次扩增后 Ct 值≥40，则判定为被检样品阴性，未检出过敏原腰果成分。检测样品 35＜Ct 值＜40，则重复一次。如再次扩增后 Ct 值仍为＜40.0，则判定为被检样品阳性，检出过敏原腰果成分。如再次扩增后 Ct 值≥40，则判定为被检样品阴性，未检出过敏原腰果成分。检测样品检测样品 35＜＜Ct Ct 值＜值＜4040，则重复一次。如再次扩增后 ，则重复一次。如再次扩增后 Ct Ct 值仍为＜值仍为＜40.040.0，则判定为被检样品阳性，检出过敏原腰果成分。如再次扩增后 ，则判定为被检样品阳性，检出过敏原腰果成分。如再次扩增后 Ct Ct 值值≥40≥40，则判定为被检样品阴性，未检出过敏原腰果成分。，则判定为被检样品阴性，未检出过敏原腰果成分。
★ NG 反应为平滑直线，PG 反应为“S”型扩增曲线，此次检测结果有效，否则无效。如重复检测结果仍为无效，请与技术支持人员联系。★ NG 反应为平滑直线，PG 反应为“S”型扩增曲线，此次检测结果有效，否则无效。如重复检测结果仍为无效，请与技术支持人员联系。★ NG 反应为平滑直线，PG 反应为“S”型扩增曲线，此次检测结果有效，否则无效。如重复检测结果仍为无效，请与技术支持人员联系。★ NG 反应为平滑直线，PG 反应为“S”型扩增曲线，此次检测结果有效，否则无效。如重复检测结果仍为无效，请与技术支持人员联系。★ NG 反应为平滑直线，反应为平滑直线，PG PG 反应为反应为“S”“S”型扩增曲线，此次检测结果有效，否则无效。如重复检测结果仍为无效，请与技术支持人员联系。型扩增曲线，此次检测结果有效，否则无效。如重复检测结果仍为无效，请与技术支持人员联系。