EdU细胞增殖成像分析试剂盒
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细胞增殖是评价细胞活性、代谢、生理和病理状况的重要指标。EdU (5-Ethynyl-2`- deoxyuridine)是一种胸腺嘧啶核苷类似物,其连有的炔烃基团在天然化合物中很少见,能够在细胞增殖时期代替胸腺嘧啶(T)掺入正在复制的DNA分子中,通过基于EdU与荧光染料的特异性共轭反应,把荧光集团标记到新合成的含有EdU的DNA上面,这样可以进行高效快速的检测出DNA复制活性,此技术广泛应用于细胞增殖、细胞分化、生长与发育、DNA损伤修复等方面的研究。细胞增殖是评价细胞活性、代谢、生理和病理状况的重要指标。EdU (5-Ethynyl-2`- deoxyuridine)是一种胸腺嘧啶核苷类似物,其连有的炔烃基团在天然化合物中很少见,能够在细胞增殖时期代替胸腺嘧啶(T)掺入正在复制的DNA分子中,通过基于EdU与荧光染料的特异性共轭反应,把荧光集团标记到新合成的含有EdU的DNA上面,这样可以进行高效快速的检测出DNA复制活性,此技术广泛应用于细胞增殖、细胞分化、生长与发育、DNA损伤修复等方面的研究。细胞增殖是评价细胞活性、代谢、生理和病理状况的重要细胞增殖是评价细胞活性、代谢、生理和病理状况的重要细胞增殖是评价细胞活性、代谢、生理和病理状况的重要细胞增殖是评价细胞活性、代谢、生理和病理状况的重要细胞增殖是评价细胞活性、代谢、生理和病理状况的重要细胞增殖是评价细胞活性、代谢、生理和病理状况的重要
指标。指标。指标。指标。指标。指标。
EdU (5-Ethynyl-2`- deoxyuridine)是一种胸腺嘧啶核苷类似物,其连有的炔烃基团在天然化合物中很少见,能够在细胞增殖时期代替胸腺嘧啶(T)掺入正在复制的DNA分子中,通过基于EdU与荧光染料的特异性共轭反应,把荧光集团标记到新合成的含有EdU的DNA上面,这样可以进行高效快速的检测出DNA复制活性,此技术广泛应用于细胞增殖、细胞分化、生长与发育、DNA损伤修复等方面的研究。EdU (5-Ethynyl-2`- deoxyuridine)是一种胸腺嘧啶核苷类似物,其连有的炔烃基团在天然化合物中很少见,能够在细胞增殖时期代替胸腺嘧啶(T)掺入正在复制的DNA分子中,通过基于EdU与荧光染料的特异性共轭反应,把荧光集团标记到新合成的含有EdU的DNA上面,这样可以进行高效快速的检测出DNA复制活性,此技术广泛应用于细胞增殖、细胞分化、生长与发育、DNA损伤修复等方面的研究。EdU (5-Ethynyl-2`- deoxyuridine)是一种胸腺嘧啶核苷类似物,其连有的炔烃基团在天然化合物中很少见,能够在细胞增殖时期代替胸腺嘧啶(T)掺入正在复制的DNA分子中,通过基于EdU与荧光染料的特异性共轭反应,把荧光集团标记到新合成的含有EdU的DNA上面,这样可以进行高效快速的检测出DNA复制活性,此技术广泛应用于细胞增殖、细胞分化、生长与发育、DNA损伤修复等方面的研究。EdU (5-Ethynyl-2`- deoxyuridine)是一种胸腺嘧啶核苷类似物,其连有的炔烃基团在天然化合物中很少见,能够在细胞增殖时期代替胸腺嘧啶(T)掺入正在复制的DNA分子中,通过基于EdU与荧光染料的特异性共轭反应,把荧光集团标记到新合成的含有EdU的DNA上面,这样可以进行高效快速的检测出DNA复制活性,此技术广泛应用于细胞增殖、细胞分化、生长与发育、DNA损伤修复等方面的研究。EdU (5-Ethynyl-2`- deoxyuridine)是一种胸腺嘧啶核苷类似物,其连有的炔烃基团在天然化合物中很少见,能够在细胞增殖时期代替胸腺嘧啶(T)掺入正在复制的DNA分子中,通过基于EdU与荧光染料的特异性共轭反应,把荧光集团标记到新合成的含有EdU的DNA上面,这样可以进行高效快速的检测出DNA复制活性,此技术广泛应用于细胞增殖、细胞分化、生长与发育、DNA损伤修复等方面的研究。EdU (5-Ethynyl-2`- deoxyuridine)是一种胸腺嘧啶核苷类似物,其连有的炔烃基团在天然化合物中很少见,能够在细胞增殖时期代替胸腺嘧啶(T)掺入正在复制的DNA分子中,通过基于EdU与荧光染料的特异性共轭反应,把荧光集团标记到新合成的含有EdU的DNA上面,这样可以进行高效快速的检测出DNA复制活性,此技术广泛应用于细胞增殖、细胞分化、生长与发育、DNA损伤修复等方面的研究。
传统的免疫荧光染色(BrdU)检测方法需要DNA变性、抗原修复、抗原抗体过夜孵育等复杂繁琐的操作步骤。而EdU检测方法不需要剧烈的DNA变性,只需温和的细胞固定化和透化处理,能够较好地保护细胞形态、DNA整体结构及细胞内抗原识别位点,操作步骤更加快速、灵敏和准确。EdU与胸腺嘧啶(T)结构非常相似,大小却只有BrdU抗体的1/500,很容易在细胞内扩散;无需抗原抗体反应,能在细胞和组织水平更快速便捷地反映DNA复制活性。传统的免疫荧光染色(BrdU)检测方法需要DNA变性、抗原修复、抗原抗体过夜孵育等复杂繁琐的操作步骤。而EdU检测方法不需要剧烈的DNA变性,只需温和的细胞固定化和透化处理,能够较好地保护细胞形态、DNA整体结构及细胞内抗原识别位点,操作步骤更加快速、灵敏和准确。EdU与胸腺嘧啶(T)结构非常相似,大小却只有BrdU抗体的1/500,很容易在细胞内扩散;无需抗原抗体反应,能在细胞和组织水平更快速便捷地反映DNA复制活性。传统的免疫荧光染色(BrdU)检测方法需要DNA变性、抗原修复、抗原抗体过夜孵育等复杂繁琐的操作步骤。而EdU检测方法不需要剧烈的DNA变性,只需温和的细胞固定化和透化处理,能够较好地保护细胞形态、DNA整体结构及细胞内抗原识别位点,操作步骤更加快速、灵敏和准确。EdU与胸腺嘧啶(T)结构非常相似,大小却只有BrdU抗体的1/500,很容易在细胞内扩散;无需抗原抗体反应,能在细胞和组织水平更快速便捷地反映DNA复制活性。传统的免疫荧光染色(BrdU)检测方法需要DNA变性、抗原修复、抗原抗体过夜孵育等复杂繁琐的操作步骤。而EdU检测方法不需要剧烈的DNA变性,只需温和的细胞固定化和透化处理,能够较好地保护细胞形态、DNA整体结构及细胞内抗原识别位点,操作步骤更加快速、灵敏和准确。EdU与胸腺嘧啶(T)结构非常相似,大小却只有BrdU抗体的1/500,很容易在细胞内扩散;无需抗原抗体反应,能在细胞和组织水平更快速便捷地反映DNA复制活性。传统的免疫荧光染色(BrdU)检测方法需要DNA变性、抗原修复、抗原抗体过夜孵育等复杂繁琐的操作步骤。而EdU检测方法不需要剧烈的DNA变性,只需温和的细胞固定化和透化处理,能够较好地保护细胞形态、DNA整体结构及细胞内抗原识别位点,操作步骤更加快速、灵敏和准确。EdU与胸腺嘧啶(T)结构非常相似,大小却只有BrdU抗体的1/500,很容易在细胞内扩散;无需抗原抗体反应,能在细胞和组织水平更快速便捷地反映DNA复制活性。传统的免疫荧光染色(BrdU)检测方法需要DNA变性、抗原修复、抗原抗体过夜孵育等复杂繁琐的操作步骤。而EdU检测方法不需要剧烈的DNA变性,只需温和的细胞固定化和透化处理,能够较好地保护细胞形态、DNA整体结构及细胞内抗原识别位点,操作步骤更加快速、灵敏和准确。EdU与胸腺嘧啶(T)结构非常相似,大小却只有BrdU抗体的1/500,很容易在细胞内扩散;无需抗原抗体反应,能在细胞和组织水平更快速便捷地反映DNA复制活性。传统的免疫荧光染色传统的免疫荧光染色
(BrdU)检测方法需要DNA变性、抗原修复、抗原抗体过夜孵育等复杂繁琐的操作步骤。而EdU检测方法不需要剧烈的DNA变性,只需温和的细胞固定化和透化处理,能够较好地保护细胞形态、DNA整体结构及细胞内抗原识别位点,操作步骤更加快速、灵敏和准确。EdU与胸腺嘧啶(T)结构非常相似,大小却只有BrdU抗体的1/500,很容易在细胞内扩散;无需抗原抗体反应,能在细胞和组织水平更快速便捷地反映DNA复制活性。(BrdU)检测方法需要DNA变性、抗原修复、抗原抗体过夜孵育等复杂繁琐的操作步骤。而EdU检测方法不需要剧烈的DNA变性,只需温和的细胞固定化和透化处理,能够较好地保护细胞形态、DNA整体结构及细胞内抗原识别位点,操作步骤更加快速、灵敏和准确。EdU与胸腺嘧啶(T)结构非常相似,大小却只有BrdU抗体的1/500,很容易在细胞内扩散;无需抗原抗体反应,能在细胞和组织水平更快速便捷地反映DNA复制活性。
订购信息订购信息订购信息订购信息订购信息订购信息订购信息订购信息订购信息订购信息订购信息
| 产品名称 | 货号 | 规格 | 价格 |
| EdU细胞增殖成像分析试剂盒 | AC11L251 | 100 T | 880 |
| 产品名称 | 货号 | 规格 | 价格 |
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| 产品名称 | 货号 | 规格 | 价格 |
产品名称 | 产品名称产品名称产品名称产品名称产品名称产品名称产品名称
货号 | 货号货号货号货号货号货号货号
规格 | 规格规格规格规格规格规格规格
价格 | 价格价格价格价格价格价格价格
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AC11L251 | AC11L251AC11L251AC11L251AC11L251AC11L251AC11L251
100 T | 100 T100 T100 T100 T100 T100 T
880 | 880880880880880880
产品组分产品组分产品组分产品组分产品组分产品组分产品组分产品组分产品组分产品组分产品组分
| 产品组分 | 规格 |
| EdU溶液 | 40 μL |
| 反应缓冲液 | 1 mL |
| 催化剂溶液 | 400 μL |
| TAMRA红色荧光溶液 | 25 μL |
| 缓冲添加剂 | 200 mg |
| Hoechst33342 | 20 μL |
| 产品组分 | 规格 |
| EdU溶液 | 40 μL |
| 反应缓冲液 | 1 mL |
| 催化剂溶液 | 400 μL |
| TAMRA红色荧光溶液 | 25 μL |
| 缓冲添加剂 | 200 mg |
| Hoechst33342 | 20 μL |
| 产品组分 | 规格 |
产品组分 | 产品组分产品组分产品组分产品组分产品组分产品组分产品组分产品组分
规格 | 规格规格规格规格规格规格规格规格
| EdU溶液 | 40 μL |
EdU溶液 | EdUEdUEdUEdUEdUEdU
溶液溶液溶液溶液溶液溶液
40 μL | 40 μL40 μL40 μL40 μL40 μL40 μL
| 反应缓冲液 | 1 mL |
反应缓冲液 | 反应缓冲液反应缓冲液反应缓冲液反应缓冲液反应缓冲液反应缓冲液
1 mL | 1 mL1 mL1 mL1 mL1 mL1 mL
| 催化剂溶液 | 400 μL |
催化剂溶液 | 催化剂溶液催化剂溶液催化剂溶液催化剂溶液催化剂溶液催化剂溶液
400 μL | 400 μL400 μL400 μL400 μL400 μL400 μL
| TAMRA红色荧光溶液 | 25 μL |
TAMRA红色荧光溶液 | TAMRATAMRATAMRATAMRATAMRATAMRA
红色荧光溶液红色荧光溶液红色荧光溶液红色荧光溶液红色荧光溶液红色荧光溶液
25 μL | 25 μL25 μL25 μL25 μL25 μL25 μL
| 缓冲添加剂 | 200 mg |
缓冲添加剂 | 缓冲添加剂缓冲添加剂缓冲添加剂缓冲添加剂缓冲添加剂缓冲添加剂
200 mg | 200 200 200 200 200 200
mgmgmgmgmgmg
| Hoechst33342 | 20 μL |
Hoechst33342 | HoechstHoechstHoechstHoechstHoechstHoechst
333423334233342333423334233342
20 μL | 20 μL20 μL20 μL20 μL20 μL20 μL
运输与保存运输与保存运输与保存运输与保存运输与保存运输与保存运输与保存运输与保存运输与保存运输与保存运输与保存
常温运输。4℃保存,有效期12个月。常温运输。4℃保存,有效期12个月。常温运输。4℃保存,有效期12个月。常温运输。4℃保存,有效期12个月。常温运输。4℃保存,有效期12个月。常温运输。4℃保存,有效期12个月。常温运输。常温运输。
4℃保存,有效期12个月。4℃保存,有效期12个月。
使用方法(以24孔板,HK2贴壁细胞为例)使用方法(以24孔板,HK2贴壁细胞为例)使用方法(以24孔板,HK2贴壁细胞为例)使用方法(以24孔板,HK2贴壁细胞为例)使用方法(以24孔板,HK2贴壁细胞为例)使用方法(以24孔板,HK2贴壁细胞为例)使用方法(以24孔板,HK2贴壁细胞为例)使用方法(以24孔板,HK2贴壁细胞为例)使用方法(以24孔板,HK2贴壁细胞为例)使用方法(以使用方法(以
24孔板,HK2贴壁细胞为例)24孔板,HK2贴壁细胞为例)
本试剂盒是采用成像检测方法进行检测,适用于荧光显微镜、共聚焦显微镜等仪器。以下方式适用于贴壁细胞;非贴壁细胞可在孵育EdU后进行细胞涂片处理,固定后再采用贴壁细胞的染色流程进行检测。本试剂盒是采用成像检测方法进行检测,适用于荧光显微镜、共聚焦显微镜等仪器。以下方式适用于贴壁细胞;非贴壁细胞可在孵育EdU后进行细胞涂片处理,固定后再采用贴壁细胞的染色流程进行检测。本试剂盒是采用成像检测方法进行检测,适用于荧光显微镜、共聚焦显微镜等仪器。以下方式适用于贴壁细胞;非贴壁细胞可在孵育EdU后进行细胞涂片处理,固定后再采用贴壁细胞的染色流程进行检测。本试剂盒是采用成像检测方法进行检测,适用于荧光显微镜、共聚焦显微镜等仪器。以下方式适用于贴壁细胞;非贴壁细胞可在孵育EdU后进行细胞涂片处理,固定后再采用贴壁细胞的染色流程进行检测。本试剂盒是采用成像检测方法进行检测,适用于荧光显微镜、共聚焦显微镜等仪器。以下方式适用于贴壁细胞;非贴壁细胞可在孵育EdU后进行细胞涂片处理,固定后再采用贴壁细胞的染色流程进行检测。本试剂盒是采用成像检测方法进行检测,适用于荧光显微镜、共聚焦显微镜等仪器。以下方式适用于贴壁细胞;非贴壁细胞可在孵育EdU后进行细胞涂片处理,固定后再采用贴壁细胞的染色流程进行检测。本试剂盒是采用成像检测方法进行检测,适用于荧光显微镜、共聚焦显微镜等仪器。以下方式适用于贴壁细胞;非贴壁细胞可在孵育本试剂盒是采用成像检测方法进行检测,适用于荧光显微镜、共聚焦显微镜等仪器。以下方式适用于贴壁细胞;非贴壁细胞可在孵育
EdU后进行细胞涂片处理,固定后再采用贴壁细胞的染色流程进行检测。EdU后进行细胞涂片处理,固定后再采用贴壁细胞的染色流程进行检测。
EdU标记EdU标记EdU标记EdU标记EdU标记EdU标记EdU标记EdU标记
1.将细胞培养基与EdU溶液按照500:1的比例混合,制成2×EdU标记培养基。1.将细胞培养基与EdU溶液按照500:1的比例混合,制成2×EdU标记培养基。1.将细胞培养基与EdU溶液按照500:1的比例混合,制成2×EdU标记培养基。1.将细胞培养基与EdU溶液按照500:1的比例混合,制成2×EdU标记培养基。1.将细胞培养基与EdU溶液按照500:1的比例混合,制成2×EdU标记培养基。1.将细胞培养基与EdU溶液按照500:1的比例混合,制成2×EdU标记培养基。
2.提前将2×EdU标记培养基预热,然后将150微升2×EdU标记培养基与等体积细胞培养基混合,获得1×EdU溶液。2.提前将2×EdU标记培养基预热,然后将150微升2×EdU标记培养基与等体积细胞培养基混合,获得1×EdU溶液。2.提前将2×EdU标记培养基预热,然后将150微升2×EdU标记培养基与等体积细胞培养基混合,获得1×EdU溶液。2.提前将2×EdU标记培养基预热,然后将150微升2×EdU标记培养基与等体积细胞培养基混合,获得1×EdU溶液。2.提前将2×EdU标记培养基预热,然后将150微升2×EdU标记培养基与等体积细胞培养基混合,获得1×EdU溶液。2.提前将2×EdU标记培养基预热,然后将150微升2×EdU标记培养基与等体积细胞培养基混合,获得1×EdU溶液。
【注】:【注】:【注】:【注】:【注】:【注】:【注】:【注】:
①不建议替换全部培养基,这样可能会影响细胞增殖的速度。②配置好的培养基建议现用现配,用量以没过细胞为宜。①不建议替换全部培养基,这样可能会影响细胞增殖的速度。②配置好的培养基建议现用现配,用量以没过细胞为宜。①不建议替换全部培养基,这样可能会影响细胞增殖的速度。②配置好的培养基建议现用现配,用量以没过细胞为宜。①不建议替换全部培养基,这样可能会影响细胞增殖的速度。②配置好的培养基建议现用现配,用量以没过细胞为宜。①不建议替换全部培养基,这样可能会影响细胞增殖的速度。②配置好的培养基建议现用现配,用量以没过细胞为宜。①不建议替换全部培养基,这样可能会影响细胞增殖的速度。②配置好的培养基建议现用现配,用量以没过细胞为宜。
3.孵育细胞2 h,弃培养基。3.孵育细胞2 h,弃培养基。3.孵育细胞2 h,弃培养基。3.孵育细胞2 h,弃培养基。3.孵育细胞2 h,弃培养基。3.孵育细胞2 h,弃培养基。
【注】:【注】:【注】:【注】:【注】:【注】:【注】:【注】:
①培养时间取决于细胞的增殖速度和生长状态。②大多数肿瘤细胞以及粘附细胞系均可采用2 h的孵育时间。①培养时间取决于细胞的增殖速度和生长状态。②大多数肿瘤细胞以及粘附细胞系均可采用2 h的孵育时间。①培养时间取决于细胞的增殖速度和生长状态。②大多数肿瘤细胞以及粘附细胞系均可采用2 h的孵育时间。①培养时间取决于细胞的增殖速度和生长状态。②大多数肿瘤细胞以及粘附细胞系均可采用2 h的孵育时间。①培养时间取决于细胞的增殖速度和生长状态。②大多数肿瘤细胞以及粘附细胞系均可采用2 h的孵育时间。①培养时间取决于细胞的增殖速度和生长状态。②大多数肿瘤细胞以及粘附细胞系均可采用2 h的孵育时间。
4.以1xPBS清洗细胞两次,每次5 min, 以除去未掺入DNA的EdU残留。4.以1xPBS清洗细胞两次,每次5 min, 以除去未掺入DNA的EdU残留。4.以1xPBS清洗细胞两次,每次5 min, 以除去未掺入DNA的EdU残留。4.以1xPBS清洗细胞两次,每次5 min, 以除去未掺入DNA的EdU残留。4.以1xPBS清洗细胞两次,每次5 min, 以除去未掺入DNA的EdU残留。4.以1xPBS清洗细胞两次,每次5 min, 以除去未掺入DNA的EdU残留。
【注】:对于【注】:对于【注】:对于【注】:对于【注】:对于【注】:对于【注】:对于【注】:对于
贴壁不牢的细胞可降低清洗强度。贴壁不牢的细胞可降低清洗强度。贴壁不牢的细胞可降低清洗强度。贴壁不牢的细胞可降低清洗强度。贴壁不牢的细胞可降低清洗强度。贴壁不牢的细胞可降低清洗强度。
细胞的固定和通透细胞的固定和通透细胞的固定和通透细胞的固定和通透细胞的固定和通透细胞的固定和通透细胞的固定和通透细胞的固定和通透
1.每孔加入150μL 4%duoju 细胞固定液,室温培养30 min,弃固定液。1.每孔加入150μL 4%duoju 细胞固定液,室温培养30 min,弃固定液。1.每孔加入150μL 4%duoju 细胞固定液,室温培养30 min,弃固定液。1.每孔加入150μL 4%duoju 细胞固定液,室温培养30 min,弃固定液。1.每孔加入150μL 4%duoju 细胞固定液,室温培养30 min,弃固定液。1.每孔加入150μL 4%duoju 细胞固定液,室温培养30 min,弃固定液。
2.每孔加入150μL 2mg/ml甘氨酸,摇床孵育5 min,以中和过量的duojujiaquan。2.每孔加入150μL 2mg/ml甘氨酸,摇床孵育5 min,以中和过量的duojujiaquan。2.每孔加入150μL 2mg/ml甘氨酸,摇床孵育5 min,以中和过量的duojujiaquan。2.每孔加入150μL 2mg/ml甘氨酸,摇床孵育5 min,以中和过量的duojujiaquan。2.每孔加入150μL 2mg/ml甘氨酸,摇床孵育5 min,以中和过量的duojujiaquan。2.每孔加入150μL 2mg/ml甘氨酸,摇床孵育5 min,以中和过量的duojujiaquan。
3.弃甘氨酸溶液,每孔加入300μL PBS 洗液,室温清洗5 min。3.弃甘氨酸溶液,每孔加入300μL PBS 洗液,室温清洗5 min。3.弃甘氨酸溶液,每孔加入300μL PBS 洗液,室温清洗5 min。3.弃甘氨酸溶液,每孔加入300μL PBS 洗液,室温清洗5 min。3.弃甘氨酸溶液,每孔加入300μL PBS 洗液,室温清洗5 min。3.弃甘氨酸溶液,每孔加入300μL PBS 洗液,室温清洗5 min。
4.每孔加入 300μL 0.5% Triton X-100 细胞通透液,室温通透10 min,弃细胞通透溶液。4.每孔加入 300μL 0.5% Triton X-100 细胞通透液,室温通透10 min,弃细胞通透溶液。4.每孔加入 300μL 0.5% Triton X-100 细胞通透液,室温通透10 min,弃细胞通透溶液。4.每孔加入 300μL 0.5% Triton X-100 细胞通透液,室温通透10 min,弃细胞通透溶液。4.每孔加入 300μL 0.5% Triton X-100 细胞通透液,室温通透10 min,弃细胞通透溶液。4.每孔加入 300μL 0.5% Triton X-100 细胞通透液,室温通透10 min,弃细胞通透溶液。
5.每孔加入300μL PBS洗液,室温清洗 5 min。5.每孔加入300μL PBS洗液,室温清洗 5 min。5.每孔加入300μL PBS洗液,室温清洗 5 min。5.每孔加入300μL PBS洗液,室温清洗 5 min。5.每孔加入300μL PBS洗液,室温清洗 5 min。5.每孔加入300μL PBS洗液,室温清洗 5 min。
EdU染色EdU染色EdU染色EdU染色EdU染色EdU染色EdU染色EdU染色
1.通过用10:1去离子水稀释反应缓冲液,进行配制1×反应缓冲液。1.通过用10:1去离子水稀释反应缓冲液,进行配制1×反应缓冲液。1.通过用10:1去离子水稀释反应缓冲液,进行配制1×反应缓冲液。1.通过用10:1去离子水稀释反应缓冲液,进行配制1×反应缓冲液。1.通过用10:1去离子水稀释反应缓冲液,进行配制1×反应缓冲液。1.通过用10:1去离子水稀释反应缓冲液,进行配制1×反应缓冲液。
2.按照溶解200 mg缓冲添加剂溶于1 mL 去离子水的比例称取适量的粉末进行溶解,即为可用的缓冲添加剂的浓度,建议现用现配。2.按照溶解200 mg缓冲添加剂溶于1 mL 去离子水的比例称取适量的粉末进行溶解,即为可用的缓冲添加剂的浓度,建议现用现配。2.按照溶解200 mg缓冲添加剂溶于1 mL 去离子水的比例称取适量的粉末进行溶解,即为可用的缓冲添加剂的浓度,建议现用现配。2.按照溶解200 mg缓冲添加剂溶于1 mL 去离子水的比例称取适量的粉末进行溶解,即为可用的缓冲添加剂的浓度,建议现用现配。2.按照溶解200 mg缓冲添加剂溶于1 mL 去离子水的比例称取适量的粉末进行溶解,即为可用的缓冲添加剂的浓度,建议现用现配。2.按照溶解200 mg缓冲添加剂溶于1 mL 去离子水的比例称取适量的粉末进行溶解,即为可用的缓冲添加剂的浓度,建议现用现配。
【注】:【注】:【注】:【注】:【注】:【注】:【注】:【注】:
缓冲添加剂为白色粉末,较难准确称量,称量范围可稍微放宽,但是不应超过±20%,且该粉末较易氧化,使用后请旋紧管盖,如试剂出现棕黄色,则需报废或更换。缓冲添加剂为白色粉末,较难准确称量,称量范围可稍微放宽,但是不应超过±20%,且该粉末较易氧化,使用后请旋紧管盖,如试剂出现棕黄色,则需报废或更换。缓冲添加剂为白色粉末,较难准确称量,称量范围可稍微放宽,但是不应超过±20%,且该粉末较易氧化,使用后请旋紧管盖,如试剂出现棕黄色,则需报废或更换。缓冲添加剂为白色粉末,较难准确称量,称量范围可稍微放宽,但是不应超过±20%,且该粉末较易氧化,使用后请旋紧管盖,如试剂出现棕黄色,则需报废或更换。缓冲添加剂为白色粉末,较难准确称量,称量范围可稍微放宽,但是不应超过缓冲添加剂为白色粉末,较难准确称量,称量范围可稍微放宽,但是不应超过
±20%,且该粉末较易氧化,使用后请旋紧管盖,如试剂出现棕黄色,则需报废或更换。±20%,且该粉末较易氧化,使用后请旋紧管盖,如试剂出现棕黄色,则需报废或更换。
3.按照以下的表格进行染色反应液的配制:3.按照以下的表格进行染色反应液的配制:3.按照以下的表格进行染色反应液的配制:3.按照以下的表格进行染色反应液的配制:3.按照以下的表格进行染色反应液的配制:3.按照以下的表格进行染色反应液的配制:
| 染色反应液组分 | 500 μL | 1 mL | 2 mL | 5 mL |
| 1X反应缓冲液 | 430 μL | 860 μL | 1.8 mL | 4.3 mL |
| 催化剂溶液 | 20 μL | 40μL | 80 μL | 200 μL |
| TAMRA红色荧光溶液 | 1.2 μL | 2.5 μL | 5 μL | 12.5 μL |
| 缓冲添加剂 | 50 μL | 100 μL | 200 μL | 500 μL |
| 染色反应液组分 | 500 μL | 1 mL | 2 mL | 5 mL |
| 1X反应缓冲液 | 430 μL | 860 μL | 1.8 mL | 4.3 mL |
| 催化剂溶液 | 20 μL | 40μL | 80 μL | 200 μL |
| TAMRA红色荧光溶液 | 1.2 μL | 2.5 μL | 5 μL | 12.5 μL |
| 缓冲添加剂 | 50 μL | 100 μL | 200 μL | 500 μL |
| 染色反应液组分 | 500 μL | 1 mL | 2 mL | 5 mL |
染色反应液组分 | 染色反应液组分染色反应液组分染色反应液组分染色反应液组分染色反应液组分染色反应液组分
500 μL | 500 μL500 μL500 μL500 μL500 μL500 μL
1 mL | 1 mL1 mL1 mL1 mL1 mL1 mL
2 mL | 2 mL2 mL2 mL2 mL2 mL2 mL
5 mL | 5 mL5 mL5 mL5 mL5 mL5 mL
| 1X反应缓冲液 | 430 μL | 860 μL | 1.8 mL | 4.3 mL |
1X反应缓冲液 | 1X反应缓冲液1X反应缓冲液1X反应缓冲液1X反应缓冲液1X反应缓冲液1X反应缓冲液
430 μL | 430 μL430 μL430 μL430 μL430 μL430 μL
860 μL | 860 μL860 μL860 μL860 μL860 μL860 μL
1.8 mL | 1.8 mL1.8 mL1.8 mL1.8 mL1.8 mL1.8 mL
4.3 mL | 4.3 mL4.3 mL4.3 mL4.3 mL4.3 mL4.3 mL
| 催化剂溶液 | 20 μL | 40μL | 80 μL | 200 μL |
催化剂溶液 | 催化剂溶液催化剂溶液催化剂溶液催化剂溶液催化剂溶液催化剂溶液
20 μL | 20 μL20 μL20 μL20 μL20 μL20 μL
40μL | 40μL40μL40μL40μL40μL40μL
80 μL | 80 μL80 μL80 μL80 μL80 μL80 μL
200 μL | 200 μL200 μL200 μL200 μL200 μL200 μL
| TAMRA红色荧光溶液 | 1.2 μL | 2.5 μL | 5 μL | 12.5 μL |
TAMRA红色荧光溶液 | TAMRA红色荧光溶液TAMRA红色荧光溶液TAMRA红色荧光溶液TAMRA红色荧光溶液TAMRA红色荧光溶液TAMRA红色荧光溶液
1.2 μL | 1.2 μL1.2 μL1.2 μL1.2 μL1.2 μL1.2 μL
2.5 μL | 2.5 μL2.5 μL2.5 μL2.5 μL2.5 μL2.5 μL
5 μL | 5 μL5 μL5 μL5 μL5 μL5 μL
12.5 μL | 12.5 μL12.5 μL12.5 μL12.5 μL12.5 μL12.5 μL
| 缓冲添加剂 | 50 μL | 100 μL | 200 μL | 500 μL |
缓冲添加剂 | 缓冲添加剂缓冲添加剂缓冲添加剂缓冲添加剂缓冲添加剂缓冲添加剂
50 μL | 50 μL50 μL50 μL50 μL50 μL50 μL
100 μL | 100 μL100 μL100 μL100 μL100 μL100 μL
200 μL | 200 μL200 μL200 μL200 μL200 μL200 μL
500 μL | 500 μL500 μL500 μL500 μL500 μL500 μL
4.每孔加入100 μL配置好的检测混合液,以覆盖细胞为宜,避光、室温孵育30 min。4.每孔加入100 μL配置好的检测混合液,以覆盖细胞为宜,避光、室温孵育30 min。4.每孔加入100 μL配置好的检测混合液,以覆盖细胞为宜,避光、室温孵育30 min。4.每孔加入100 μL配置好的检测混合液,以覆盖细胞为宜,避光、室温孵育30 min。4.每孔加入100 μL配置好的检测混合液,以覆盖细胞为宜,避光、室温孵育30 min。4.每孔加入100 μL配置好的检测混合液,以覆盖细胞为宜,避光、室温孵育30 min。
5.5.5.5.5.5.
弃染色反应液,加入300弃染色反应液,加入300弃染色反应液,加入300弃染色反应液,加入300弃染色反应液,加入弃染色反应液,加入
300300
μL μL μL μL μL μL
0.5% 0.5% 0.5% 0.5% 0.5% 0.5%
Triton X-10Triton X-10Triton X-10Triton X-10Triton X-10Triton X-10
0细胞渗透液清洗0细胞渗透液清洗0细胞渗透液清洗0细胞渗透液清洗0细胞渗透液清洗0细胞渗透液清洗
2-32-32-32-32-32-3
次,每次10次,每次10次,每次10次,每次10次,每次次,每次
1010
minminminminminmin
。。。。。。
6.弃细胞渗透液,用PBS洗两次,每次 5 min。6.弃细胞渗透液,用PBS洗两次,每次 5 min。6.弃细胞渗透液,用PBS洗两次,每次 5 min。6.弃细胞渗透液,用PBS洗两次,每次 5 min。6.弃细胞渗透液,用PBS洗两次,每次 5 min。6.弃细胞渗透液,用PBS洗两次,每次 5 min。
DNA染色DNA染色DNA染色DNA染色DNA染色DNA染色DNA染色DNA染色
1.将1.将1.将1.将1.将1.将
Hoechst 33342 *超级纯*(李记货号:AC12L021)Hoechst 33342 *超级纯*(李记货号:AC12L021)Hoechst 33342 *超级纯*(李记货号:AC12L021)Hoechst 33342 *超级纯*(李记货号:AC12L021)Hoechst 33342 *超级纯*(李记货号:AC12L021)Hoechst 33342 *超级纯*(李记货号:AC12L021)Hoechst 33342 *超级纯*(李记货号:AC12L021)Hoechst 33342 *超级纯*(李记货号:AC12L021)Hoechst 33342 *超级纯*(李记货号:AC12L021)
用PBS溶液1:1000进行稀释得到1×Hoechst染色液用PBS溶液1:1000进行稀释得到1×Hoechst染色液用PBS溶液1:1000进行稀释得到1×Hoechst染色液用PBS溶液1:1000进行稀释得到1×Hoechst染色液用用
PBS溶液1:1000进行稀释得到1×Hoechst染色液PBS溶液1:1000进行稀释得到1×Hoechst染色液
。。。。。。
2.每孔加入150 μL 1×Hoechst染色液2.每孔加入150 μL 1×Hoechst染色液2.每孔加入150 μL 1×Hoechst染色液2.每孔加入150 μL 1×Hoechst染色液2.每孔加入150 μL 1×Hoechst染色液2.每孔加入150 μL 1×Hoechst染色液
,室温,室温,室温,室温,室温,室温
避光孵育20-30 min后,弃染色液。避光孵育20-30 min后,弃染色液。避光孵育20-30 min后,弃染色液。避光孵育20-30 min后,弃染色液。避光孵育避光孵育
20-30 min后,弃染色液。20-30 min后,弃染色液。
3.每孔加入300 μL PBS洗细胞两次,去掉洗液。3.每孔加入300 μL PBS洗细胞两次,去掉洗液。3.每孔加入300 μL PBS洗细胞两次,去掉洗液。3.每孔加入300 μL PBS洗细胞两次,去掉洗液。3.每孔加入300 μL PBS洗细胞两次,去掉洗液。3.每孔加入300 μL PBS洗细胞两次,去掉洗液。
图像获取及分析图像获取及分析图像获取及分析图像获取及分析图像获取及分析图像获取及分析图像获取及分析图像获取及分析
建议染色完成后立即进行荧光显微镜拍照观察;如果条件限制,请于4℃条件下避光湿润保存3 d之内完成拍照。若为细胞爬片或涂片,可使用抗荧光淬灭封片剂进行封片后于4℃条件下保存及拍照检测。 建议染色完成后立即进行荧光显微镜拍照观察;如果条件限制,请于4℃条件下避光湿润保存3 d之内完成拍照。若为细胞爬片或涂片,可使用抗荧光淬灭封片剂进行封片后于4℃条件下保存及拍照检测。 建议染色完成后立即进行荧光显微镜拍照观察;如果条件限制,请于4℃条件下避光湿润保存3 d之内完成拍照。若为细胞爬片或涂片,可使用抗荧光淬灭封片剂进行封片后于4℃条件下保存及拍照检测。 建议染色完成后立即进行荧光显微镜拍照观察;如果条件限制,请于4℃条件下避光湿润保存3 d之内完成拍照。若为细胞爬片或涂片,可使用抗荧光淬灭封片剂进行封片后于4℃条件下保存及拍照检测。 建议染色完成后立即进行荧光显微镜拍照观察;如果条件限制,请于 建议染色完成后立即进行荧光显微镜拍照观察;如果条件限制,请于
4℃条件下避光湿润保存3 d之内完成拍照。若为细胞爬片或涂片,可使用抗荧光淬灭封片剂进行封片后于4℃条件下保存及拍照检测。4℃条件下避光湿润保存3 d之内完成拍照。若为细胞爬片或涂片,可使用抗荧光淬灭封片剂进行封片后于4℃条件下保存及拍照检测。
| 荧光染料 | 最大激发波长 | 最大发射波长 | 荧光颜色 |
| TAMRA | 541 nm | 567 nm | 橘红色荧光 |
| Hoechst 33342 | 350 nm | 461 nm | 蓝色荧光 |
| 荧光染料 | 最大激发波长 | 最大发射波长 | 荧光颜色 |
| TAMRA | 541 nm | 567 nm | 橘红色荧光 |
| Hoechst 33342 | 350 nm | 461 nm | 蓝色荧光 |
| 荧光染料 | 最大激发波长 | 最大发射波长 | 荧光颜色 |
荧光染料 | 荧光染料荧光染料荧光染料荧光染料荧光染料荧光染料
最大激发波长 | 最大激发波长最大激发波长最大激发波长最大激发波长最大激发波长最大激发波长
最大发射波长 | 最大发射波长最大发射波长最大发射波长最大发射波长最大发射波长最大发射波长
荧光颜色 | 荧光颜色荧光颜色荧光颜色荧光颜色荧光颜色荧光颜色
| TAMRA | 541 nm | 567 nm | 橘红色荧光 |
TAMRA | TAMRATAMRATAMRATAMRATAMRATAMRA
541 nm | 541 nm541 nm541 nm541 nm541 nm541 nm
567 nm | 567 nm567 nm567 nm567 nm567 nm567 nm
橘红色荧光 | 橘红色荧光橘红色荧光橘红色荧光橘红色荧光橘红色荧光橘红色荧光
| Hoechst 33342 | 350 nm | 461 nm | 蓝色荧光 |
Hoechst 33342 | Hoechst 33342Hoechst 33342Hoechst 33342Hoechst 33342Hoechst 33342Hoechst 33342
350 nm | 350 nm350 nm350 nm350 nm350 nm350 nm
461 nm | 461 nm461 nm461 nm461 nm461 nm461 nm
蓝色荧光 | 蓝色荧光蓝色荧光蓝色荧光蓝色荧光蓝色荧光蓝色荧光
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- 本产品仅限于科学实验研究使用,不得用于临床诊断、治疗等领域。
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