植物RNA提取试剂套装(CTAB法,4个组份)

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博尔森/BIOESN
中国
2022-07-31 07:54

上海博尔森生物科技有限公司

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植物RNA提取试剂套装(CTAB法,4个组份)

植物RNA提取试剂套装(CTAB法,4个组份)植物RNA提取试剂套装(CTAB法,4个组份)植物RNA提取试剂套装(CTAB法,4个组份)

储存条件:常温保存,保质期 2 年。

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产品内容:

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产品说明:

产品说明:产品说明:产品说明:

CTAB(hexadecyltrimethylammonium bromide,十六烷基三甲基溴化铵),是一种阳离子去污剂,具有从低离子强度溶液中沉淀核酸与酸性多聚糖的特性。在高离子强度的溶液中(0.7mol/L NaCl),CTAB 与蛋白质和多聚糖形成复合物,只是不能沉淀核酸.通过有机溶剂抽提,去除蛋白、多糖、酚类等杂质后加入乙醇沉淀即可使核酸分离出来。

CTAB(hexadecyltrimethylammonium bromide,十六烷基三甲基溴化铵),是一种阳离子去污剂,具有从低离子强度溶液中沉淀核酸与酸性多聚糖的特性。在高离子强度的溶液中(0.7mol/L NaCl),CTAB 与蛋白质和多聚糖形成复合物,只是不能沉淀核酸.通过有机溶剂抽提,去除蛋白、多糖、酚类等杂质后加入乙醇沉淀即可使核酸分离出来。CTAB(hexadecyltrimethylammonium bromide,十六烷基三甲基溴化铵),是一种阳离子去污剂,具有从低离子强度溶液中沉淀核酸与酸性多聚糖的特性。在高离子强度的溶液中(0.7mol/L NaCl),CTAB 与蛋白质和多聚糖形成复合物,只是不能沉淀核酸.通过有机溶剂抽提,去除蛋白、多糖、酚类等杂质后加入乙醇沉淀即可使核酸分离出来。

使用方法:

使用方法:使用方法:使用方法:

一、试剂准备

一、试剂准备一、试剂准备一、试剂准备

1、氯仿-混合液(24:1)。96mL 氯仿加 4mL 混匀(自备或购买套装)。

1、氯仿-混合液(24:1)。96mL 氯仿加 4mL 混匀(自备或购买套装)。1、氯仿-混合液(24:1)。96mL 氯仿加 4mL 混匀(自备或购买套装)。

2、65℃预热 CTAB 提取液。每 15mL CTAB 提取液加入 300uL 的还原剂。

2、65℃预热 CTAB 提取液。每 15mL CTAB 提取液加入 300uL 的还原剂。2、65℃预热 CTAB 提取液。每 15mL CTAB 提取液加入 300uL 的还原剂。

3、无水乙醇。

3、无水乙醇。3、无水乙醇。

二、操作步骤(需要两天时间)

二、操作步骤(需要两天时间)二、操作步骤(需要两天时间)二、操作步骤(需要两天时间)

1、离心管中加入 15mL 预热的 CTAB 提取液(已加入 300uL 还原剂)。

1、离心管中加入 15mL 预热的 CTAB 提取液(已加入 300uL 还原剂)。1、离心管中加入 15mL 预热的 CTAB 提取液(已加入 300uL 还原剂)。

2、液氮研磨 2-3 g 植物组织,转移到 CTAB 提取液中,涡旋震荡 1min 后置于 65℃ 水浴中 5 min。

2、液氮研磨 2-3 g 植物组织,转移到 CTAB 提取液中,涡旋震荡 1min 后置于 65℃ 水浴中 5 min。2、液氮研磨 2-3 g 植物组织,转移到 CTAB 提取液中,涡旋震荡 1min 后置于 65℃ 水浴中 5 min。

3、水浴完成后冷却 2min,加入 15 mL 的氯仿-混合液,剧烈震荡混匀。9,000 rmp 离心 15 min。

3、水浴完成后冷却 2min,加入 15 mL 的氯仿-混合液,剧烈震荡混匀。9,000 rmp 离心 15 min。3、水浴完成后冷却 2min,加入 15 mL 的氯仿-混合液,剧烈震荡混匀。9,000 rmp 离心 15 min。

4、取上步离心管中上清液到新的离心管中,加入 15 mL 的氯仿-混合液,剧烈震荡混匀。9,000 rmp离心 15 min。

4、取上步离心管中上清液到新的离心管中,加入 15 mL 的氯仿-混合液,剧烈震荡混匀。9,000 rmp离心 15 min。4、取上步离心管中上清液到新的离心管中,加入 15 mL 的氯仿-混合液,剧烈震荡混匀。9,000 rmp离心 15 min。

5、取上步离心管中上清液到新的离心管中,加入等体积的 4M LiCl(终浓度 2M),4℃沉淀过夜(12-16h)。

5、取上步离心管中上清液到新的离心管中,加入等体积的 4M LiCl(终浓度 2M),4℃沉淀过夜(12-16h)。5、取上步离心管中上清液到新的离心管中,加入等体积的 4M LiCl(终浓度 2M),4℃沉淀过夜(12-16h)。

6、9,000 rmp,4℃离心 60 min 沉淀 RNA,弃上清。

6、9,000 rmp,4℃离心 60 min 沉淀 RNA,弃上清。6、9,000 rmp,4℃离心 60 min 沉淀 RNA,弃上清。

7、在沉淀中加入 500 uL 的 70% 乙醇洗涤沉淀,9,000 rmp 离心 10 min,弃上清。

7、在沉淀中加入 500 uL 的 70% 乙醇洗涤沉淀,9,000 rmp 离心 10 min,弃上清。7、在沉淀中加入 500 uL 的 70% 乙醇洗涤沉淀,9,000 rmp 离心 10 min,弃上清。

8、在沉淀中加入 500uL 的 SSTE 溶解沉淀,转移至 1.5mL 的离心管中,加入 500uL 的氯仿-混合液,震荡混匀,12,000 rmp 离心 1min,将上清小心转移至新的离心管中。

8、在沉淀中加入 500uL 的 SSTE 溶解沉淀,转移至 1.5mL 的离心管中,加入 500uL 的氯仿-混合液,震荡混匀,12,000 rmp 离心 1min,将上清小心转移至新的离心管中。8、在沉淀中加入 500uL 的 SSTE 溶解沉淀,转移至 1.5mL 的离心管中,加入 500uL 的氯仿-混合液,震荡混匀,12,000 rmp 离心 1min,将上清小心转移至新的离心管中。

9、在上清中加入 1/10 体积的 3M 乙酸钠溶液,2 倍体积的无水乙醇,置于-20℃沉淀 2h 或-80℃沉淀 30min。

9、在上清中加入 1/10 体积的 3M 乙酸钠溶液,2 倍体积的无水乙醇,置于-20℃沉淀 2h 或-80℃沉淀 30min。9、在上清中加入 1/10 体积的 3M 乙酸钠溶液,2 倍体积的无水乙醇,置于-20℃沉淀 2h 或-80℃沉淀 30min。

10、沉淀用 400uL 的 70%乙醇洗涤沉淀,12,000 rmp 离心 5min,小心吸弃上清,再加入 400uL 无水乙醇(无需吹打),12,000 rmp 离心 5min 后,小心吸弃上清。

10、沉淀用 400uL 的 70%乙醇洗涤沉淀,12,000 rmp 离心 5min,小心吸弃上清,再加入 400uL 无水乙醇(无需吹打),12,000 rmp 离心 5min 后,小心吸弃上清。10、沉淀用 400uL 的 70%乙醇洗涤沉淀,12,000 rmp 离心 5min,小心吸弃上清,再加入 400uL 无水乙醇(无需吹打),12,000 rmp 离心 5min 后,小心吸弃上清。

11、乙醇挥发,RNA 干燥后加入 50-100 uL DEPC 水溶解 RNA。电泳检测后置于-80℃保存。

11、乙醇挥发,RNA 干燥后加入 50-100 uL DEPC 水溶解 RNA。电泳检测后置于-80℃保存。11、乙醇挥发,RNA 干燥后加入 50-100 uL DEPC 水溶解 RNA。电泳检测后置于-80℃保存。

特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!

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