小鼠肝窦内皮细胞小鼠肝窦内皮细胞小鼠肝窦内皮细胞小鼠肝窦内皮细胞小鼠肝窦内皮细胞小鼠肝窦内皮细胞
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肝血窦是相邻肝板之间的腔隙，是一种特殊的毛细血管。肝血窦的窦壁由肝细胞的细胞膜构成，故肝血窦的通透性较大，有利于肝细胞与血流之间进行物质交换。在电镜下观察，肝血窦内皮细胞与肝细胞之间有一狭窄间隙，称窦周隙(Disse腔)。肝窦内皮细胞是肝脏非实质细胞的主要细胞群，由肝窦内皮细胞构成的肝窦壁是全身毛细血管壁中唯一缺乏基膜的毛细血管窗孔，足肝窦内皮细胞最具特征性的结构。肝窦内皮细胞在调节肝窦血流与周围组织的物质交换中起有效的中枢性的作用，因此肝窦内皮细胞对于维持正常的肝功能起十分重要的作用。同时肝窦内皮细胞在肝脏的生理病理过程中发挥着诸多的重要功能。

肝血窦是相邻肝板之间的腔隙，是一种特殊的毛细血管。肝血窦的窦壁由肝细胞的细胞膜构成，故肝血窦的通透性较大，有利于肝细胞与血流之间进行物质交换。在电镜下观察，肝血窦内皮细胞与肝细胞之间有一狭窄间隙，称窦周隙(Disse腔)。肝窦内皮细胞是肝脏非实质细胞的主要细胞群，由肝窦内皮细胞构成的肝窦壁是全身毛细血管壁中唯一缺乏基膜的毛细血管窗孔，足肝窦内皮细胞最具特征性的结构。肝窦内皮细胞在调节肝窦血流与周围组织的物质交换中起有效的中枢性的作用，因此肝窦内皮细胞对于维持正常的肝功能起十分重要的作用。同时肝窦内皮细胞在肝脏的生理病理过程中发挥着诸多的重要功能。

本公司生产的小鼠肝窦内皮细胞采用体外多步灌注和密度梯度离心法制备而来，细胞总量约为5×10⁵/T25方瓶，Stabilin-2呈阳性，细胞纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

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培养基信息：

培养基信息：培养基信息：

我们推荐使用康朗生物研制的小鼠肝窦内皮细胞专用完全培养液（产品编号：KLM6004-6）作为体外培养小鼠肝窦内皮细胞的培养基。

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1. 当细胞达到80-90%融合时需要传代培养。1. 当细胞达到80-90%融合时需要传代培养。1. 当细胞达到当细胞达到80-90%融合时需要传代培养。融合时需要传代培养。
2. 提前准备好多聚赖氨酸（PLL，货号KL0403）或纤维粘连蛋白（BPF，货号KL8248）包被好的培养瓶。2. 提前准备好多聚赖氨酸（PLL，货号KL0403）或纤维粘连蛋白（BPF，货号KL8248）包被好的培养瓶。2. 提前准备好多聚赖氨酸（提前准备好多聚赖氨酸（PLL，货号，货号KL0403）或纤维粘连蛋白（）或纤维粘连蛋白（BPF，货号，货号KL8248）包被好的培养瓶。）包被好的培养瓶。
3. 将完全培养基，胰酶/EDTA消化液（T/E，货号KL0103），胰胰中和液（TNS，货号KL0113）和不含钙镁离子的DPBS（货号KL0303）加热至室温。我们不推荐用37度水浴加热试剂和培养基。3. 将完全培养基，胰酶/EDTA消化液（T/E，货号KL0103），胰胰中和液（TNS，货号KL0113）和不含钙镁离子的DPBS（货号KL0303）加热至室温。我们不推荐用37度水浴加热试剂和培养基。3. 将完全培养基，胰酶将完全培养基，胰酶/EDTA消化液（消化液（T/E，货号，货号KL0103），胰胰中和液（），胰胰中和液（TNS，货号，货号KL0113）和不含钙镁离子的）和不含钙镁离子的DPBS（货号（货号KL0303）加热至室温。我们不推荐用）加热至室温。我们不推荐用37度水浴加热试剂和培养基。度水浴加热试剂和培养基。
4. 用DPBS冲洗细胞。4. 用DPBS冲洗细胞。4. 用用DPBS冲洗细胞。冲洗细胞。
5. 以T-75培养瓶为例，向培养瓶中加入8mlDPBS，然后加入2ml胰酶/EDTA消化液。轻轻摇动培养瓶保证细胞被胰酶/EDTA消化液完全覆盖。将培养瓶置于37度培养箱1-2分钟直到细胞变圆。在显微镜下观察细胞形态变化。5. 以T-75培养瓶为例，向培养瓶中加入8mlDPBS，然后加入2ml胰酶/EDTA消化液。轻轻摇动培养瓶保证细胞被胰酶/EDTA消化液完全覆盖。将培养瓶置于37度培养箱1-2分钟直到细胞变圆。在显微镜下观察细胞形态变化。5. 以以T-75培养瓶为例，向培养瓶中加入培养瓶为例，向培养瓶中加入8mlDPBS，然后加入，然后加入2ml胰酶胰酶/EDTA消化液。轻轻摇动培养瓶保证细胞被胰酶消化液。轻轻摇动培养瓶保证细胞被胰酶/EDTA消化液完全覆盖。将培养瓶置于消化液完全覆盖。将培养瓶置于37度培养箱度培养箱1-2分钟直到细胞变圆。在显微镜下观察细胞形态变化。分钟直到细胞变圆。在显微镜下观察细胞形态变化。
6. 在消化期间，准备一支50ml离心管加入5ml胎牛血清（FBS，货号KL0500）。6. 在消化期间，准备一支50ml离心管加入5ml胎牛血清（FBS，货号KL0500）。6. 在消化期间，准备一支在消化期间，准备一支50ml离心管加入离心管加入5ml胎牛血清（胎牛血清（FBS，货号，货号KL0500）。）。
7. 将胰酶/EDTA消化液从培养瓶中吸出至50ml离心管中（一小部分细胞已消化下来），将培养瓶继续置于37度培养箱中1-2分钟（此时培养瓶中没有液体）。7. 将胰酶/EDTA消化液从培养瓶中吸出至50ml离心管中（一小部分细胞已消化下来），将培养瓶继续置于37度培养箱中1-2分钟（此时培养瓶中没有液体）。7. 将胰酶将胰酶/EDTA消化液从培养瓶中吸出至消化液从培养瓶中吸出至50ml离心管中（一小部分细胞已消化下来），将培养瓶继续置于离心管中（一小部分细胞已消化下来），将培养瓶继续置于37度培养箱中度培养箱中1-2分钟（此时培养瓶中没有液体）。分钟（此时培养瓶中没有液体）。
8. 在孵化结束时，轻轻拍打培养瓶侧面使细胞脱离表面。在显微镜下检查以确保所有细胞已脱离。8. 在孵化结束时，轻轻拍打培养瓶侧面使细胞脱离表面。在显微镜下检查以确保所有细胞已脱离。8. 在孵化结束时，轻轻拍打培养瓶侧面使细胞脱离表面。在显微镜下检查以确保所有细胞已脱离。在孵化结束时，轻轻拍打培养瓶侧面使细胞脱离表面。在显微镜下检查以确保所有细胞已脱离。
9. 向培养瓶中加入5ml胰酶中和液，将消化后的细胞转移至50ml离心管中。再加入5ml胰酶中和液冲洗培养瓶，以保证所有细胞被收集。9. 向培养瓶中加入5ml胰酶中和液，将消化后的细胞转移至50ml离心管中。再加入5ml胰酶中和液冲洗培养瓶，以保证所有细胞被收集。9. 向培养瓶中加入向培养瓶中加入5ml胰酶中和液，将消化后的细胞转移至胰酶中和液，将消化后的细胞转移至50ml离心管中。再加入离心管中。再加入5ml胰酶中和液冲洗培养瓶，以保证所有细胞被收集。胰酶中和液冲洗培养瓶，以保证所有细胞被收集。
10. 在显微镜下观察剩余细胞数量以确定是否收集成功，细胞数量应小于5%。10. 在显微镜下观察剩余细胞数量以确定是否收集成功，细胞数量应小于5%。10. 在显微镜下观察剩余细胞数量以确定是否收集成功，细胞数量应小于在显微镜下观察剩余细胞数量以确定是否收集成功，细胞数量应小于5%。。
11. 以1000转/分离心收取的细胞悬液5分钟，然后在培养基中重悬细胞。11. 以1000转/分离心收取的细胞悬液5分钟，然后在培养基中重悬细胞。11. 以以1000转转/分离心收取的细胞悬液分离心收取的细胞悬液5分钟，然后在培养基中重悬细胞。分钟，然后在培养基中重悬细胞。
12. 细胞计数，然后将细胞以推荐的细胞密度接种在包被好的培养瓶中。12. 细胞计数，然后将细胞以推荐的细胞密度接种在包被好的培养瓶中。12. 细胞计数，然后将细胞以推荐的细胞密度接种在包被好的培养瓶中。细胞计数，然后将细胞以推荐的细胞密度接种在包被好的培养瓶中。
原代细胞、细胞系与细胞株的区别原代细胞、细胞系与细胞株的区别原代细胞、细胞系与细胞株的区别原代细胞、细胞系与细胞株的区别原代细胞、细胞系与细胞株的区别原代细胞、细胞系与细胞株的区别


与细胞系相反，原代细胞是非常敏感的细胞，需要传统培养基之外的额外营养物质。为了优化原代细胞的存活和生长，需要针对每种细胞类型选择特定的培养基。例如，内皮细胞对营养的需求与上皮细胞或神经元有很大区别，因此需要特制的内皮细胞培养基。而传统的细胞培养基依靠血清提供生长因子、激素、脂质和其他的未知组分，以支持细胞的生长。但对于原代细胞，高血清水平可导致细胞分化，或促进污染细胞如成纤维细胞的生长。与细胞系相反，原代细胞是非常敏感的细胞，需要传统培养基之外的额外营养物质。为了优化原代细胞的存活和生长，需要针对每种细胞类型选择特定的培养基。例如，内皮细胞对营养的需求与上皮细胞或神经元有很大区别，因此需要特制的内皮细胞培养基。而传统的细胞培养基依靠血清提供生长因子、激素、脂质和其他的未知组分，以支持细胞的生长。但对于原代细胞，高血清水平可导致细胞分化，或促进污染细胞如成纤维细胞的生长。与细胞系相反，原代细胞是非常敏感的细胞，需要传统培养基之外的额外营养物质。为了优化原代细胞的存活和生长，需要针对每种细胞类型选择特定的培养基。例如，内皮细胞对营养的需求与上皮细胞或神经元有很大区别，因此需要特制的内皮细胞培养基。而传统的细胞培养基依靠血清提供生长因子、激素、脂质和其他的未知组分，以支持细胞的生长。但对于原代细胞，高血清水平可导致细胞分化，或促进污染细胞如成纤维细胞的生长。与细胞系相反，原代细胞是非常敏感的细胞，需要传统培养基之外的额外营养物质。为了优化原代细胞的存活和生长，需要针对每种细胞类型选择特定的培养基。例如，内皮细胞对营养的需求与上皮细胞或神经元有很大区别，因此需要特制的内皮细胞培养基。而传统的细胞培养基依靠血清提供生长因子、激素、脂质和其他的未知组分，以支持细胞的生长。但对于原代细胞，高血清水平可导致细胞分化，或促进污染细胞如成纤维细胞的生长。