多克隆抗体与单克隆抗体的区别
多克隆抗体与单克隆抗体的区别


多克隆抗体
多克隆抗体多克隆抗体
特点:
特点:
- 识别任一抗原上的多个表位。所得血清为异质性抗体混合物,其亲和力各有不同。
- 多克隆抗体主要由 IgG 亚类组成。
- 通常使用多肽免疫原制备以独有表位为靶标的多克隆抗体,尤其是针对高同源性的蛋白家族。
识别任一抗原上的多个表位。所得血清为异质性抗体混合物,其亲和力各有不同。识别任一抗原上的多个表位。所得血清为异质性抗体混合物,其亲和力各有不同。
多克隆抗体主要由 IgG 亚类组成。多克隆抗体主要由 IgG 亚类组成。
通常使用多肽免疫原制备以独有表位为靶标的多克隆抗体,尤其是针对高同源性的蛋白家族。
通常使用多肽免疫原制备以独有表位为靶标的多克隆抗体,尤其是针对高同源性的蛋白家族。
抗体制备:抗体制备:
- 制备成本低廉且制备速度较快。
- 制备过程比单克隆抗体简单。
优点:
制备成本低廉且制备速度较快。制备成本低廉且制备速度较快。
制备过程比单克隆抗体简单。
优点:制备过程比单克隆抗体简单。
优点:优点:多克隆抗体可识别任一抗原上的多个表位,因此具有以下优点:
- 高亲和性:由于靶蛋白上的多个表位能够结合不止一个抗体分子,多克隆抗体可放大低表达水平靶蛋白的信号。但是,这会影响定量实验(如流式细胞术实验)结果的准确性。
- 可识别多个表位,有利于免疫沉淀 (IP) 和染色质免疫沉淀 (ChIP) 实验获得更好的结果。
- 与单克隆抗体相比,对微小抗原变化(例如多态性、糖基化异质性或者轻微变性)的包容性更强。
- 可识别与免疫原蛋白质具有高度同源性的蛋白质,还可用于筛查非免疫原物种的靶蛋白。
- 通常是检测变性蛋白质的首选。
- 多表位通常可提升检测的稳定性。
缺点:
高亲和性:由于靶蛋白上的多个表位能够结合不止一个抗体分子,多克隆抗体可放大低表达水平靶蛋白的信号。但是,这会影响定量实验(如流式细胞术实验)结果的准确性。高亲和性:由于靶蛋白上的多个表位能够结合不止一个抗体分子,多克隆抗体可放大低表达水平靶蛋白的信号。但是,这会影响定量实验(如流式细胞术实验)结果的准确性。
可识别多个表位,有利于免疫沉淀 (IP) 和染色质免疫沉淀 (ChIP) 实验获得更好的结果。可识别多个表位,有利于免疫沉淀 (IP) 和染色质免疫沉淀 (ChIP) 实验获得更好的结果。
与单克隆抗体相比,对微小抗原变化(例如多态性、糖基化异质性或者轻微变性)的包容性更强。与单克隆抗体相比,对微小抗原变化(例如多态性、糖基化异质性或者轻微变性)的包容性更强。
可识别与免疫原蛋白质具有高度同源性的蛋白质,还可用于筛查非免疫原物种的靶蛋白。可识别与免疫原蛋白质具有高度同源性的蛋白质,还可用于筛查非免疫原物种的靶蛋白。
通常是检测变性蛋白质的首选。通常是检测变性蛋白质的首选。
多表位通常可提升检测的稳定性。
缺点:多表位通常可提升检测的稳定性。
缺点:缺点:
- 易产生批次间差异。
- 产生大量非特异性抗体,可能会在某些应用中产生背景信号。
- 由于具有多个表位,检测免疫原序列的交叉反应性非常重要。
- 不适用于探测抗原的特定结构域,因为抗血清通常会识别多个结构域。
易产生批次间差异。易产生批次间差异。
产生大量非特异性抗体,可能会在某些应用中产生背景信号。产生大量非特异性抗体,可能会在某些应用中产生背景信号。
由于具有多个表位,检测免疫原序列的交叉反应性非常重要。由于具有多个表位,检测免疫原序列的交叉反应性非常重要。
不适用于探测抗原的特定结构域,因为抗血清通常会识别多个结构域。不适用于探测抗原的特定结构域,因为抗血清通常会识别多个结构域。
单克隆抗体
特点:
单克隆抗体
特点:
易产生批次间差异。易产生批次间差异。仅由一种抗体亚型组成(例如 IgG1、IgG2、IgG3)。如需使用二抗进行检测,应针对正确的亚类选择抗体。