兔源性成分(Rabbit)核酸检测试剂盒(PCR法)具有下列特点：兔源性成分(Rabbit)核酸检测试剂盒(PCR法)具有下列特点：兔源性成分(Rabbit)核酸检测试剂盒(PCR法)兔源性成分(Rabbit)核酸检测试剂盒(PCR法)兔源性成分(Rabbit)核酸检测试剂盒(PCR法)兔源性成分(Rabbit)核酸检测试剂盒(PCR法)兔源性成分兔源性成分(Rabbit)
核酸检测试剂盒核酸检测试剂盒
(PCR(PCR
法法
))
具有下列特点：具有下列特点：具有下列特点：具有下列特点：
1. 即开即用，用户只需要提供病毒 RNA 模板。1. 即开即用，用户只需要提供病毒 RNA 模板。1. 即开即用，用户只需要提供病毒 RNA 模板。1. 即开即用，用户只需要提供病毒 RNA 模板。1.
即开即用，用户只需要提供病毒 即开即用，用户只需要提供病毒
RNA RNA
模板。模板。
2. 两管式 RT-PCR，一次 RT 反应产物可以作为多次 PCR 的模板。本试剂盒提供 10 次的 RT 反应试剂和 50 次的 PCR 试剂。2. 两管式 RT-PCR，一次 RT 反应产物可以作为多次 PCR 的模板。本试剂盒提供 10 次的 RT 反应试剂和 50 次的 PCR 试剂。2. 两管式 RT-PCR，一次 RT 反应产物可以作为多次 PCR 的模板。本试剂盒提供 10 次的 RT 反应试剂和 50 次的 PCR 试剂。2. 两管式 RT-PCR，一次 RT 反应产物可以作为多次 PCR 的模板。本试剂盒提供 10 次的 RT 反应试剂和 50 次的 PCR 试剂。2.
两管式 两管式
RT-PCRRT-PCR
，一次 ，一次
RT RT
反应产物可以作为多次 反应产物可以作为多次
PCR PCR
的模板。本试剂盒提供 的模板。本试剂盒提供
10 10
次的 次的
RT RT
反应试剂和 反应试剂和
50 50
次的 次的
PCR PCR
试剂。试剂。
3. 引物经过优化，特异性高，引物是根据基因的保守区域设计，适用于所有强、中、弱新城疫毒株，产物长度为 421 bp。3. 引物经过优化，特异性高，引物是根据基因的保守区域设计，适用于所有强、中、弱新城疫毒株，产物长度为 421 bp。3. 引物经过优化，特异性高，引物是根据基因的保守区域设计，适用于所有强、中、弱新城疫毒株，产物长度为 421 bp。3. 引物经过优化，特异性高，引物是根据基因的保守区域设计，适用于所有强、中、弱新城疫毒株，产物长度为 421 bp。3.
引物经过优化，特异性高，引物是根据基因的保守区域设计，适用于所有强、中、弱新城疫毒株，产物长度为 引物经过优化，特异性高，引物是根据基因的保守区域设计，适用于所有强、中、弱新城疫毒株，产物长度为
421 bp421 bp
。。
4. PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳。4. PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳。4. PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳。4. PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳。4. PCR mix
中含上样染料，中含上样染料，
PCR PCR
后可以直接上样电泳。后可以直接上样电泳。
兔源性成分(Rabbit)核酸检测试剂盒(PCR法)特点优势：兔源性成分(Rabbit)核酸检测试剂盒(PCR法)特点优势：兔源性成分(Rabbit)核酸检测试剂盒(PCR法)兔源性成分(Rabbit)核酸检测试剂盒(PCR法)兔源性成分(Rabbit)核酸检测试剂盒(PCR法)兔源性成分(Rabbit)核酸检测试剂盒(PCR法)兔源性成分兔源性成分(Rabbit)
核酸检测试剂盒核酸检测试剂盒
(PCR(PCR
法法
))
特点优势：特点优势：特点优势：特点优势：
1. 特异性：所有产品使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。 1. 特异性：所有产品使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。 1. 特异性：所有产品使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。 1. 特异性：所有产品使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。 1.
特异性：所有产品使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过特异性：所有产品使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过
GenBankGenBank
及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到
100%100%
。。
2. 重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。 2. 重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。 2. 重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。 2. 重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。 2.
重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为
100%100%
。。
3. 灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。 3. 灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。 3. 灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。 3. 灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。 3.
灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到
103cfu/ml103cfu/ml
时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4. 实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种呼吸道及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。 4. 实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种呼吸道及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。 4. 实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种呼吸道及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。 4. 实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种呼吸道及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。 4.
实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的
1717
种呼吸道及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为种呼吸道及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为
3-43-4
个小时。个小时。
5. 优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。 5. 优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。 5. 优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。 5. 优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。 5.
优势优势
11
：序列资源丰富，除：序列资源丰富，除
GenBankGenBank
公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。
6. 优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。 6. 优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。 6. 优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。 6. 优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。 6.
优势优势
22
：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了
2020
余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及
4040
余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。
兔源性成分(Rabbit)核酸检测试剂盒(PCR法)性能指标：兔源性成分(Rabbit)核酸检测试剂盒(PCR法)性能指标：兔源性成分(Rabbit)核酸检测试剂盒(PCR法)兔源性成分(Rabbit)核酸检测试剂盒(PCR法)兔源性成分(Rabbit)核酸检测试剂盒(PCR法)兔源性成分(Rabbit)核酸检测试剂盒(PCR法)兔源性成分兔源性成分(Rabbit)
核酸检测试剂盒核酸检测试剂盒
(PCR(PCR
法法
))
性能指标：性能指标：性能指标：性能指标：
1. 试剂盒检测特异性为100%1. 试剂盒检测特异性为100%1. 试剂盒检测特异性为100%1. 试剂盒检测特异性为100%1.
试剂盒检测特异性为试剂盒检测特异性为
100%100%
2. 检测试剂盒重现性为100%2. 检测试剂盒重现性为100%2. 检测试剂盒重现性为100%2. 检测试剂盒重现性为100%2.
检测试剂盒重现性为检测试剂盒重现性为
100%100%
3. 灵敏度可达到103/ml3. 灵敏度可达到103/ml3. 灵敏度可达到103/ml3. 灵敏度可达到103/ml3.
灵敏度可达到灵敏度可达到
103/ml103/ml
4. 有效期为6个月4. 有效期为6个月4. 有效期为6个月4. 有效期为6个月4.
有效期为有效期为
66
个月个月
规格及成分规格及成分规格及成分规格及成分规格及成分规格及成分规格及成分规格及成分规格及成分规格及成分规格及成分规格及成分规格及成分规格及成分规格及成分
| 成分 | 编号 | 50 次纸盒包装 |
| MMLV 逆转录酶 (含 RI) | 80206A | 20 μL |
| RT Buffer（含 dNTP） | 60906C | 60 uL |
| PCR Mix 3.0（含染料） | 90805 | 1.5 mL |
| ND 阳性对照 | 896897 | 50 μL |
| ND 专一性引物一（正向引物） | yw896 | 50 μL |
| ND 专一性引物二（反向引物） | yw897 | 50 μL |
| RNase-free 水 | 80403 | 1 mL |
| 使用手册 | 11-171201sc | 1 份 |
| 成分 | 编号 | 50 次纸盒包装 |
| MMLV 逆转录酶 (含 RI) | 80206A | 20 μL |
| RT Buffer（含 dNTP） | 60906C | 60 uL |
| PCR Mix 3.0（含染料） | 90805 | 1.5 mL |
| ND 阳性对照 | 896897 | 50 μL |
| ND 专一性引物一（正向引物） | yw896 | 50 μL |
| ND 专一性引物二（反向引物） | yw897 | 50 μL |
| RNase-free 水 | 80403 | 1 mL |
| 使用手册 | 11-171201sc | 1 份 |
| 成分 | 编号 | 50 次纸盒包装 |
成分 | 成分成分成分成分成分成分成分成分成分成分
编号 | 编号编号编号编号编号编号编号编号编号编号
50 次纸盒包装 | 50 次纸盒包装50 次纸盒包装50 次纸盒包装50 次纸盒包装50 次纸盒包装50 次纸盒包装50 次纸盒包装50 次纸盒包装50 次纸盒包装50 次纸盒包装
| MMLV 逆转录酶 (含 RI) | 80206A | 20 μL |
MMLV 逆转录酶 (含 RI) | MMLV 逆转录酶 (含 RI)MMLV 逆转录酶 (含 RI)MMLV 逆转录酶 (含 RI)MMLV 逆转录酶 (含 RI)MMLV 逆转录酶 (含 RI)MMLV 逆转录酶 (含 RI)MMLV 逆转录酶 (含 RI)MMLV 逆转录酶 (含 RI)
80206A | 80206A 80206A 80206A 80206A 80206A 80206A 80206A 80206A
20 μL | 20 μL20 μL20 μL20 μL20 μL20 μL20 μL20 μL
| RT Buffer（含 dNTP） | 60906C | 60 uL |
RT Buffer（含 dNTP） | RT Buffer（含 dNTP）RT Buffer（含 dNTP）RT Buffer（含 dNTP）RT Buffer（含 dNTP）RT Buffer（含 dNTP）RT Buffer（含 dNTP）RT Buffer（含 dNTP）RT Buffer（含 dNTP）
60906C | 60906C60906C60906C60906C60906C60906C60906C60906C
60 uL | 60 uL60 uL60 uL60 uL60 uL60 uL60 uL60 uL
| PCR Mix 3.0（含染料） | 90805 | 1.5 mL |
PCR Mix 3.0（含染料） | PCR Mix 3.0（含染料）PCR Mix 3.0（含染料）PCR Mix 3.0（含染料）PCR Mix 3.0（含染料）PCR Mix 3.0（含染料）PCR Mix 3.0（含染料）PCR Mix 3.0（含染料）PCR Mix 3.0（含染料）
90805 | 9080590805908059080590805908059080590805
1.5 mL | 1.5 mL1.5 mL1.5 mL1.5 mL1.5 mL1.5 mL1.5 mL1.5 mL
| ND 阳性对照 | 896897 | 50 μL |
ND 阳性对照 | ND 阳性对照ND 阳性对照ND 阳性对照ND 阳性对照ND 阳性对照ND 阳性对照ND 阳性对照ND 阳性对照
896897 | 896897896897896897896897896897896897896897896897
50 μL | 50 μL50 μL50 μL50 μL50 μL50 μL50 μL50 μL
| ND 专一性引物一（正向引物） | yw896 | 50 μL |
ND 专一性引物一（正向引物） | ND 专一性引物一（正向引物）ND 专一性引物一（正向引物）ND 专一性引物一（正向引物）ND 专一性引物一（正向引物）ND 专一性引物一（正向引物）ND 专一性引物一（正向引物）ND 专一性引物一（正向引物）ND 专一性引物一（正向引物）
yw896 | yw896yw896yw896yw896yw896yw896yw896yw896
50 μL | 50 μL50 μL50 μL50 μL50 μL50 μL50 μL50 μL
| ND 专一性引物二（反向引物） | yw897 | 50 μL |
ND 专一性引物二（反向引物） | ND 专一性引物二（反向引物）ND 专一性引物二（反向引物）ND 专一性引物二（反向引物）ND 专一性引物二（反向引物）ND 专一性引物二（反向引物）ND 专一性引物二（反向引物）ND 专一性引物二（反向引物）ND 专一性引物二（反向引物）
yw897 | yw897yw897yw897yw897yw897yw897yw897yw897
50 μL | 50 μL50 μL50 μL50 μL50 μL50 μL50 μL50 μL
| RNase-free 水 | 80403 | 1 mL |
RNase-free 水 | RNase-free 水RNase-free 水RNase-free 水RNase-free 水RNase-free 水RNase-free 水RNase-free 水RNase-free 水
80403 | 8040380403804038040380403804038040380403
1 mL | 1 mL1 mL1 mL1 mL1 mL1 mL1 mL1 mL
| 使用手册 | 11-171201sc | 1 份 |
使用手册 | 使用手册使用手册使用手册使用手册使用手册使用手册使用手册使用手册
11-171201sc | 11-171201sc11-171201sc11-171201sc11-171201sc11-171201sc11-171201sc11-171201sc11-171201sc
1 份 | 1 份1 份1 份1 份1 份1 份1 份1 份
运输及保存:低温运输,-20℃保存, 保存期限为 6 个月。运输及保存:低温运输,-20℃保存, 保存期限为 6 个月。运输及保存:低温运输,-20℃保存, 保存期限为 6 个月。运输及保存:低温运输,-20℃保存, 保存期限为 6 个月。运输及保存:运输及保存:运输及保存:运输及保存:运输及保存:运输及保存:运输及保存:运输及保存:运输及保存:运输及保存运输及保存:
低温运输,-20℃保存, 保存期限为 6 个月。低温运输,-20℃保存, 保存期限为 6 个月。低温运输,-20℃保存, 保存期限为 6 个月。低温运输,-20℃保存, 保存期限为 6 个月。低温运输,-20℃保存, 保存期限为 6 个月。低温运输,-20℃保存, 保存期限为 6 个月。低温运输,-20℃保存, 保存期限为 6 个月。低温运输低温运输,-20℃保存, 保存期限为 6 个月。
自备试剂：样品 RNA。自备试剂：样品 RNA。自备试剂：样品 RNA。自备试剂：样品 RNA。自备试剂：自备试剂：自备试剂：自备试剂：自备试剂：自备试剂：自备试剂：自备试剂：自备试剂：自备试剂：自备试剂：
样品 RNA。样品 RNA。样品 RNA。样品 RNA。样品 RNA。样品 RNA。样品 RNA。样品样品 RNA。
兔源性成分(Rabbit)核酸检测试剂盒(PCR法)使用方法:兔源性成分(Rabbit)核酸检测试剂盒(PCR法)使用方法:兔源性成分(Rabbit)核酸检测试剂盒(PCR法)使用方法:兔源性成分(Rabbit)核酸检测试剂盒(PCR法)使用方法:兔源性成分(Rabbit)核酸检测试剂盒(PCR法)兔源性成分(Rabbit)核酸检测试剂盒(PCR法)兔源性成分(Rabbit)核酸检测试剂盒(PCR法)兔源性成分(Rabbit)核酸检测试剂盒(PCR法)兔源性成分兔源性成分(Rabbit)
核酸检测试剂盒核酸检测试剂盒
(PCR(PCR
法法
))
使用方法:使用方法:使用方法:使用方法:使用方法:使用方法:使用方法:使用方法:使用方法:使用方法使用方法:
一、样品 RNA 的制备一、样品 RNA 的制备一、样品 RNA 的制备一、样品 RNA 的制备一、样品 RNA 的制备一、样品 RNA 的制备一、样品 RNA 的制备一、样品 RNA 的制备一、样品 RNA 的制备一、样品 RNA 的制备一、样品 RNA 的制备一、样品 RNA 的制备一、样品 RNA 的制备一、样品一、样品 RNA 的制备
1、用自选方法抽提病毒样品 RNA。注意：可以选用本公司生产的一管式病毒 RNAout1、用自选方法抽提病毒样品 RNA。注意：可以选用本公司生产的一管式病毒 RNAout1、用自选方法抽提病毒样品 RNA。注意：可以选用本公司生产的一管式病毒 RNAout1、用自选方法抽提病毒样品 RNA。注意：可以选用本公司生产的一管式病毒 RNAout1、用自选方法抽提病毒样品 RNA。注意：可以选用本公司生产的一管式病毒 RNAout1、用自选方法抽提病毒样品 RNA。注意：可以选用本公司生产的一管式病毒 RNAout1、用自选方法抽提病毒样品 RNA。注意：可以选用本公司生产的一管式病毒 RNAout1、用自选方法抽提病毒样品 RNA。注意：可以选用本公司生产的一管式病毒 RNAout1、用自选方法抽提病毒样品 RNA。注意：可以选用本公司生产的一管式病毒 RNAout1、用自选方法抽提病毒样品 RNA。注意：可以选用本公司生产的一管式病毒 RNAout1、用自选方法抽提病毒样品 RNA。注意：可以选用本公司生产的一管式病毒 RNAout1、用自选方法抽提病毒样品 RNA。注意：可以选用本公司生产的一管式病毒 RNAout
2、或柱式病毒 RNAout。2、或柱式病毒 RNAout。2、或柱式病毒 RNAout。2、或柱式病毒 RNAout。2、或柱式病毒 RNAout。2、或柱式病毒 RNAout。2、或柱式病毒 RNAout。2、或柱式病毒 RNAout。2、或柱式病毒 RNAout。2、或柱式病毒 RNAout。2、或柱式病毒 RNAout。2、或柱式病毒 RNAout。
二：RT（逆转录）反应合成 cDNA二：RT（逆转录）反应合成 cDNA二：RT（逆转录）反应合成 cDNA二：RT（逆转录）反应合成 cDNA二：RT（逆转录）反应合成 cDNA二：RT（逆转录）反应合成 cDNA二：RT（逆转录）反应合成 cDNA二：RT（逆转录）反应合成 cDNA二：RT（逆转录）反应合成 cDNA二：RT（逆转录）反应合成 cDNA二：RT（逆转录）反应合成 cDNA二：RT（逆转录）反应合成 cDNA二：RT（逆转录）反应合成 cDNA二：二：RT（逆转录）反应合成 cDNA
1. 按下表配制 RT 反应体系（20 μL 体系）:1. 按下表配制 RT 反应体系（20 μL 体系）:1. 按下表配制 RT 反应体系（20 μL 体系）:1. 按下表配制 RT 反应体系（20 μL 体系）:1. 按下表配制 RT 反应体系（20 μL 体系）:1. 按下表配制 RT 反应体系（20 μL 体系）:1. 按下表配制 RT 反应体系（20 μL 体系）:1. 按下表配制 RT 反应体系（20 μL 体系）:1. 按下表配制 RT 反应体系（20 μL 体系）:1. 按下表配制 RT 反应体系（20 μL 体系）:1. 按下表配制 RT 反应体系（20 μL 体系）:1. 按下表配制 RT 反应体系（20 μL 体系）:
| RNA 模板 | 0.01pg-500 ng
（如果丌知道浓度则用 1-10 μL） |
| ND 专一性引物二（反向引物） | 2 μL |
| RNase-free 水 | 补水到 12 μL |
| RNA 模板 | 0.01pg-500 ng
（如果丌知道浓度则用 1-10 μL） |
| ND 专一性引物二（反向引物） | 2 μL |
| RNase-free 水 | 补水到 12 μL |
| RNA 模板 | 0.01pg-500 ng
（如果丌知道浓度则用 1-10 μL） |
RNA 模板 | RNA 模板RNA 模板RNA 模板RNA 模板RNA 模板RNA 模板RNA 模板RNA 模板
0.01pg-500 ng
（如果丌知道浓度则用 1-10 μL） | 0.01pg-500 ng0.01pg-500 ng0.01pg-500 ng0.01pg-500 ng0.01pg-500 ng0.01pg-500 ng0.01pg-500 ng0.01pg-500 ng
（如果丌知道浓度则用 1-10 μL）（如果丌知道浓度则用 1-10 μL）（如果丌知道浓度则用 1-10 μL）（如果丌知道浓度则用 1-10 μL）（如果丌知道浓度则用 1-10 μL）（如果丌知道浓度则用 1-10 μL）（如果丌知道浓度则用 1-10 μL）（如果丌知道浓度则用 1-10 μL）
| ND 专一性引物二（反向引物） | 2 μL |
ND 专一性引物二（反向引物） | ND 专一性引物二（反向引物）ND 专一性引物二（反向引物）ND 专一性引物二（反向引物）ND 专一性引物二（反向引物）ND 专一性引物二（反向引物）ND 专一性引物二（反向引物）ND 专一性引物二（反向引物）ND 专一性引物二（反向引物）
2 μL | 2 μL2 μL2 μL2 μL2 μL2 μL2 μL2 μL
| RNase-free 水 | 补水到 12 μL |
RNase-free 水 | RNase-free 水RNase-free 水RNase-free 水RNase-free 水RNase-free 水RNase-free 水RNase-free 水RNase-free 水
补水到 12 μL | 补水到 12 μL补水到 12 μL补水到 12 μL补水到 12 μL补水到 12 μL补水到 12 μL补水到 12 μL补水到 12 μL
2. 70℃保温 5 分钟变性模板后立即冰浴。2. 70℃保温 5 分钟变性模板后立即冰浴。2. 70℃保温 5 分钟变性模板后立即冰浴。2. 70℃保温 5 分钟变性模板后立即冰浴。2. 70℃保温 5 分钟变性模板后立即冰浴。2. 70℃保温 5 分钟变性模板后立即冰浴。2. 70℃保温 5 分钟变性模板后立即冰浴。2. 70℃保温 5 分钟变性模板后立即冰浴。2. 70℃保温 5 分钟变性模板后立即冰浴。2. 70℃保温 5 分钟变性模板后立即冰浴。2. 70℃保温 5 分钟变性模板后立即冰浴。2. 70℃保温 5 分钟变性模板后立即冰浴。
3. 严格按顺序加入 6μL RT Buffer（含 dNTP）和 2μL MMLV 逆转录酶（含 RI），3. 严格按顺序加入 6μL RT Buffer（含 dNTP）和 2μL MMLV 逆转录酶（含 RI），3. 严格按顺序加入 6μL RT Buffer（含 dNTP）和 2μL MMLV 逆转录酶（含 RI），3. 严格按顺序加入 6μL RT Buffer（含 dNTP）和 2μL MMLV 逆转录酶（含 RI），3. 严格按顺序加入 6μL RT Buffer（含 dNTP）和 2μL MMLV 逆转录酶（含 RI），3. 严格按顺序加入 6μL RT Buffer（含 dNTP）和 2μL MMLV 逆转录酶（含 RI），3. 严格按顺序加入 6μL RT Buffer（含 dNTP）和 2μL MMLV 逆转录酶（含 RI），3. 严格按顺序加入 6μL RT Buffer（含 dNTP）和 2μL MMLV 逆转录酶（含 RI），3. 严格按顺序加入 6μL RT Buffer（含 dNTP）和 2μL MMLV 逆转录酶（含 RI），3. 严格按顺序加入 6μL RT Buffer（含 dNTP）和 2μL MMLV 逆转录酶（含 RI），3. 严格按顺序加入 6μL RT Buffer（含 dNTP）和 2μL MMLV 逆转录酶（含 RI），3. 严格按顺序加入 6μL RT Buffer（含 dNTP）和 2μL MMLV 逆转录酶（含 RI），
反应终体积为 20μL。反应终体积为 20μL。反应终体积为 20μL。反应终体积为 20μL。反应终体积为 20μL。反应终体积为 20μL。反应终体积为 20μL。反应终体积为 20μL。反应终体积为 20μL。反应终体积为 20μL。反应终体积为 20μL。反应终体积为反应终体积为 20μL。
4. 42℃保温 60 分钟。此步为 RT 反应。4. 42℃保温 60 分钟。此步为 RT 反应。4. 42℃保温 60 分钟。此步为 RT 反应。4. 42℃保温 60 分钟。此步为 RT 反应。4. 42℃保温 60 分钟。此步为 RT 反应。4. 42℃保温 60 分钟。此步为 RT 反应。4. 42℃保温 60 分钟。此步为 RT 反应。4. 42℃保温 60 分钟。此步为 RT 反应。4. 42℃保温 60 分钟。此步为 RT 反应。4. 42℃保温 60 分钟。此步为 RT 反应。4. 42℃保温 60 分钟。此步为 RT 反应。4. 42℃保温 60 分钟。此步为 RT 反应。
5. 70℃保温 10 分钟以终止反应，然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作为 PCR 模板使用，丌需要纯化。5. 70℃保温 10 分钟以终止反应，然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作为 PCR 模板使用，丌需要纯化。5. 70℃保温 10 分钟以终止反应，然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作为 PCR 模板使用，丌需要纯化。5. 70℃保温 10 分钟以终止反应，然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作为 PCR 模板使用，丌需要纯化。5. 70℃保温 10 分钟以终止反应，然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作为 PCR 模板使用，丌需要纯化。5. 70℃保温 10 分钟以终止反应，然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作为 PCR 模板使用，丌需要纯化。5. 70℃保温 10 分钟以终止反应，然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作为 PCR 模板使用，丌需要纯化。5. 70℃保温 10 分钟以终止反应，然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作为 PCR 模板使用，丌需要纯化。5. 70℃保温 10 分钟以终止反应，然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作为 PCR 模板使用，丌需要纯化。5. 70℃保温 10 分钟以终止反应，然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作为 PCR 模板使用，丌需要纯化。5. 70℃保温 10 分钟以终止反应，然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作为 PCR 模板使用，丌需要纯化。5. 70℃保温 10 分钟以终止反应，然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作为 PCR 模板使用，丌需要纯化。
三、PCR（60 μL 体系）三、PCR（60 μL 体系）三、PCR（60 μL 体系）三、PCR（60 μL 体系）三、PCR（60 μL 体系）三、PCR（60 μL 体系）三、PCR（60 μL 体系）三、PCR（60 μL 体系）三、PCR（60 μL 体系）三、PCR（60 μL 体系）三、PCR（60 μL 体系）三、PCR（60 μL 体系）三、PCR（60 μL 体系）三、三、PCR（60 μL 体系）
1、在 PCR 管中加入下列成分：1、在 PCR 管中加入下列成分：1、在 PCR 管中加入下列成分：1、在 PCR 管中加入下列成分：1、在 PCR 管中加入下列成分：1、在 PCR 管中加入下列成分：1、在 PCR 管中加入下列成分：1、在 PCR 管中加入下列成分：1、在 PCR 管中加入下列成分：1、在 PCR 管中加入下列成分：1、在 PCR 管中加入下列成分：1、在 PCR 管中加入下列成分：
| 成 份 | 样品 | ND 阳性对照 | 阴性对照 |
| PCR MagicMix 3.0 | 30 μL | 30 μL | 30 μL |
| cDNA 样品（上步的 RT 反应液） | 1-5 uL | 无 | 无 |
| ND 阳性对照 | 无 | 2 μL | 无 |
| ND 专一性引物一（正向引物） | 1 μL | 1 μL | 1 μL |
| ND 专一性引物二（反向引物） | 1 μL | 1 μL | 1 μL |
| 补水到 | 60 uL |
| 成 份 | 样品 | ND 阳性对照 | 阴性对照 |
| PCR MagicMix 3.0 | 30 μL | 30 μL | 30 μL |
| cDNA 样品（上步的 RT 反应液） | 1-5 uL | 无 | 无 |
| ND 阳性对照 | 无 | 2 μL | 无 |
| ND 专一性引物一（正向引物） | 1 μL | 1 μL | 1 μL |
| ND 专一性引物二（反向引物） | 1 μL | 1 μL | 1 μL |
| 补水到 | 60 uL |
| 成 份 | 样品 | ND 阳性对照 | 阴性对照 |
成 份 | 成 份成 份成 份成 份成 份成 份成 份成 份成 份成 份
样品 | 样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品
ND 阳性对照 | ND 阳性对照ND 阳性对照ND 阳性对照ND 阳性对照ND 阳性对照ND 阳性对照ND 阳性对照ND 阳性对照ND 阳性对照ND 阳性对照
阴性对照 | 阴性对照阴性对照阴性对照阴性对照阴性对照阴性对照阴性对照阴性对照阴性对照阴性对照
| PCR MagicMix 3.0 | 30 μL | 30 μL | 30 μL |
PCR MagicMix 3.0 | PCR MagicMix 3.0PCR MagicMix 3.0PCR MagicMix 3.0PCR MagicMix 3.0PCR MagicMix 3.0PCR MagicMix 3.0PCR MagicMix 3.0PCR MagicMix 3.0
30 μL | 30 μL 30 μL 30 μL 30 μL 30 μL 30 μL 30 μL 30 μL
30 μL | 30 μL30 μL30 μL30 μL30 μL30 μL30 μL30 μL
30 μL | 30 μL30 μL30 μL30 μL30 μL30 μL30 μL30 μL
| cDNA 样品（上步的 RT 反应液） | 1-5 uL | 无 | 无 |
cDNA 样品（上步的 RT 反应液） | cDNA 样品（上步的 RT 反应液）cDNA 样品（上步的 RT 反应液）cDNA 样品（上步的 RT 反应液）cDNA 样品（上步的 RT 反应液）cDNA 样品（上步的 RT 反应液）cDNA 样品（上步的 RT 反应液）cDNA 样品（上步的 RT 反应液）cDNA 样品（上步的 RT 反应液）
1-5 uL | 1-5 uL1-5 uL1-5 uL1-5 uL1-5 uL1-5 uL1-5 uL1-5 uL
无 | 无 无 无 无 无 无 无 无
无 | 无无无无无无无无
| ND 阳性对照 | 无 | 2 μL | 无 |
ND 阳性对照 | ND 阳性对照ND 阳性对照ND 阳性对照ND 阳性对照ND 阳性对照ND 阳性对照ND 阳性对照ND 阳性对照
无 | 无无无无无无无无
2 μL | 2 μL2 μL2 μL2 μL2 μL2 μL2 μL2 μL
无 | 无无无无无无无无
| ND 专一性引物一（正向引物） | 1 μL | 1 μL | 1 μL |
ND 专一性引物一（正向引物） | ND 专一性引物一（正向引物）ND 专一性引物一（正向引物）ND 专一性引物一（正向引物）ND 专一性引物一（正向引物）ND 专一性引物一（正向引物）ND 专一性引物一（正向引物）ND 专一性引物一（正向引物）ND 专一性引物一（正向引物）
1 μL | 1 μL1 μL1 μL1 μL1 μL1 μL1 μL1 μL
1 μL | 1 μL1 μL1 μL1 μL1 μL1 μL1 μL1 μL
1 μL | 1 μL1 μL1 μL1 μL1 μL1 μL1 μL1 μL
| ND 专一性引物二（反向引物） | 1 μL | 1 μL | 1 μL |
ND 专一性引物二（反向引物） | ND 专一性引物二（反向引物）ND 专一性引物二（反向引物）ND 专一性引物二（反向引物）ND 专一性引物二（反向引物）ND 专一性引物二（反向引物）ND 专一性引物二（反向引物）ND 专一性引物二（反向引物）ND 专一性引物二（反向引物）
1 μL | 1 μL1 μL1 μL1 μL1 μL1 μL1 μL1 μL
1 μL | 1 μL1 μL1 μL1 μL1 μL1 μL1 μL1 μL
1 μL | 1 μL1 μL1 μL1 μL1 μL1 μL1 μL1 μL
| 补水到 | 60 uL |
补水到 | 补水到补水到补水到补水到补水到补水到补水到补水到
60 uL | 60 uL60 uL60 uL60 uL60 uL60 uL60 uL60 uL
2. PCR 反应参数：2. PCR 反应参数：2. PCR 反应参数：2. PCR 反应参数：2. PCR 反应参数：2. PCR 反应参数：2. PCR 反应参数：2. PCR 反应参数：2. PCR 反应参数：2. PCR 反应参数：2. PCR 反应参数：2. PCR 反应参数：2. PCR 反应参数：2. PCR 反应参数：
| 过程 | 温度 | 时间 | 其他 |
| 预变性 | 95℃ | 5 min | |
PCR 反应
（40个循环）
| 95℃ | 30 s | |
| 50℃ | 30 s |
| 72℃ | 40 s |
| 最后延伸 | 72℃ | 5 min |
| 过程 | 温度 | 时间 | 其他 |
| 预变性 | 95℃ | 5 min | |
PCR 反应
（40个循环）
| 95℃ | 30 s | |
| 50℃ | 30 s |
| 72℃ | 40 s |
| 最后延伸 | 72℃ | 5 min |
| 过程 | 温度 | 时间 | 其他 |
过程 | 过程过程过程过程过程过程过程过程过程过程
温度 | 温度温度温度温度温度温度温度温度温度温度
时间 | 时间时间时间时间时间时间时间时间时间时间
其他 | 其他其他其他其他其他其他其他其他其他其他
| 预变性 | 95℃ | 5 min | |
预变性 | 预变性预变性预变性预变性预变性预变性预变性预变性
95℃ | 95℃95℃95℃95℃95℃95℃95℃95℃
5 min | 5 min5 min5 min5 min5 min5 min5 min5 min5 min
| PCR 反应
（40个循环）
| 95℃ | 30 s | |
PCR 反应
（40个循环）
| PCR 反应PCR 反应PCR 反应PCR 反应PCR 反应PCR 反应PCR 反应PCR 反应PCR 反应
（40个循环）（40个循环）（40个循环）（40个循环）（40个循环）（40个循环）（40个循环）（40个循环）（40个循环）
95℃ | 95℃95℃95℃95℃95℃95℃95℃95℃
30 s | 30 s30 s30 s30 s30 s30 s30 s30 s30 s
| | 50℃ | 30 s |
50℃ | 50℃50℃50℃50℃50℃50℃50℃50℃
30 s | 30 s30 s30 s30 s30 s30 s30 s30 s30 s
| 72℃ | 40 s |
72℃ | 72℃ 72℃ 72℃ 72℃ 72℃ 72℃ 72℃ 72℃
40 s | 40 s 40 s 40 s 40 s 40 s 40 s 40 s 40 s 40 s
| 最后延伸 | 72℃ | 5 min |
最后延伸 | 最后延伸最后延伸最后延伸最后延伸最后延伸最后延伸最后延伸最后延伸最后延伸
72℃ | 72℃ 72℃ 72℃ 72℃ 72℃ 72℃ 72℃ 72℃
5 min | 5 min5 min5 min5 min5 min5 min5 min5 min
四、电泳检测四、电泳检测四、电泳检测四、电泳检测四、电泳检测四、电泳检测四、电泳检测四、电泳检测四、电泳检测四、电泳检测四、电泳检测四、电泳检测四、电泳检测四、电泳检测四、电泳检测四、电泳检测
1、取 10-20μL PCR 产物直接在 PAGE 或琼脂糖凝胶上电泳，正确的扩增产物的大小为421 bp。1、取 10-20μL PCR 产物直接在 PAGE 或琼脂糖凝胶上电泳，正确的扩增产物的大小为421 bp。1、取 10-20μL PCR 产物直接在 PAGE 或琼脂糖凝胶上电泳，正确的扩增产物的大小为421 bp。1、取 10-20μL PCR 产物直接在 PAGE 或琼脂糖凝胶上电泳，正确的扩增产物的大小为421 bp。1、取 10-20μL PCR 产物直接在 PAGE 或琼脂糖凝胶上电泳，正确的扩增产物的大小为421 bp。1、取 10-20μL PCR 产物直接在 PAGE 或琼脂糖凝胶上电泳，正确的扩增产物的大小为421 bp。1、取 10-20μL PCR 产物直接在 PAGE 或琼脂糖凝胶上电泳，正确的扩增产物的大小为421 bp。1、取 10-20μL PCR 产物直接在 PAGE 或琼脂糖凝胶上电泳，正确的扩增产物的大小为421 bp。1、取 10-20μL PCR 产物直接在 PAGE 或琼脂糖凝胶上电泳，正确的扩增产物的大小为421 bp。1、取 10-20μL PCR 产物直接在 PAGE 或琼脂糖凝胶上电泳，正确的扩增产物的大小为421 bp。1、取 10-20μL PCR 产物直接在 PAGE 或琼脂糖凝胶上电泳，正确的扩增产物的大小为421 bp。1、取 10-20μL PCR 产物直接在 PAGE 或琼脂糖凝胶上电泳，正确的扩增产物的大小为421 bp。1、取 10-20μL PCR 产物直接在 PAGE 或琼脂糖凝胶上电泳，正确的扩增产物的大小为421 bp。
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