pMSCV-loxp-dsRed-loxp-eGFP-Puro-WPRE逆转录表达质粒
pMSCV-loxp-dsRed-loxp-eGFP-Puro-WPRE逆转录表达质粒基本信息
基本信息启动子: PGK
启动子: PGK复制子: pUC ori
复制子: pUC ori质粒分类: 病毒系列,逆病毒克隆克隆载体
质粒分类: 病毒系列,逆病毒克隆克隆载体质粒大小: 8500bp
质粒大小: 8500bp原核抗性: Amp
原核抗性: Amp筛选标记: Puro
筛选标记: Puro克隆菌株: Stbl3
克隆菌株: Stbl3培养条件: 37℃,有氧 LB
培养条件: 37℃,有氧 LB表达宿主: 哺乳细胞
表达宿主: 哺乳细胞诱导方式: 无须诱导,瞬时表达
诱导方式: 无须诱导,瞬时表达5'测序引物: 根据序列设计引物
5'测序引物: 根据序列设计引物3'测序引物: 根据序列设计引物
3'测序引物: 根据序列设计引物质粒简介
质粒简介PMSCV-loxp-dsRed-loxp-eGFP-Puro-WPRE is Expression Retroviral, Mammalian, Cre/Lox carrier, its background carrier is MSCV, insert SEQ is inserted. loxp-dsRed-loxp-MCS-eGFP
PMSCV-loxp-dsRed-loxp-eGFP-Puro-WPRE is Expression Retroviral, Mammalian, Cre/Lox carrier, its background carrier is MSCV, insert SEQ is inserted. loxp-dsRed-loxp-MCS-eGFP

质粒图谱
质粒图谱

pMSCV-loxp-dsRed-loxp-eGFP-Puro-WPRE逆转录表达质粒使用说明:
pMSCV-loxp-dsRed-loxp-eGFP-Puro-WPRE逆转录表达质粒使用说明:1、收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl无菌水溶解质粒,室温放置1min;
1、收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl无菌水溶解质粒,室温放置1min;2、从-80℃冰箱中取出相应的感受态,置于冰盒上解冻,并做好标记;
2、从-80℃冰箱中取出相应的感受态,置于冰盒上解冻,并做好标记;3、取2μl质粒加至100μl感受态中,冰浴30min;
3、取2μl质粒加至100μl感受态中,冰浴30min;4、42℃热激90s,再冰浴2min;
4、42℃热激90s,再冰浴2min;5、加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡培养45min;
5、加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡培养45min;6、6000rpm离心5min,仅留100ul上清混匀菌体沉淀;
6、6000rpm离心5min,仅留100ul上清混匀菌体沉淀;7、混匀后的菌液加至对应抗性的LB平板上,倒入适量玻璃珠,涂匀液体;
7、混匀后的菌液加至对应抗性的LB平板上,倒入适量玻璃珠,涂匀液体;8、将平板正向培养1h,再倒置培养12h~16h;
8、将平板正向培养1h,再倒置培养12h~16h;9、挑取单克隆菌落至对应抗性的LB液体培养基中,震荡培养12h~16h,根据实验需要提取质粒。
9、挑取单克隆菌落至对应抗性的LB液体培养基中,震荡培养12h~16h,根据实验需要提取质粒。pMSCV-loxp-dsRed-loxp-eGFP-Puro-WPRE逆转录表达质粒注意事项:
pMSCV-loxp-dsRed-loxp-eGFP-Puro-WPRE逆转录表达质粒注意事项:1、如果您收到的是甘油菌种,请先四区划线,挑取单克隆培养。
1、如果您收到的是甘油菌种,请先四区划线,挑取单克隆培养。2、如果第二天转化平板长的过多,请将质粒按比例稀释后再转化。
2、如果第二天转化平板长的过多,请将质粒按比例稀释后再转化。