一．细胞特性

一．细胞特性一．细胞特性一．细胞特性一．一．一．一．一．一． 细胞特性细胞特性细胞特性细胞特性细胞特性细胞特性细胞名称：A549细胞细胞名称：A549细胞细胞名称：细胞名称：细胞名称：细胞名称：A549细胞A549细胞A549细胞
生长特性：贴壁 上皮样生长特性：贴壁 上皮样生长特性：贴壁 上皮样生长特性：贴壁 上皮样生长特性：贴壁生长特性：贴壁 上皮样
种 属：人种 属：人种 属：人种 属：人种种 属：人
货期（工作日）：5—7货期（工作日）：5—7货期（工作日）货期（工作日）货期（工作日）货期（工作日）：5—7：5—7：：5—7
培养难度：★★培养难度：★★培养难度：★★培养难度：★★培养难度：培养难度：★★

二．培养条件

二．培养条件二．培养条件二．培养条件二．二．二．二．二．二． 培养条件培养条件培养条件培养条件培养条件培养条件培养基：RPMI-1640+10% FBS培养基：RPMI-1640+10% FBS培养基：RPMI-1640+10% FBS培养基：RPMI-1640+10% FBS培养基：培养基：RPMI-1640+10% FBS

温度：37℃ 气相：95%空气，5%二氧化碳温度：37℃ 气相：95%空气，5%二氧化碳温度：37℃ 气相：95%空气，5%二氧化碳温度：37℃ 气相：95%空气，5%二氧化碳温度：温度：37℃ 气相：95%空气，5%二氧化碳

三．传代方式

三．传代方式三．传代方式三．传代方式三．三．三．三．三．三． 传代方式传代方式传代方式传代方式传代方式传代方式
1.用75%酒精喷洒整个培养瓶消毒，将其平躺置于培养箱中进行1-3小时的缓冲，.然后置于无菌操作台，打开瓶口，将其中的培养液去掉，再往其中加入5-6mL新鲜培养基(以T25培养瓶为例)并置于细胞培养箱中培养，根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液以及传代，一般2到3天换一次液；1.用75%酒精喷洒整个培养瓶消毒，将其平躺置于培养箱中进行1-3小时的缓冲，.然后置于无菌操作台，打开瓶口，将其中的培养液去掉，再往其中加入5-6mL新鲜培养基(以T25培养瓶为例)并置于细胞培养箱中培养，根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液以及传代，一般2到3天换一次液；1.用75%酒精喷洒整个培养瓶消毒，将其平躺置于培养箱中进行1-3小时的缓冲，.然后置于无菌操作台，打开瓶口，将其中的培养液去掉，再往其中加入5-6mL新鲜培养基(以T25培养瓶为例)并置于细胞培养箱中培养，根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液以及传代，一般2到3天换一次液；1.用75%酒精喷洒整个培养瓶消毒，将其平躺置于培养箱中进行1-3小时的缓冲，.然后置于无菌操作台，打开瓶口，将其中的培养液去掉，再往其中加入5-6mL新鲜培养基(以T25培养瓶为例)并置于细胞培养箱中培养，根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液以及传代，一般2到3天换一次液；1.用75%酒精喷洒整个培养瓶消毒，将其平躺置于培养箱中进行1-3小时的缓冲，.然后置于无菌操作台，打开瓶口，将其中的培养液去掉，再往其中加入5-6mL新鲜培养基(以T25培养瓶为例)并置于细胞培养箱中培养，根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液以及传代，一般2到3天换一次液；

2.待细胞长满瓶底面积80%-90%，需要对其进行传代，传代比例为1:3到1:6；2.待细胞长满瓶底面积80%-90%，需要对其进行传代，传代比例为1:3到1:6；2.待细胞长满瓶底面积80%-90%，需要对其进行传代，传代比例为1:3到1:6；2.待细胞长满瓶底面积80%-90%，需要对其进行传代，传代比例为1:3到1:6；2.待细胞长满瓶底面积80%-90%，需要对其进行传代，传代比例为1:3到1:6；

3传代步骤：将0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化液置于37°预热，倒掉培养瓶中的培养基，往培养瓶中加入3-5 ml PBS，轻晃洗涤后弃去。往瓶中加1-2 ml预热好的胰酶，置于37°孵育消化（第一次消化需时常取出置于显微镜下观察，以显微镜下细胞触角回收变圆、轻拍瓶壁见细胞脱落为最佳消化时间，记录最佳消化时间，以便于下次消化），消化好后加入3ml完全培养基终止消化。用移液枪轻轻吹打瓶壁上的细胞，使之完全脱落，然后收集细胞悬液，1200rpm离心3min，弃上清，加入完全培养基重悬细胞，进行传代。3传代步骤：将0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化液置于37°预热，倒掉培养瓶中的培养基，往培养瓶中加入3-5 ml PBS，轻晃洗涤后弃去。往瓶中加1-2 ml预热好的胰酶，置于37°孵育消化（第一次消化需时常取出置于显微镜下观察，以显微镜下细胞触角回收变圆、轻拍瓶壁见细胞脱落为最佳消化时间，记录最佳消化时间，以便于下次消化），消化好后加入3ml完全培养基终止消化。用移液枪轻轻吹打瓶壁上的细胞，使之完全脱落，然后收集细胞悬液，1200rpm离心3min，弃上清，加入完全培养基重悬细胞，进行传代。3传代步骤：将0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化液置于37°预热，倒掉培养瓶中的培养基，往培养瓶中加入3-5 ml PBS，轻晃洗涤后弃去。往瓶中加1-2 ml预热好的胰酶，置于37°孵育消化（第一次消化需时常取出置于显微镜下观察，以显微镜下细胞触角回收变圆、轻拍瓶壁见细胞脱落为最佳消化时间，记录最佳消化时间，以便于下次消化），消化好后加入3ml完全培养基终止消化。用移液枪轻轻吹打瓶壁上的细胞，使之完全脱落，然后收集细胞悬液，1200rpm离心3min，弃上清，加入完全培养基重悬细胞，进行传代。3传代步骤：将0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化液置于37°预热，倒掉培养瓶中的培养基，往培养瓶中加入3-5 ml PBS，轻晃洗涤后弃去。往瓶中加1-2 ml预热好的胰酶，置于37°孵育消化（第一次消化需时常取出置于显微镜下观察，以显微镜下细胞触角回收变圆、轻拍瓶壁见细胞脱落为最佳消化时间，记录最佳消化时间，以便于下次消化），消化好后加入3ml完全培养基终止消化。用移液枪轻轻吹打瓶壁上的细胞，使之完全脱落，然后收集细胞悬液，1200rpm离心3min，弃上清，加入完全培养基重悬细胞，进行传代。3传代步骤：将0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化液置于37°预热，倒掉培养瓶中的培养基，往培养瓶中加入3-5 ml PBS，轻晃洗涤后弃去。往瓶中加1-2 ml预热好的胰酶，置于37°孵育消化（第一次消化需时常取出置于显微镜下观察，以显微镜下细胞触角回收变圆、轻拍瓶壁见细胞脱落为最佳消化时间，记录最佳消化时间，以便于下次消化），消化好后加入3ml完全培养基终止消化。用移液枪轻轻吹打瓶壁上的细胞，使之完全脱落，然后收集细胞悬液，1200rpm离心3min，弃上清，加入完全培养基重悬细胞，进行传代。

四．冻存条件

四．冻存条件四．冻存条件四．冻存条件四．四．四．四．四．四． 冻存条件冻存条件冻存条件冻存条件冻存条件冻存条件冻存条件：80%完全培养基+10%FBS+10%DMSO冻存条件：80%完全培养基+10%FBS+10%DMSO冻存条件：80%完全培养基+10%FBS+10%DMSO冻存条件：80%完全培养基+10%FBS+10%DMSO冻存条件：冻存条件：80%完全培养基+10%FBS+10%DMSO
(*建议使用本公司无血清细胞冷冻液（H-W-100），用4度保存的冷冻液重悬细胞，直接冻存于-80°C。)(*建议使用本公司无血清细胞冷冻液（H-W-100），用4度保存的冷冻液重悬细胞，直接冻存于-80°C。)(*建议使用本公司无血清细胞冷冻液（H-W-100），(*建议使用本公司无血清细胞冷冻液（H-W-100），(*建议使用本公司无血清细胞冷冻液（H-W-100），用4度保存的冷冻液重悬细胞，直接冻存于-80°C。用4度保存的冷冻液重悬细胞，直接冻存于-80°C。用4度保存的冷冻液重悬细胞，直接冻存于-80°C。用4度保存的冷冻液重悬细胞，直接冻存于-80°C。用用4度保存的冷冻液重悬细胞，直接冻存于-80°C。)))
长期存储：液氮长期存储：液氮长期存储：液氮长期存储：液氮长期存储：液氮长期存储：液氮

五．供应限制

五．供应限制五．供应限制五．供应限制五．五．五．五．五．五． 供应限制供应限制供应限制供应限制供应限制供应限制该产品仅供研究使用。该产品仅供研究使用。该产品仅供研究使用。该产品仅供研究使用。该产品仅供研究使用。该产品仅供研究使用。

发货方式

发货方式发货方式发货方式发货方式发货方式发货方式发货方式发货方式发货方式我们采取两种形式的细胞发货方式：我们采取两种形式的细胞发货方式：我们采取两种形式的细胞发货方式：我们采取两种形式的细胞发货方式：我们采取两种形式的细胞发货方式：我们采取两种形式的细胞发货方式：
1. 复苏发货 1. 复苏发货 1. 复苏发货 1. 复苏发货 1. 复苏发货
a. T25瓶活细胞发货 a. T25瓶活细胞发货 a. T25瓶活细胞发货 a. T25瓶活细胞发货 a. T25瓶活细胞发货
b. 血清重悬发货 b. 血清重悬发货 b. 血清重悬发货 b. 血清重悬发货 b. 血清重悬发货

2. 冻存管发货(干冰发货)
 对于采取冻存管方式发货的客户，为了保证可靠性我们会多发一管细胞(共2管)，干冰覆盖保温运输。 2. 冻存管发货(干冰发货)
 对于采取冻存管方式发货的客户，为了保证可靠性我们会多发一管细胞(共2管)，干冰覆盖保温运输。 2. 冻存管发货(干冰发货) 2. 冻存管发货(干冰发货) 2. 冻存管发货(干冰发货)
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复苏及冻存发货方式均为顺丰速运，我们会根据收货地址及温度差异采取不同的发货方式(T25/血清重悬/冻存/用户指定)，并在发货前的3天内与您确认收货地址及配送方式。复苏及冻存发货方式均为顺丰速运，我们会根据收货地址及温度差异采取不同的发货方式(T25/血清重悬/冻存/用户指定)，并在发货前的3天内与您确认收货地址及配送方式。复苏及冻存发货方式均为顺丰速运，我们会根据收货地址及温度差异采取不同的发货方式(T25/血清重悬/冻存/用户指定)，并在发货前的3天内与您确认收货地址及配送方式。复苏及冻存发货方式均为顺丰速运，我们会根据收货地址及温度差异采取不同的发货方式(T25/血清重悬/冻存/用户指定)，并在发货前的3天内与您确认收货地址及配送方式。复苏及冻存发货方式均为顺丰速运，我们会根据收货地址及温度差异采取不同的发货方式复苏及冻存发货方式均为顺丰速运，我们会根据收货地址及温度差异采取不同的发货方式(T25/血清重悬/冻存/用户指定)，并在发货前的3天内与您确认收货地址及配送方式。

欢迎江浙沪地区的客户到实验室上门自取（报销路费）。欢迎江浙沪地区的客户到实验室上门自取（报销路费）。欢迎江浙沪地区的客户到实验室上门自取（报销路费）。欢迎江浙沪地区的客户到实验室上门自取（报销路费）。欢迎江浙沪地区的客户到实验室上门自取（报销路费）。欢迎江浙沪地区的客户到实验室上门自取（报销路费）。

传秋生物论文基金奖励方法

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奖励对象：

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该奖励方案长期有效，欢迎大家与我们分享获得成果的喜悦！该奖励方案长期有效，欢迎大家与我们分享获得成果的喜悦！该奖励方案长期有效，欢迎大家与我们分享获得成果的喜悦！该奖励方案长期有效，欢迎大家与我们分享获得成果的喜悦！该奖励方案长期有效，欢迎大家与我们分享获得成果的喜悦！该奖励方案长期有效，欢迎大家与我们分享获得成果的喜悦！
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