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pBAD/His/LacZ大肠表达质粒
pBAD/His/LacZ大肠表达质粒基本信息
基本信息别名: pBAD-His-LacZ
别名: pBAD-His-LacZ质粒分类: 大肠杆菌载体；pBAD系列表达质粒
质粒分类: 大肠杆菌载体；pBAD系列表达质粒原核抗性: 氨苄青霉素Amp
原核抗性: 氨苄青霉素Amp克隆菌株: 大肠杆菌DH5α
克隆菌株: 大肠杆菌DH5α培养条件: 37℃
培养条件: 37℃质粒简介
质粒简介pBAD-His-LacZ是一个大肠杆菌pBAD系列表达质粒。
pBAD-His-LacZ是一个大肠杆菌pBAD系列表达质粒。质粒图谱
质粒图谱
pBAD/His/LacZ大肠表达质粒使用说明：
pBAD/His/LacZ大肠表达质粒使用说明：1、收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl无菌水溶解质粒，室温放置1min；
1、收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl无菌水溶解质粒，室温放置1min；2、从-80℃冰箱中取出相应的感受态，置于冰盒上解冻，并做好标记；
2、从-80℃冰箱中取出相应的感受态，置于冰盒上解冻，并做好标记；3、取2μl质粒加至100μl感受态中，冰浴30min；
3、取2μl质粒加至100μl感受态中，冰浴30min；4、42℃热激90s，再冰浴2min；
4、42℃热激90s，再冰浴2min；5、加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡培养45min；
5、加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡培养45min；6、6000rpm离心5min，仅留100ul上清混匀菌体沉淀；
6、6000rpm离心5min，仅留100ul上清混匀菌体沉淀；7、混匀后的菌液加至对应抗性的LB平板上，倒入适量玻璃珠，涂匀液体；
7、混匀后的菌液加至对应抗性的LB平板上，倒入适量玻璃珠，涂匀液体；8、将平板正向培养1h，再倒置培养12h~16h；
8、将平板正向培养1h，再倒置培养12h~16h；9、挑取单克隆菌落至对应抗性的LB液体培养基中，震荡培养12h~16h，根据实验需要提取质粒。
9、挑取单克隆菌落至对应抗性的LB液体培养基中，震荡培养12h~16h，根据实验需要提取质粒。pBAD/His/LacZ大肠表达质粒注意事项：
pBAD/His/LacZ大肠表达质粒注意事项：1、如果您收到的是甘油菌种，请先四区划线，挑取单克隆培养。
1、如果您收到的是甘油菌种，请先四区划线，挑取单克隆培养。2、如果第二天转化平板长的过多，请将质粒按比例稀释后再转化。
2、如果第二天转化平板长的过多，请将质粒按比例稀释后再转化。
