人可溶性人可溶性Endoglin(ENG/sCD105)Endoglin(ENG/sCD105)检测试剂盒检测试剂盒本试剂仅供研究使用试验原理试验原理试验原理：：ENG/sCD105试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知ENG/sCD105浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将ENG/sCD105和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中ENG/sCD105的活性浓度呈比例关系。试剂盒内容及其配制试剂盒内容及其配制试剂盒内容及其配制

试剂盒成份（2-8℃保存）	96孔配置	48孔配置	配制
96/48份酶标板	1块板（96T）	半块板（48T）	即用型
塑料膜板盖	1块	半块	即用型
标准品：400ng/ml	1瓶（0.6ml）	1瓶（0.3ml）	按说明书进行稀稀
空白对照	1瓶（1.0ml）	1瓶（0.5ml）	即用型
标准品稀释缓冲液	1瓶（5ml）	1瓶（2.5ml）	即用型
生物素标记的ENG/sCD105抗体	1瓶（6ml）	1瓶（3.0ml）	即用型
亲和链酶素-HRP	1瓶（10ml）	1瓶（5.0ml）	即用型
洗涤缓冲液	1瓶（20ml）	1瓶（10ml）	按说明书进行稀释
底物A	1瓶（6.0ml）	1瓶（3.0ml）	即用型
底物B	1瓶（6.0ml）	1瓶（3.0ml）	即用型
终止液	1瓶（6.0ml）	1瓶（3.0ml）	即用型

试剂盒成份（2-8℃保存）96孔配置48孔配置配制96/48份酶标板1块板（96T）半块板（48T）即用型塑料膜板盖1块半块即用型标准品：400ng/ml1瓶（0.6ml）1瓶（0.3ml）按说明书进行稀稀空白对照1瓶（1.0ml）1瓶（0.5ml）即用型标准品稀释缓冲液1瓶（5ml）1瓶（2.5ml）即用型生物素标记的ENG/sCD105抗体1瓶（6ml）1瓶（3.0ml）即用型亲和链酶素-HRP1瓶（10ml）1瓶（5.0ml）即用型洗涤缓冲液1瓶（20ml）1瓶（10ml）按说明书进行稀释底物A1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型底物B1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型终止液1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型试剂盒成份（2-8℃保存）96孔配置48孔配置配制试剂盒成份（2-8℃保存）试剂盒成份（2-8℃保存）96孔配置96孔配置48孔配置48孔配置配制配制96/48份酶标板1块板（96T）半块板（48T）即用型96/48份酶标板96/48份酶标板1块板（96T）1块板（96T）半块板（48T）半块板（48T）即用型即用型塑料膜板盖1块半块即用型塑料膜板盖塑料膜板盖1块1块半块半块即用型即用型标准品：400ng/ml1瓶（0.6ml）1瓶（0.3ml）按说明书进行稀稀标准品：400ng/ml标准品：400ng/ml1瓶（0.6ml）1瓶（0.6ml）1瓶（0.3ml）1瓶（0.3ml）按说明书进行稀稀按说明书进行稀稀空白对照1瓶（1.0ml）1瓶（0.5ml）即用型空白对照空白对照1瓶（1.0ml）1瓶（1.0ml）1瓶（0.5ml）1瓶（0.5ml）即用型即用型标准品稀释缓冲液1瓶（5ml）1瓶（2.5ml）即用型标准品稀释缓冲液标准品稀释缓冲液1瓶（5ml）1瓶（5ml）1瓶（2.5ml）1瓶（2.5ml）即用型即用型生物素标记的ENG/sCD105抗体1瓶（6ml）1瓶（3.0ml）即用型生物素标记的ENG/sCD105抗体生物素标记的ENG/sCD105抗体1瓶（6ml）1瓶（6ml）1瓶（3.0ml）1瓶（3.0ml）即用型即用型亲和链酶素-HRP1瓶（10ml）1瓶（5.0ml）即用型亲和链酶素-HRP亲和链酶素-HRP1瓶（10ml）1瓶（10ml）1瓶（5.0ml）1瓶（5.0ml）即用型即用型洗涤缓冲液1瓶（20ml）1瓶（10ml）按说明书进行稀释洗涤缓冲液洗涤缓冲液1瓶（20ml）1瓶（20ml）1瓶（10ml）1瓶（10ml）按说明书进行稀释按说明书进行稀释底物A1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型底物A底物A1瓶（6.0ml）1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）1瓶（3.0ml）即用型即用型底物B1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型底物B底物B1瓶（6.0ml）1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）1瓶（3.0ml）即用型即用型终止液1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型终止液终止液1瓶（6.0ml）1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）1瓶（3.0ml）即用型即用型自备材料自备材料自备材料1． 蒸馏水。2． 加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。3． 振荡器及磁力搅拌器等。安全性安全性安全性1． 避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。2． 实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。3． 不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。人可溶性人可溶性Endoglin(ENG/sCD105)Endoglin(ENG/sCD105)检测试剂盒检测试剂盒操作注意事项操作注意事项操作注意事项1． 试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。2． 实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。3． 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。4． 使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。5． 使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。6． 洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。7． 底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。8． 加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。9． 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。人可溶性人可溶性Endoglin(ENG/sCD105)Endoglin(ENG/sCD105)检测试剂盒检测试剂盒样品收集、处理及保存方法样品收集、处理及保存方法样品收集、处理及保存方法1、 血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2、 血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。3、 细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。4、 保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70 ℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。试剂的准备试剂的准备试剂的准备1． 标准品：标准品的系列稀释应在实验时准备，不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行：

400ng/ml	（6号标准品）	原倍浓度不用稀释直接加入50ul。
200ng/ml	（5号标准品）	100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液
100ng/ml	（4号标准品）	100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液
50ng/ml	（3号标准品）	100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液
25ng/ml	（2号标准品）	100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液
12.5ng/ml	（1号标准品）	100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液
0ng/ml	（空白对照）	原始浓度不用稀释直接加入50ul。

400ng/ml（6号标准品）原倍浓度不用稀释直接加入50ul。200ng/ml（5号标准品）100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液100ng/ml（4号标准品）100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液50ng/ml（3号标准品）100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液25ng/ml（2号标准品）100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液12.5ng/ml（1号标准品）100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液0ng/ml（空白对照）原始浓度不用稀释直接加入50ul。400ng/ml（6号标准品）原倍浓度不用稀释直接加入50ul。400ng/ml400ng/ml（6号标准品）（6号标准品）原倍浓度不用稀释直接加入50ul。原倍浓度不用稀释直接加入50ul。200ng/ml（5号标准品）100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液200ng/ml200ng/ml（5号标准品）（5号标准品）100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液100ng/ml（4号标准品）100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液100ng/ml100ng/ml（4号标准品）（4号标准品）100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液50ng/ml（3号标准品）100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液50ng/ml50ng/ml（3号标准品）（3号标准品）100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液25ng/ml（2号标准品）100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液25ng/ml25ng/ml（2号标准品）（2号标准品）100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液12.5ng/ml（1号标准品）100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液12.5ng/ml12.5ng/ml（1号标准品）（1号标准品）100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液0ng/ml（空白对照）原始浓度不用稀释直接加入50ul。0ng/ml0ng/ml（空白对照）（空白对照）原始浓度不用稀释直接加入50ul。原始浓度不用稀释直接加入50ul。2． 洗涤缓冲液（50×）的稀释：蒸馏水50倍稀释。人可溶性人可溶性Endoglin(ENG/sCD105)Endoglin(ENG/sCD105)检测试剂盒检测试剂盒操作步骤操作步骤操作步骤1． 使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。2． 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。3． 加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。4． 甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。5． 每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。6． 甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。7． 每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。8． 取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。9． 在450nm波长处测定各孔的OD值。性能性能性能1. 灵敏度：最小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。2. 特异性：不与人其它细胞因子反应。3. 重复性：板内、板间变异系数均小于10%。4.局限性：6号标准品以上的结果为非线性的，根据此标准曲线无法得到精确的结果。结果 判 断 结果 判 断 结果 判 断 与与与分分分析析析1、仪器值：于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值2、以吸光度OD值为纵坐标（Y），相应的ENG/sCD105标准品浓度为横坐标（X），做得相应的曲线，样品的ENG/sCD105含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。3、检测值范围：0-400ng/ml4、敏感度： 1.0ng/ml
中文名称：人蛋白C抑制因子(PCI)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Protein C Inhibitor (PCI) 
中文名称：人衰老关键蛋白5(FBLN5)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Fibulin 5 (FBLN5) 
中文名称：人牙本质涎磷蛋白(DSPP)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Dentin Sialophosphoprotein (DSPP) 
中文名称：人皮质醇结合球蛋白(CBG)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Corticosteroid Binding Globulin (CBG) 
中文名称：人膜联蛋白A6(ANXA6)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Annexin A6 (ANXA6) 
中文名称：人跨膜丝氨酸蛋白酶2(TMPRSS2)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Transmembrane Protease, Serine 2 (TMPRSS2) 
中文名称：人畸胎瘤衍生生长因子1(TDGF1)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Te英文名称：Ratocarcinoma Derived Growth Factor 1 (TDGF1) 
中文名称：人Ⅹ型胶原(COL10)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Collagen Type X (COL10) 
中文名称：人拓扑异构酶Ⅰ(TOP1)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Topoisomerase I (TOP1) 
中文名称：人叶酸受体1(FOLR1)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Folate Receptor 1, Adult (FOLR1) 
中文名称：人细胞间粘附分子4(ICAM4)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Intercellular Adhesion Molecule 4 (ICAM4) 
中文名称：人平足蛋白(PDPN)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Podoplanin (PDPN) 
中文名称：人前梯度蛋白2(AGR2)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Anterior Gradient Protein 2 (AGR2) 
中文名称：人存活素(Surv)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Survivin (Surv) 
中文名称：人Persephin蛋白(PSPN)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Persephin (PSPN) 
中文名称：人锚定蛋白重复域蛋白1(ANKRD1)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Ankyrin Repeat Domain Protein 1 (ANKRD1) 
中文名称：人甲基多巴1α(MEP1α)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Meprin A Alpha (MEP1a) 
中文名称：人细胞程序性死亡蛋白1配体1(PDCD1LG1)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Programmed Cell Death Protein 1 Ligand 1 
中文名称：人丝蛋白Bβ(FLNβ)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Filamin B Beta (FLNb) 
中文名称：人丝蛋白Cγ(FLNC)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Filamin C Gamma (FLNC) 
中文名称：人肥大细胞类糜蛋白酶1(CMA1)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Chymase 1, Mast Cell (CMA1) 
中文名称：人肌球蛋白重链9(MYH9)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Myosin Heavy Chain 9, Non Muscle (MYH9) 
中文名称：人肌球蛋白重链10(MYH10)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Myosin Heavy Chain 10, Non Muscle (MYH10) 
中文名称：人泛醇细胞色素C还原酶核心蛋白Ⅰ(UQCRC1)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Ubiquinol Cytochrome C Reductase Core 
中文名称：人生长分化因子1(GDF1)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Growth Differentiation Factor 1 (GDF1) 
中文名称：人成肌分化蛋白(MyoD)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Myogenic Differentiation (MyoD) 
中文名称：人尼克酰胺-N-甲基转移酶(NNMT)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Nicotinamide-N-Methyltransferase (NNMT) 
中文名称：人微管关联蛋白RP/EB家族成员1(MAPRE1)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Microtubule Associated Protein RP/EB Family, 
中文名称：人骨形成蛋白15(BMP15)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Bone Morphogenetic Protein 15 (BMP15) 
中文名称：人补体受体4(CR4)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Complement Receptor 4 (CR4) 
中文名称：人成纤维细胞生长因子21(FGF21)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Fibroblast Growth Factor 21 (FGF21) 
中文名称：人二肽基肽酶10(DPP10)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Dipeptidyl Peptidase 10 (DPP10) 
中文名称：人骨膜蛋白(POSTN)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Periostin (POSTN) 
中文名称：人Axis抑制蛋白2(AXIN2)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：ELISA Kit for Axis Inhibition Protein 2 (AXIN2)