实验要点:
1.CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀,因此在将其加入冷冻的植物材料中之前必须预热。
2.在最适条件下,DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状,很容易一下子就从溶液中钩出。不过,某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质,特别是多糖,使DNA 沉淀呈絮状或胶状,这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3.饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性,但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用和氯仿的混合液,可减轻这两种现象,同时可加入适量的(—氯仿—=25:24:1),的作用是消泡,并使蛋白质层紧密,使水相和有机相分层较好。细菌的培养和收集将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速,能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
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4、探针标记及检测系列产品
5、核酸扩增系列产品
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7、基因组研究系列产品
8、蛋白质研究系列产品
9、细胞生物学研究系列产品
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2.在最适条件下,DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状,很容易一下子就从溶液中钩出。不过,某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质,特别是多糖,使DNA 沉淀呈絮状或胶状,这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
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1
..CTAB
溶液在低于溶液在低于15
℃℃
时会析出沉淀,因此在将其加入冷冻的植物材料中之前必须预热。时会析出沉淀,因此在将其加入冷冻的植物材料中之前必须预热。
2
.在最适条件下,.在最适条件下,DNA—CTAB
沉淀呈白色纤维状,很容易一下子就从溶液中钩出。不过,某些植物种的沉淀呈白色纤维状,很容易一下子就从溶液中钩出。不过,某些植物种的DNA
沉淀中可能含有杂质,特别是多糖,使沉淀中可能含有杂质,特别是多糖,使DNA
沉淀呈絮状或胶状,这种情况下可能需要稍事离心才能得到沉淀呈絮状或胶状,这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB
沉淀。沉淀。
3
.饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性,但酚不能完全抑制.饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性,但酚不能完全抑制RNA
酶的活性酶的活性,
而且酚可以溶解含而且酚可以溶解含poLy(A)
的的mRNA
。如果用和氯仿的混合液,可减轻这两种现象,同时可加入适量的(。如果用和氯仿的混合液,可减轻这两种现象,同时可加入适量的(—
氯仿氯仿—=25:24:1
),的作用是消泡,并使蛋白质层紧密,使水相和有机相分层较好。),的作用是消泡,并使蛋白质层紧密,使水相和有机相分层较好。
细菌的培养和收集细菌的培养和收集
将含有质粒将含有质粒pBS
的的DH5α
菌种接种在菌种接种在LB
固体培养基固体培养基(
含含50μg/ml Amp)
中中, 37
℃℃
培养培养12-24
小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB
液体培养基液体培养基(
含含50μg/ml Amp)
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℃℃
振荡培养约振荡培养约12
小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA
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所得所得DNA
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1
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木犀草素-7-O-葡萄糖醛酸苷29741-10-4质量规格:HPLC≥95%,标准品木犀草素-7-O-葡萄糖醛酸苷29741-10-4质量规格:HPLC≥95%,标准品木犀草素木犀草素-7-O-
葡萄糖醛酸苷葡萄糖醛酸苷29741-10-4
质量规格:质量规格:HPLC
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STA-9090;STA9090888216-25-9质量规格:>98%,HSP90抑制剂STA-9090;STA9090888216-25-9质量规格:>98%,HSP90抑制剂STA-9090;STA9090888216-25-9
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抑制剂抑制剂
赤芝酸D98665-16-8质量规格:HPLC≥97%赤芝酸D98665-16-8质量规格:HPLC≥97%赤芝酸赤芝酸D98665-16-8
质量规格:质量规格:HPLC
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DAPT (GSI-IX)208255-80-5质量规格:>98%,γ-secretase抑制剂DAPT (GSI-IX)208255-80-5质量规格:>98%,γ-secretase抑制剂DAPT (GSI-IX)208255-80-5
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γγ-secretase
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甲磺酸帕珠沙星Pazufloxacin Mesilate质量规格:≥98%,BR甲磺酸帕珠沙星Pazufloxacin Mesilate质量规格:≥98%,BR甲磺酸帕珠沙星甲磺酸帕珠沙星Pazufloxacin Mesilate
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甲磺酸帕珠沙星(标准品)Pazufloxacin Mesilate质量规格:HPLC>98%,标准品甲磺酸帕珠沙星(标准品)Pazufloxacin Mesilate质量规格:HPLC>98%,标准品甲磺酸帕珠沙星(标准品)甲磺酸帕珠沙星(标准品)Pazufloxacin Mesilate
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培美曲塞二钠Pemetrexed Disodium质量规格:>99%,BR,水合物培美曲塞二钠Pemetrexed Disodium质量规格:>99%,BR,水合物培美曲塞二钠培美曲塞二钠Pemetrexed Disodium
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乙酰水杨酸-d4质量规格:美国进口Acetylsalicylic Acid-d4乙酰水杨酸-d4质量规格:美国进口Acetylsalicylic Acid-d4乙酰水杨酸乙酰水杨酸-d4
质量规格:美国进口质量规格:美国进口Acetylsalicylic Acid-d4
DL-赖氨酸乙酰水杨酸(赖氨匹林)质量规格:美国进口DL-Lysine AcetylsalicylateDL-赖氨酸乙酰水杨酸(赖氨匹林)质量规格:美国进口DL-Lysine AcetylsalicylateDL-
赖氨酸乙酰水杨酸(赖氨匹林)质量规格:美国进口赖氨酸乙酰水杨酸(赖氨匹林)质量规格:美国进口DL-Lysine Acetylsalicylate
酰基乙酰水杨酸-β-D-葡萄糖苷酸质量规格:美国进口Acetylsalicylic Acid Acyl-β-D-glucuronide酰基乙酰水杨酸-β-D-葡萄糖苷酸质量规格:美国进口Acetylsalicylic Acid Acyl-β-D-glucuronide酰基乙酰水杨酸酰基乙酰水杨酸-
ββ-D-
葡萄糖苷酸质量规格:美国进口葡萄糖苷酸质量规格:美国进口Acetylsalicylic Acid Acyl-
ββ-D-glucuronide
乙酰水杨酸酸酐质量规格:美国进口Acetylsalicylic Anhydride乙酰水杨酸酸酐质量规格:美国进口Acetylsalicylic Anhydride乙酰水杨酸酸酐质量规格:美国进口乙酰水杨酸酸酐质量规格:美国进口Acetylsalicylic Anhydride
脱氢盐酸尼卡地平质量规格:美国进口Dehydro Nicardipine Hydrochloride脱氢盐酸尼卡地平质量规格:美国进口Dehydro Nicardipine Hydrochloride脱氢盐酸尼卡地平质量规格:美国进口脱氢盐酸尼卡地平质量规格:美国进口Dehydro Nicardipine Hydrochloride
小鼠D-乳酸脱氢酶(D-LDH)ELISA试剂盒,英文名: D-LDH ELISA Kit小鼠D-乳酸脱氢酶(D-LDH)ELISA试剂盒,英文名: D-LDH ELISA Kit小鼠小鼠D-
乳酸脱氢酶乳酸脱氢酶(D-LDH)ELISA
试剂盒试剂盒
,英文名:,英文名: D-LDH ELISA Kit
大鼠心肌转录因子GATA4ELISA检测试剂盒Ratcardiacanscriptionfactor-GATA4ELISAKit 96T/48T大鼠心肌转录因子GATA4ELISA检测试剂盒Ratcardiacanscriptionfactor-GATA4ELISAKit 96T/48T大鼠心肌转录因子大鼠心肌转录因子GATA4ELISA
检测试剂盒检测试剂盒Ratcardiacanscriptionfactor-GATA4ELISAKit 96T/48T
人Dickkopf 3(DKK3)免疫试剂盒 Human Dickkopf 3,DKK3 ELISA Kit人Dickkopf 3(DKK3)免疫试剂盒 Human Dickkopf 3,DKK3 ELISA Kit人人Dickkopf 3(DKK3)
免疫试剂盒免疫试剂盒 Human Dickkopf 3,DKK3 ELISA Kit
英文名称MouseBonemorphogeneticprotein4ELISAKit小鼠骨成型蛋白质-4(BMP-4)规格:96T/48T英文名称MouseBonemorphogeneticprotein4ELISAKit小鼠骨成型蛋白质-4(BMP-4)规格:96T/48T英文名称英文名称MouseBonemorphogeneticprotein4ELISAKit
小鼠骨成型蛋白质小鼠骨成型蛋白质-4(BMP-4)
规格:规格:96T/48T
冰冻切片抗酒石酸酸性磷酸酶(AP)活性染色试剂盒50次冰冻切片抗酒石酸酸性磷酸酶(AP)活性染色试剂盒50次冰冻切片抗酒石酸酸性磷酸酶冰冻切片抗酒石酸酸性磷酸酶(AP)
活性染色试剂盒活性染色试剂盒50
次次
RatAi-glucoprotein210,GP210ELISA试剂盒大鼠抗核膜糖蛋白210抗体(gp210)ELISA试剂盒规格:96T/48TRatAi-glucoprotein210,GP210ELISA试剂盒大鼠抗核膜糖蛋白210抗体(gp210)ELISA试剂盒规格:96T/48TRatAi-glucoprotein210,GP210ELISA
试剂盒大鼠抗核膜糖蛋白试剂盒大鼠抗核膜糖蛋白210
抗体抗体(gp210)ELISA
试剂盒规格:试剂盒规格:96T/48T
小鼠胃泌酸调节素(OXM)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒组装/原装小鼠胃泌酸调节素(OXM)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒组装/原装小鼠胃泌酸调节素小鼠胃泌酸调节素(OXM)ELISA
试剂盒试剂盒 96T/48T
试剂盒试剂盒
组装组装/
原装原装
Human phosphoenolpyruvate carboxykinase (PCK) ELISA Kit 人磷酸烯醇式酸羧激酶(PCK)ELISA试剂盒Human phosphoenolpyruvate carboxykinase (PCK) ELISA Kit 人磷酸烯醇式酸羧激酶(PCK)ELISA试剂盒Human phosphoenolpyruvate carboxykinase (PCK) ELISA Kit
人磷酸烯醇式酸羧激酶人磷酸烯醇式酸羧激酶(PCK)ELISA
试剂盒试剂盒
Humanalkalinephosphatase,ALPELISAKit 人碱性磷酸酶(ALP)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装Humanalkalinephosphatase,ALPELISAKit 人碱性磷酸酶(ALP)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装Humanalkalinephosphatase,ALPELISAKit
人碱性磷酸酶人碱性磷酸酶(ALP)ELISA
试剂盒试剂盒 96T/48T
进口分装进口分装
ChickenIerleukin1,IL-1ELISA试剂盒鸡白介素1(IL-1)ELISA试剂盒规格:96T/48TChickenIerleukin1,IL-1ELISA试剂盒鸡白介素1(IL-1)ELISA试剂盒规格:96T/48TChickenIerleukin1,IL-1ELISA
试剂盒鸡白介素试剂盒鸡白介素1(IL-1)ELISA
试剂盒规格:试剂盒规格:96T/48T
载玻片细胞ERK蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次载玻片细胞ERK蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次载玻片细胞载玻片细胞ERK
蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20
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MouseGlycogenphosphorylaseMM,GP-MMELISAKit小鼠糖原磷酸化酶同工酶MM(GP-MM)ELISA试剂盒规格:96T/48TMouseGlycogenphosphorylaseMM,GP-MMELISAKit小鼠糖原磷酸化酶同工酶MM(GP-MM)ELISA试剂盒规格:96T/48TMouseGlycogenphosphorylaseMM,GP-MMELISAKit
小鼠糖原磷酸化酶同工酶小鼠糖原磷酸化酶同工酶MM(GP-MM)ELISA
试剂盒规格:试剂盒规格:96T/48T
即用型高保真 PCR 试剂盒9mL品牌小鼠纤维连接蛋白英文名称: Fibronectin 规格: 48T/96T 英文缩写: FN即用型高保真 PCR 试剂盒9mL品牌小鼠纤维连接蛋白英文名称: Fibronectin 规格: 48T/96T 英文缩写: FN即用型高保真 PCR 即用型高保真即用型高保真即用型高保真
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试剂盒9mL试剂盒试剂盒试剂盒
9mL9mL
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小鼠纤维连接蛋白小鼠纤维连接蛋白
英文名称:英文名称: Fibronectin
规格:规格: 48T/96T
英文缩写:英文缩写: FN
FMS样酪酸激酶英文名称: Fms-related tyrosine kinase-3 规格: 48T/96T 英文缩写: Flt3FMS样酪酸激酶英文名称: Fms-related tyrosine kinase-3 规格: 48T/96T 英文缩写: Flt3FMS
样酪酸激酶样酪酸激酶
英文名称:英文名称: Fms-related tyrosine kinase-3
规格:规格: 48T/96T
英文缩写:英文缩写: Flt3
小鼠Flt3配体英文名称: Fms-related tyrosine kinase-3 Ligand 规格: 48T/96T 英文缩写: Flt3 Ligand小鼠Flt3配体英文名称: Fms-related tyrosine kinase-3 Ligand 规格: 48T/96T 英文缩写: Flt3 Ligand小鼠小鼠Flt3
配体配体
英文名称:英文名称: Fms-related tyrosine kinase-3 Ligand
规格:规格: 48T/96T
英文缩写:英文缩写: Flt3 Ligand
小鼠纤维连接蛋白英文名称: fibronecti 规格: 48T/96T 英文缩写: FN
操作步骤:
1. 即用型高保真 PCR 试剂盒9mL品牌匀浆处理:a.组织将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞,每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml,用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定,不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c.细胞悬液离心收集细胞,每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol,反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2.将匀浆样品在室温(15-30℃)放置5分钟,使核酸蛋白复合物完全分离。
3.可选步骤:如样品中含有较多蛋白质,脂肪,多糖或胞外物质(肌肉,植物结节部分等)可于2-8℃10000×g离心10分钟,取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。处理脂肪组织时,上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml,剧烈振荡15秒,室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层:底层为黄色有机相,上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中,水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中,如要分离DNA和蛋白质可保留有机相,进一步操作见后。用沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml,室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟,离心前看不出RNA沉淀,离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。小鼠纤维连接蛋白英文名称: fibronecti 规格: 48T/96T 英文缩写: FN
操作步骤:
1. 即用型高保真 PCR 试剂盒9mL品牌匀浆处理:a.组织将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
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3.可选步骤:如样品中含有较多蛋白质,脂肪,多糖或胞外物质(肌肉,植物结节部分等)可于2-8℃10000×g离心10分钟,取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。处理脂肪组织时,上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
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6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层:底层为黄色有机相,上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中,水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
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8. 2-8℃10000×g离心10分钟,离心前看不出RNA沉淀,离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。小鼠纤维连接蛋白小鼠纤维连接蛋白
英文名称:英文名称: fibronecti
规格:规格: 48T/96T
英文缩写:英文缩写: FN
操作步骤操作步骤操作步骤操作步骤操作步骤
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1.
即用型高保真 PCR 即用型高保真即用型高保真即用型高保真
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试剂盒9mL试剂盒试剂盒试剂盒
9mL9mL
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匀浆处理匀浆处理:a.
组织组织
将组织在液氮中磨碎将组织在液氮中磨碎,
每每50-100mg
组织加入组织加入1ml TRIzol,
用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol
体积体积10℅
。。
b.
单层培养细胞单层培养细胞
直接在培养板中加入直接在培养板中加入TRIzol
裂解细胞,每裂解细胞,每10cm2
面积面积(
即即3.5cm
直径的培养板直径的培养板)
加加1ml
,用移液器吸打几次。,用移液器吸打几次。TRIzol
的用量应根据培养板面积而定,不取决于细胞数。的用量应根据培养板面积而定,不取决于细胞数。TRIzol
加量不足可能导致提取的加量不足可能导致提取的RNA
有有DNA
污染。污染。
c
.细胞悬液.细胞悬液
离心收集细胞,每离心收集细胞,每5-10×106
动物、植物、酵母细胞或动物、植物、酵母细胞或1×107
细菌细胞加入细菌细胞加入1ml TRIzol
,反复吸打。加,反复吸打。加TRIzol
之前不要洗涤细胞以免之前不要洗涤细胞以免mRNA
降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2
.将匀浆样品在室温(.将匀浆样品在室温(15-30
℃℃
)放置)放置5
分钟,使核酸蛋白复合物完全分离。分钟,使核酸蛋白复合物完全分离。
3
.可选步骤:如样品中含有较多蛋白质,脂肪,多糖或胞外物质(肌肉,植物结节部分等)可于.可选步骤:如样品中含有较多蛋白质,脂肪,多糖或胞外物质(肌肉,植物结节部分等)可于2-8
℃℃10000×g
离心离心10
分钟,取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜,多糖,高分子量分钟,取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜,多糖,高分子量DNA
,上清中含有,上清中含有RNA
。处理脂肪组织时,上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。。处理脂肪组织时,上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5.
每使用每使用1ml TRIzol
加入加入0.2ml
,剧烈振荡,剧烈振荡15
秒,室温放置秒,室温放置3
分钟。分钟。
6. 2-8
℃℃10000×g
离心离心15
分钟。样品分为三层:底层为黄色有机相,上层为无色水相和一个中间层。分钟。样品分为三层:底层为黄色有机相,上层为无色水相和一个中间层。RNA
主要在水相中,水相体积约为所用主要在水相中,水相体积约为所用TRIzol
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。。
7.
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和蛋白质可保留有机相,进一步操作见后。用沉淀水相中的和蛋白质可保留有机相,进一步操作见后。用沉淀水相中的RNA
。每使用。每使用1ml TRIzol
加入加入0.5ml
,室温放置,室温放置10
分钟。分钟。
8. 2-8
℃℃10000×g
离心离心10
分钟,离心前看不出分钟,离心前看不出RNA
沉淀,离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。沉淀,离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。