特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

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百奥莱博专业生产供应96孔板PCR片段纯化回收试剂盒(真空法) 核酸电泳和回收，我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

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名称：96孔板PCR片段纯化回收试剂盒(真空法) 核酸电泳和回收
品牌：百奥莱博
英文名：PCR fragment Purification Kit(with 96-wells plate)
编号：BTN131211
规格：1次

欲了解更多96孔板PCR片段纯化回收试剂盒(真空法) 核酸电泳和回收的品牌、产地、价格及说明书等产品信息，请致电北京百奥莱博科技有限公司，我们将竭诚为您服务，另外，以下产品正在火爆促销:

·EDTA溶液(0.5M，蛋白级)
编号：BTN100837
英文名称：EDTA Solution
规格：10mL
本产品为无色液体，浓度为0.5mol/L，pH8.0。工作浓度为0.5～1.5mmol/L(0.2～0.5mg/mL)。EDTA是一种常用的螯合剂，可以螯合Mg2＋、Ca2＋等金属离子，可以抑制金属蛋白水解酶和DNase。


储存条件：常温运输，4℃保存，有效期一年。

·一站式TA克隆试剂盒(含感受态细胞)
编号：BTN90801B
英文名称：One-Stop TA Cloning Kit(B)
规格：20次
TA克隆就是利用T载体两个3´端各带有一个T突出，而PCR扩增产物两个3´端各带有一个A突出的特点，在DNA连接酶的作用下，将PCR产物克隆到T载体中的过程，它是克隆PCR扩增产物的主要手段。

产品特点：
1.一站式，用户只需要准备PCR产物即可进行TA克隆。
2. T载体由Xcm I酶切方法制备，两个5´端100%含T突出，自连率几乎为零。
3. 克隆效率高，一次TA克隆实验一般能得到上百个重组子。
4. 阳性率高，一般能到90%以上，大大缩短了筛选工作。
5. 提供供两次实验用的对照插入片段，方便分析实验数据。
6. 插入位点两侧有对称的常见酶切位点(如EcoR I)，便于对克隆的PCR片段进行近一步的分析。
7. 克隆位点两侧分别有T3和T7 RNA聚合酶启动子，便于用克隆的PCR片段制备RNA探针。
8.可以使用pUC/M13 Forward和Reverse测序引物测定插入片段的序列。
9. T克隆位点位于β-半乳糖苷酶的α-肽编码区内，可以进行蓝白斑筛选。
10.含有丝状噬菌体f1 复制起始子，可以制备单链DNA。

名称：96孔板PCR片段纯化回收试剂盒(真空法) 核酸电泳和回收96孔板PCR片段纯化回收试剂盒(真空法) 核酸电泳和回收96孔板PCR片段纯化回收试剂盒(真空法) 核酸电泳和回收
品牌：百奥莱博
英文名：PCR fragment Purification Kit(with 96-wells plate)
编号：BTN131211
规格：1次

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·EDTA溶液(0.5M，蛋白级)
编号：BTN100837
英文名称：EDTA Solution
规格：10mL
本产品为无色液体，浓度为0.5mol/L，pH8.0。工作浓度为0.5～1.5mmol/L(0.2～0.5mg/mL)。EDTA是一种常用的螯合剂，可以螯合Mg2＋、Ca2＋等金属离子，可以抑制金属蛋白水解酶和DNase。


储存条件：储存条件：常温运输，4℃保存，有效期一年。

·一站式TA克隆试剂盒(含感受态细胞)
编号：BTN90801B
英文名称：One-Stop TA Cloning Kit(B)
规格：20次
TA克隆就是利用T载体两个3´端各带有一个T突出，而PCR扩增产物两个3´端各带有一个A突出的特点，在DNA连接酶的作用下，将PCR产物克隆到T载体中的过程，它是克隆PCR扩增产物的主要手段。

产品特点：产品特点：
1.一站式，用户只需要准备PCR产物即可进行TA克隆。
2. T载体由Xcm I酶切方法制备，两个5´端100%含T突出，自连率几乎为零。
3. 克隆效率高，一次TA克隆实验一般能得到上百个重组子。
4. 阳性率高，一般能到90%以上，大大缩短了筛选工作。
5. 提供供两次实验用的对照插入片段，方便分析实验数据。
6. 插入位点两侧有对称的常见酶切位点(如EcoR I)，便于对克隆的PCR片段进行近一步的分析。
7. 克隆位点两侧分别有T3和T7 RNA聚合酶启动子，便于用克隆的PCR片段制备RNA探针。
8.可以使用pUC/M13 Forward和Reverse测序引物测定插入片段的序列。
9. T克隆位点位于β-半乳糖苷酶的α-肽编码区内，可以进行蓝白斑筛选。
10.含有丝状噬菌体f1 复制起始子，可以制备单链DNA。

成分	规格
即用型蓝白T载体(50ng/μL)	20μl
对照插入片段(50ng/μL)	5μl
T4快速连接缓冲液，2×	100μl
T4 DNA连接酶(5U/μL)	30μl
超纯水	1ml
高效感受态细胞	100μL×10只(只B型有)
说明书	1份

成分规格即用型蓝白T载体(50ng/μL)20μl对照插入片段(50ng/μL)5μlT4快速连接缓冲液，2×100μlT4 DNA连接酶(5U/μL)30μl超纯水1ml高效感受态细胞100μL×10只(只B型有)说明书1份成分规格成分成分规格规格即用型蓝白T载体(50ng/μL)20μl即用型蓝白T载体(50ng/μL)即用型蓝白T载体(50ng/μL)20μl20μl对照插入片段(50ng/μL)5μl对照插入片段(50ng/μL)对照插入片段(50ng/μL)5μl5μlT4快速连接缓冲液，2×100μlT4快速连接缓冲液，2×T4快速连接缓冲液，2×100μl100μlT4 DNA连接酶(5U/μL)30μlT4 DNA连接酶(5U/μL)T4 DNA连接酶(5U/μL)30μl30μl超纯水1ml超纯水超纯水1ml1ml高效感受态细胞100μL×10只(只B型有)高效感受态细胞高效感受态细胞100μL×10只(只B型有)100μL×10只(只B型有)说明书1份说明书说明书1份1份

储存条件：储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。感受态细胞需要干冰运输，-70℃保存，有效期6个月。

自备试剂：自备试剂：插入片段。

使用方法：使用方法：

一：PCR产物的纯化和定量注意事项PCR产物的纯化和定量注意事项
1. 由于PCR体系中有大量会抑制DNA连接反应的dATP、还有一些可能在电泳胶上不一定会显示出来的非特异性扩增产物和引物二聚体，所以PCR产物必须用胶回收方法制备才能用于本试剂盒的连接。可以分别使用本公司柱式DNArc(BTN60202)和PAGE DNArc(包括柱式PAGE DNArc)从琼脂糖胶和PAGE胶上纯化回收PCR片段。具体操作见相关产品使用手册。
2. 琼脂糖胶回收的电泳缓冲液最好不要使用TBE缓冲液，因为它会影响DNA的胶回收效率。
3. 为避免UV对DNA的伤害，切胶最好在日光下进行(使用百奥莱博的绿如蓝染料的话，可以直接在黑色背景下看见DNA条带，不需要紫外光)。如果使用EB或其他染料，必须在紫外下切胶时，最好选择长波(360nm)紫外灯并以最快速度切胶，文献报道短波UV(300nm和240nm)会使DNA连接效率降低400多倍。使用短波UV时，可以使用百奥莱博的DNA防护剂UV Scavenger(BTN60601)减少伤害。
4. PCR片段的体积越小越便于后续操作。洗脱PCR片段时，用最少量的洗脱液洗脱。
 本试剂盒要求PCR回收片段的浓度最好为50ng/μL。如果浓度不够，最好用醇沉淀法沉淀后直接在管内设置连接反应，也可以使用本公司的核酸浓缩剂(BTN110801)直接浓缩。
5. 为准确定量回收的PCR产物同时又节约样品，最好使用微量分光光度计(只需用1μL样品测量)。如果分光光度计需要大量样品，建议使用电泳法定量：将回收的PCR片段与浓度已知的DNA Marker在含EB或绿如蓝染料的琼脂糖凝胶中电泳，通过比较DNA条带的相对荧光强度而估测PCR产物的浓度。

二：连接反应连接反应
1. 短暂离心装有蓝白T载体、连接缓冲液和T4连接酶的离心管。
2.在三个离心管中加入下列成分(注意，对照可以不做，在出现问题时再做)：

成份	样品管	阳性对照管	自连对照管
T4快速连接缓冲液，2×	5μl	5μl	5μl
蓝白T载体(50 ng/μL)(=0.03 pmol/μL)	1μl	1μl	1μl
自备PCR 纯化产物(0.03-0.1 pmol/μL)	Xμl(见注)	不加	不加
对照插入片段(50ng/μL)(=0.06 pmol/μL)	不加	1.5μl	不加
T4 DNA连接酶(5U/μL)	1-1.5μL	1-1.5μL	1-1.5μL
超纯水	补到10μL	补到10μL	补到10μL

成份样品管阳性对照管自连对照管T4快速连接缓冲液，2×5μl5μl5μl蓝白T载体(50 ng/μL)(=0.03 pmol/μL)1μl1μl1μl自备PCR 纯化产物(0.03-0.1 pmol/μL)Xμl(见注)不加不加对照插入片段(50ng/μL)(=0.06 pmol/μL)不加1.5μl不加T4 DNA连接酶(5U/μL)1-1.5μL1-1.5μL1-1.5μL超纯水补到10μL补到10μL补到10μL成份样品管阳性对照管自连对照管成份成份样品管样品管阳性对照管阳性对照管自连对照管自连对照管T4快速连接缓冲液，2×5μl5μl5μlT4快速连接缓冲液，2×T4快速连接缓冲液，2×5μl5μl5μl5μl5μl5μl蓝白T载体(50 ng/μL)(=0.03 pmol/μL)1μl1μl1μl蓝白T载体(50 ng/μL)(=0.03 pmol/μL)蓝白T载体(50 ng/μL)(=0.03 pmol/μL)1μl1μl1μl1μl1μl1μl自备PCR 纯化产物(0.03-0.1 pmol/μL)Xμl(见注)不加不加自备PCR 纯化产物(0.03-0.1 pmol/μL)自备PCR 纯化产物(0.03-0.1 pmol/μL)Xμl(见注)Xμl(见注)不加不加不加不加对照插入片段(50ng/μL)(=0.06 pmol/μL)不加1.5μl不加对照插入片段(50ng/μL)(=0.06 pmol/μL)对照插入片段(50ng/μL)(=0.06 pmol/μL)不加不加1.5μl1.5μl不加不加T4 DNA连接酶(5U/μL)1-1.5μL1-1.5μL1-1.5μLT4 DNA连接酶(5U/μL)T4 DNA连接酶(5U/μL)1-1.5μL1-1.5μL1-1.5μL1-1.5μL1-1.5μL1-1.5μL超纯水补到10μL补到10μL补到10μL超纯水超纯水补到10μL补到10μL补到10μL补到10μL补到10μL补到10μL
注: 如何根据T载体的用量计算PCR纯化片段的最佳用量？
第一：确定插入片段与载体的最佳摩尔比，在本产品的T载体的长度固定(3Kb)时，最佳摩尔比跟插入片段的长度关系如下：

插入片段长度	与载体的摩尔比
1Kb以下	2:1或3:1
跟T载体接近(±1Kb)	1:1
比T载体长1Kb或更多	1:2或1:3

插入片段长度与载体的摩尔比1Kb以下2:1或3:1跟T载体接近(±1Kb)1:1比T载体长1Kb或更多1:2或1:3插入片段长度与载体的摩尔比插入片段长度插入片段长度与载体的摩尔比与载体的摩尔比1Kb以下2:1或3:11Kb以下1Kb以下2:1或3:12:1或3:1跟T载体接近(±1Kb)1:1跟T载体接近(±1Kb)跟T载体接近(±1Kb)1:11:1比T载体长1Kb或更多1:2或1:3比T载体长1Kb或更多比T载体长1Kb或更多1:2或1:31:2或1:3
第二：根据选定的最佳摩尔比按下面方程式计算用量：

本产品提供的T载体长度为3 Kb，推荐用量为50ng，如果PCR片段长度为0.5 Kb，最佳摩尔比设定为3:1，则其用量为:

3. 用移液器吹打连接反应液使之混匀，然后放置在16℃孵育30分钟-过夜。
4. 65℃5分钟灭活连接酶后直接用于转化或-20℃保存。

三：细菌转化及筛选细菌转化及筛选(仅供参考，本产品不提供相关试剂)
1. 将100μl转化效率在1×108 cfu/μg以上的感受态细胞于冰上解冻。
2. 取5-10μl连接产物加入到感受态细胞中，轻轻旋转几次以混匀内容物。
3.在冰上放置30分钟。
4. 将离心管放42℃热休克90秒，然后快速将其转移到冰浴中放置1～2分钟。
5. 每管中加900μl LB培养基，37℃振荡培养1小时复苏细胞。
6. 将100μL复苏涂布到含Amp的LB琼脂平板上(也可加上X-gal和IPTG)。
7.室温4,000rpm离心剩余的900μl复苏细胞5分钟，弃去800μl上清，用剩余100μL培养基重悬细胞并涂布到含Amp的LB琼脂平板上(可加X-gal、IPTG)。
8. 将平板置于室温直至液体被吸收。此步非常重要，否则培养板将在37℃排除水分，细菌将随水在培养基上到处游动，不能形成单个菌落。
9. 倒置平皿，于37℃培养，12～16小时后可出现菌落。一般情况下阳性对照组总共会有上千个菌落(100μl转化液产生的菌落数×10)，自联对照只有少数几个菌落，样品组的菌落数取决于PCR回收片段的质量。
10. 按常规方法筛选重组子。

MCS位点：MCS位点：



96孔板PCR片段纯化回收试剂盒(真空法) 核酸电泳和回收96孔板PCR片段纯化回收试剂盒(真空法) 核酸电泳和回收96孔板PCR片段纯化回收试剂盒(真空法) 核酸电泳和回收关键词：真空法,96孔板PCR片段纯化回收试剂盒,BTN131211,PCR fragment Purification Kit(with 96-wells plate),96孔板PCR片段纯化回收试剂盒(真空法)

ARB11202 人组织蛋白去乙酰化酶(HD)elisa检测说明书 Human Histone deacetylase,hd ELISA KIT
58-58-2 嘌呤霉素盐*(代"酸")盐 Puromycin,2HCl
PY02-184 色*酸培养基 250克
7-羟基-4-甲基香豆素 Succinimide 90-33-5
L-酪*酸甲酯 3-Nitrophenol 1080-06-4
BTN131231 Oligo(dT)纤维素 Oligo(dT)Cellulose
羟基乙酸 Polyamide 79-14-1
BL0872 羊抗猪IgG免疫血清
CYB163063 兔抗狗IgG-FICT
BTN130675 核糖核酸酶HII RNase HII
ARB12353 大鼠阿立新A(OrexIn A)血清中含量检测 Rat orexin a ELISA KIT
N-甲基-D-葡糖胺 MBTH Hydrochloride 6284-40-8
J0313 兔抗人IgM(H+L)抗血清 1ml/10ml
ARB12763 小鼠IgG Fc片段(IgGFcγ)酶免分析 Mouse iggfcγ ELISA KIT
PY04-043 吖啶黄素(VI) 2.5mg/支×10支 加入100ml Fraser/Half Fraser肉汤基础中制成Fraser肉汤，用于李斯特氏菌的选择性增菌培养
ARB11468 人胰岛素受体底物2(IRS-2)elisa检测操作说明书 Human insulin receptor substRate 2,irs-2 ELISA KIT
79-06-1 丙*(代"烯")酰胺 Acrylamide
ARB12205 大鼠孕激素/孕酮(PROG)定量分析 Rat progesterone,prog ELISA KIT
ARB11984 大鼠GATA结合蛋白4(GATA4)酶标法分析 Rat gata binding protein 4,gata4 ELISA KIT
119-44-8 酵母粉
14375-45-2 脱落酸 Abscisic acid (ABA)
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·硫*(代"酸")链霉素溶液
编号：BTN60210
英文名称：Streptomycin Sulfate Solution
规格：10mL
本产品为50mg/mL的硫*(代"酸")链霉素溶液，可以加入到细菌液体或固体培养基中培养含抗性基因的细菌。1943年美国 S.A.瓦克斯曼从链霉菌中析离得到，是继青霉素后第二个生产并用于临床的抗生素。它的抗结核杆菌的特效作用，开创了结核病治疗的新纪元。

作用原理：作用原理：高浓度的链霉素主要与细菌核糖体30S亚单位的S12结合，阻止甲硫*酸-tRNA与核糖体30S亚单位结合，从而抑制蛋白质合成的启动。低浓度时，链霉素导致mRNA的错读。

抗性机制：抗性机制：抗性基因str特异性表达一种蛋白酶，可修饰链霉素，抑制其与核糖体结合。

储存条件：储存条件：低温运输，4℃避光保存，有效期6个月。

·LAMP扩增阳性对照
编号：BTN130923
英文名称：LAMP Positive Control
规格：50次
本产品为LAMP扩增专用的阳性对照，用于判断、分析LAMP等温扩增结果。LAMP等温扩增，即Loop-Mediated Isothermal Amplification(环介导等温扩增)，是2000年才出现的一种新颖的等温核酸扩增方法。它利用4条模板专一的特异引物和具有链置换能力的DNA聚合酶，在等温条件下(63℃左右)30－60分钟完成扩增。该技术在灵敏度、特异性和检测范围等指标上能媲美甚至优于PCR技术，同时还不需要模板的热变性、温度循环、电泳及紫外观察等过程，不依赖任何专门的仪器设备。目前已成功应用于人类及动植物、细菌、病毒、寄生虫、真菌等病原体的快速检测。

产品组成：产品组成：

成分	规格
对照模板DNA	50μl
对照引物混合物	200μl
说明书	1份

成分规格对照模板DNA50μl对照引物混合物200μl说明书1份成分规格成分成分规格规格对照模板DNA50μl对照模板DNA对照模板DNA50μl50μl对照引物混合物200μl对照引物混合物对照引物混合物200μl200μl说明书1份说明书说明书1份1份

储存条件：储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：使用方法：
1.在冰上溶解除酶外的各种组份，其中LAMP Mix(2×)、MgCl2(25mM)和Bst DNA聚合酶(8U/μL)等试剂自备(参照本公司产品100203组分)，混匀，稍离心。在反应管中加入以下组份：

成份	阴性对照管	阳性对照管
LAMP Mix(2×)	10μl	10μl
对照引物混合物	4.0μl	4.0μl
对照模板DNA	不加	1μl
MgCl2(25mM)	3μl	3μl
Bst DNA聚合酶(8U/μL)	1.5μl	1.5μl
水	1.5μl	0.5μl

成份阴性对照管阳性对照管LAMP Mix(2×)10μl10μl对照引物混合物4.0μl4.0μl对照模板DNA不加1μlMgCl2(25mM)3μl3μlBst DNA聚合酶(8U/μL)1.5μl1.5μl水1.5μl0.5μl成份阴性对照管阳性对照管成份成份阴性对照管阴性对照管阳性对照管阳性对照管LAMP Mix(2×)10μl10μlLAMP Mix(2×)LAMP Mix(2×)10μl10μl10μl10μl对照引物混合物4.0μl4.0μl对照引物混合物对照引物混合物4.0μl4.0μl4.0μl4.0μl对照模板DNA不加1μl对照模板DNA对照模板DNA不加不加1μl1μlMgCl2(25mM)3μl3μlMgCl2(25mM)MgCl2(25mM)3μl3μl3μl3μlBst DNA聚合酶(8U/μL)1.5μl1.5μlBst DNA聚合酶(8U/μL)Bst DNA聚合酶(8U/μL)1.5μl1.5μl1.5μl1.5μl水1.5μl0.5μl水水1.5μl1.5μl0.5μl0.5μl
2. 混匀，置于60-65℃保温120分钟。
3. 80℃下保温10分钟灭活Bst DNA聚合酶。
4.产物置于-20℃备用或立即用于下游检测。扩增产物可选下列方法之一检测:
a)琼脂糖凝胶电泳。取扩增产物5μL，1-2%的琼脂糖凝胶电泳，可见LAMP特征性电泳图谱；
b)向扩增产物中直接加入本公司PCR级绿如蓝染料(另售)1μL，混匀，稍离心。将反应管置于紫外透射仪或凝胶成像系统中，紫外灯下可见绿色荧光产生；
c)荧光定量检测。

北京百莱博科技有限公司专业生产供应销*(代"售")生物试剂、化学试剂、抗原抗体、血清血浆、Elisa试剂盒，更多试剂产品需求，欢迎来电咨询选购96孔板PCR片段纯化回收试剂盒(真空法) 核酸电泳和回收。

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