猪圆环病毒Ⅱ型抗体检测试剂盒(酶联免疫法)
【产品名称】
通用名:猪圆环病毒Ⅱ型抗体检测试剂盒(酶联免疫法)
英文名:Test Kit for Antibodies to Porcine Circovirus 2 (ELISA)
【包装规格】 96T×1/盒、96T×2/盒、96T×5/盒
【预期用途】 猪圆环病毒病是由猪圆环病毒Ⅱ型(Porcine Circovirus 2,PCV2)引起的猪的一种多系统功能障碍性疾病,其临床表现多种多样,主要为断奶仔猪多系统衰竭综合症、猪皮炎与肾病综合征、母猪繁殖障碍等。
本试剂用于检测猪血清中猪圆环病毒Ⅱ型抗体,可用于猪圆环病毒Ⅱ型疫苗免疫效果评价。
【原 理】
本试剂盒由预包被猪圆环病毒Ⅱ型重组cap蛋白的酶标板、酶标记物及其他配套试剂组成,应用酶联免疫法(ELISA)原理检测猪血清、血浆样本中猪圆环病毒Ⅱ型抗体。实验时在酶标板中加入对照血清和待检样本,经温育后若样品中含有猪圆环病毒Ⅱ型抗体,则将与酶标板上抗原结合,经洗涤除去未结合的其他成分后;再加入酶标记物,与酶标板上抗原抗体复合物发生特异性结合;再经洗涤除去未结合的酶标记物,在孔中加TMB底物液,与酶标结合物反应形成蓝色产物,显色深浅与样品中的特异性抗体含量成正相关;加入终止液终止反应后,产物变为黄色;用酶标仪在450nm波长测定各反应孔中的吸光值,即可知样品是否含有猪圆环病毒Ⅱ型抗体。
【试剂盒组成】



序号 | 名称 | 规格/96T×1 | 规格/96T×2 | 规格/96T×5 |
1 | 酶标记物 | 11ml×1(红盖) | 11ml×2(红盖) | 26ml×2(红盖) |
2 | 样品稀释液 | 50ml×1(黄盖) | 50ml×1(黄盖) | 200ml×1(黄盖) |
3 | 20X浓缩洗涤液 | 40ml×1(白盖) | 40ml×1(白盖) | 200ml×1(白盖) |
4 | 底物液A | 6ml×1(白盖) | 11ml×1(白盖) | 26ml×1(白盖) |
5 | 底物液B | 6ml×1(黑盖) | 11ml×1(棕盖) | 26ml×1(黑盖) |
6 | 终止液 | 6ml×1(黄盖) | 11ml×1(黄盖) | 26ml×1(黄盖) |
7 | 阳性对照 | 1.0 ml×1(红盖) | 1.5 ml×1(红盖) | 2.0 ml×1(红盖) |
8 | 阴性对照 | 1.0 ml×1(绿盖) | 1.5 ml×1(绿盖) | 2.0 ml×1(绿盖) |
9 | 酶标板 | 96T×1 | 96T×2 | 96T×5 |
10 | 盖板膜 | 1 | 2 | 5 |
11 | 自封袋 | 1 | 1 | 2 |
12 | 说明书 | 1 | 1 | 1 |
13 | 稀释板 | 1 | 2 | 5 |
序号
名称
规格/96T×1
规格/96T×2
规格/96T×5
1
酶标记物
11ml×1(红盖)
11ml×2(红盖)
26ml×2(红盖)
2
样品稀释液
50ml×1(黄盖)
50ml×1(黄盖)
200ml×1(黄盖)
3
20X浓缩洗涤液
40ml×1(白盖)
40ml×1(白盖)
200ml×1(白盖)
4
底物液A
6ml×1(白盖)
11ml×1(白盖)
26ml×1(白盖)
5
底物液B
6ml×1(黑盖)
11ml×1(棕盖)
26ml×1(黑盖)
6
终止液
6ml×1(黄盖)
11ml×1(黄盖)
26ml×1(黄盖)
7
阳性对照
1.0 ml×1(红盖)
1.5 ml×1(红盖)
2.0 ml×1(红盖)
8
阴性对照
1.0 ml×1(绿盖)
1.5 ml×1(绿盖)
2.0 ml×1(绿盖)
9
酶标板
96T×1
96T×2
96T×5
10
盖板膜
1
2
5
11
自封袋
1
1
2
12
说明书
1
1
1
13
稀释板
1
2
5
序号
名称
规格/96T×1
规格/96T×2
规格/96T×5
序号
序号
序号序号序号序号序号序号名称
名称
名称名称名称名称名称名称规格/96T×1
规格/96T×1
规格/96T×1规格/96T×1规格/96T×1规格/96T×1规格/96T×1规格/96T×1规格/96T×2
规格/96T×2
规格/96T×2规格/96T×2规格/96T×2规格/96T×2规格/96T×2规格/96T×2规格/96T×5
规格/96T×5
规格/96T×5规格/96T×5规格/96T×5规格/96T×5规格/96T×5规格/96T×51
酶标记物
11ml×1(红盖)
11ml×2(红盖)
26ml×2(红盖)
1
1
111111酶标记物
酶标记物
酶标记物酶标记物酶标记物酶标记物酶标记物11ml×1(红盖)
11ml×1(红盖)
11ml×1(红盖)11ml×1(红盖)11ml×1(红盖)11ml11ml11ml×1(红盖)×1(红盖)11ml×2(红盖)
11ml×2(红盖)
11ml×2(红盖)11ml×2(红盖)11ml×2(红盖)11ml11ml11ml×2(红盖)×2(红盖)26ml×2(红盖)
26ml×2(红盖)
26ml×2(红盖)26ml×2(红盖)26ml×2(红盖)26ml26ml26ml×2(红盖)×2(红盖)2
样品稀释液
50ml×1(黄盖)
50ml×1(黄盖)
200ml×1(黄盖)
2
2
222222样品稀释液
样品稀释液
样品稀释液样品稀释液样品稀释液样品稀释液样品稀释液50ml×1(黄盖)
50ml×1(黄盖)
50ml×1(黄盖)50ml×1(黄盖)50ml×1(黄盖)50ml50ml50ml×1(黄盖)×1(黄盖)50ml×1(黄盖)
50ml×1(黄盖)
50ml×1(黄盖)50ml×1(黄盖)50ml×1(黄盖)50ml50ml50ml×1(黄盖)×1(黄盖)200ml×1(黄盖)
200ml×1(黄盖)
200ml×1(黄盖)200ml×1(黄盖)200ml×1(黄盖)200ml200ml200ml×1(黄盖)×1(黄盖)3
20X浓缩洗涤液
40ml×1(白盖)
40ml×1(白盖)
200ml×1(白盖)
3
3
33333320X浓缩洗涤液
20X浓缩洗涤液
20X浓缩洗涤液20X浓缩洗涤液20X浓缩洗涤液20X20X20X浓缩洗涤液浓缩洗涤液40ml×1(白盖)
40ml×1(白盖)
40ml×1(白盖)40ml×1(白盖)40ml×1(白盖)40ml40ml40ml×1(白盖)×1(白盖)40ml×1(白盖)
40ml×1(白盖)
40ml×1(白盖)40ml×1(白盖)40ml×1(白盖)40ml40ml40ml×1(白盖)×1(白盖)200ml×1(白盖)
200ml×1(白盖)
200ml×1(白盖)200ml×1(白盖)200ml×1(白盖)200ml200ml200ml×1(白盖)×1(白盖)4
底物液A
6ml×1(白盖)
11ml×1(白盖)
26ml×1(白盖)
4
4
444444底物液A
底物液A
底物液A底物液A底物液A底物液A底物液A6ml×1(白盖)
6ml×1(白盖)
6ml×1(白盖)6ml×1(白盖)6ml×1(白盖)6ml6ml6ml×1(白盖)×1(白盖)11ml×1(白盖)
11ml×1(白盖)
11ml×1(白盖)11ml×1(白盖)11ml×1(白盖)11ml11ml11ml×1(白盖)×1(白盖)26ml×1(白盖)
26ml×1(白盖)
26ml×1(白盖)26ml×1(白盖)26ml×1(白盖)26ml26ml26ml×1(白盖)×1(白盖)5
底物液B
6ml×1(黑盖)
11ml×1(棕盖)
26ml×1(黑盖)
5
5
555555底物液B
底物液B
底物液B底物液B底物液B底物液B底物液B6ml×1(黑盖)
6ml×1(黑盖)
6ml×1(黑盖)6ml×1(黑盖)6ml×1(黑盖)6ml6ml6ml×1(黑盖)×1(黑盖)11ml×1(棕盖)
11ml×1(棕盖)
11ml×1(棕盖)11ml×1(棕盖)11ml×1(棕盖)11ml11ml11ml×1(棕盖)×1(棕盖)26ml×1(黑盖)
26ml×1(黑盖)
26ml×1(黑盖)26ml×1(黑盖)26ml×1(黑盖)26ml26ml26ml×1(黑盖)×1(黑盖)6
终止液
6ml×1(黄盖)
11ml×1(黄盖)
26ml×1(黄盖)
6
6
666666终止液
终止液
终止液终止液终止液终止液终止液6ml×1(黄盖)
6ml×1(黄盖)
6ml×1(黄盖)6ml×1(黄盖)6ml×1(黄盖)6ml6ml6ml×1(黄盖)×1(黄盖)11ml×1(黄盖)
11ml×1(黄盖)
11ml×1(黄盖)11ml×1(黄盖)11ml×1(黄盖)11ml11ml11ml×1(黄盖)×1(黄盖)26ml×1(黄盖)
26ml×1(黄盖)
26ml×1(黄盖)26ml×1(黄盖)26ml×1(黄盖)26ml26ml26ml×1(黄盖)×1(黄盖)7
阳性对照
1.0 ml×1(红盖)
1.5 ml×1(红盖)
2.0 ml×1(红盖)
7
7
777777阳性对照
阳性对照
阳性对照阳性对照阳性对照阳性对照阳性对照1.0 ml×1(红盖)
1.0 ml×1(红盖)
1.0 ml×1(红盖)1.0 ml×1(红盖)1.0 ml×1(红盖)1.0 ml1.0 ml1.0 ml×1(红盖)×1(红盖)1.5 ml×1(红盖)
1.5 ml×1(红盖)
1.5 ml×1(红盖)1.5 ml×1(红盖)1.5 ml×1(红盖)1.5 ml1.5 ml1.5 ml×1(红盖)×1(红盖)2.0 ml×1(红盖)
2.0 ml×1(红盖)
2.0 ml×1(红盖)2.0 ml×1(红盖)2.0 ml×1(红盖)2.0 ml2.0 ml2.0 ml×1(红盖)×1(红盖)8
阴性对照
1.0 ml×1(绿盖)
1.5 ml×1(绿盖)
2.0 ml×1(绿盖)
8
8
888888阴性对照
阴性对照
阴性对照阴性对照阴性对照阴性对照阴性对照1.0 ml×1(绿盖)
1.0 ml×1(绿盖)
1.0 ml×1(绿盖)1.0 ml×1(绿盖)1.0 ml×1(绿盖)1.0 ml1.0 ml1.0 ml×1(绿盖)×1(绿盖)1.5 ml×1(绿盖)
1.5 ml×1(绿盖)
1.5 ml×1(绿盖)1.5 ml×1(绿盖)1.5 ml×1(绿盖)1.5 ml1.5 ml1.5 ml×1(绿盖)×1(绿盖)2.0 ml×1(绿盖)
2.0 ml×1(绿盖)
2.0 ml×1(绿盖)2.0 ml×1(绿盖)2.0 ml×1(绿盖)2.0 ml2.0 ml2.0 ml×1(绿盖)×1(绿盖)9
酶标板
96T×1
96T×2
96T×5
9
9
999999酶标板
酶标板
酶标板酶标板酶标板酶标板酶标板96T×1
96T×1
96T×196T×196T×196T96T96T×1×196T×2
96T×2
96T×296T×296T×296T96T96T×2×296T×5
96T×5
96T×596T×596T×596T96T96T×5×510
盖板膜
1
2
5
10
10
101010101010盖板膜
盖板膜
盖板膜盖板膜盖板膜盖板膜盖板膜1
1
1111112
2
2222225
5
55555511
自封袋
1
1
2
11
11
111111111111自封袋
自封袋
自封袋自封袋自封袋自封袋自封袋1
1
1111111
1
1111112
2
22222212
说明书
1
1
1
12
12
121212121212说明书
说明书
说明书说明书说明书说明书说明书1
1
1111111
1
1111111
1
11111113
稀释板
1
2
5
13
13
131313131313稀释板
稀释板
稀释板稀释板稀释板稀释板稀释板1
1
1111112
2
2222225
5
555555
【储存及有效期】 2~8℃保存,有效期12个月。
包被板开封后请于2~8℃避光保存,避免受潮。使用期限为2个月。
【适用仪器】 含450nm、630nm波长的酶标仪,37℃恒温设备,可调微量移液器。
【样品准备】
1.取动物全血按常规方法制备血清,要求血清清亮,无溶血、无污染。样品1周内可于2~8℃保存,长期需置-20℃保存。
2.用样品稀释液将待检血清按40倍稀释(如5μl血清加入195μl样品稀释液中,混匀)。阴、阳性对照不用稀释。
3.浓缩洗涤液使用前应恢复至室温使沉淀溶解,然后用蒸馏水或去离子水作20倍稀释成工作洗涤液(如19份蒸馏水或去离子水+1份浓缩洗涤液)。
【检验方法】
1.使用前将试剂盒置室温30分钟,恢复至室温。
2.取所需用量酶标板条,设空白对照1孔、阴性/阳性对照各2孔,未用的板条尽快密封,2~8℃保存。
3.空白对照孔加样品稀释液100μl;阴、阳性对照孔分别加入阴、阳性对照100μl;样品孔每孔加入稀释后的样品100μl。
4.混匀,盖好盖板膜,置37℃(推荐水浴)避光反应30分钟。
5.甩去孔内液体,每孔加350 ul工作洗涤液,静置30秒后弃去,重复洗涤5次,最后一次拍干。
6.每孔加酶标记物100μl(空白孔除外)。盖好盖板膜,置37℃避光反应30分钟。
7.洗涤,同步骤5。
8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl,混匀,盖好盖板膜,置37℃避光反应10分钟。
9.每孔加终止液50μl,混匀,于450nm(可用630nm作参比波长)测定各孔吸光值(A值),无参比波长用空白孔调零(即所有孔吸光值减去空白孔吸光值)。
【参考值】 实验正常的情况下,阴性对照≤0.10,阳性对照≥0.6。
【检验结果的解释】
1.样品A值≥0.38为阳性;样品A值在0.2到0.38之间为可疑;样品A值<0.2为阴性。
2.本实验结果为阴性或可疑时表明猪只抗体水平不足,建议补打相应疫苗。
【试验方法的局限性】
该试验仅作为定性检测猪血清、血浆中猪圆环病毒Ⅱ型抗体,根据A值高低可作抗体水平强、中、弱的粗略评估。
【注意事项】
1.实验操作时需戴手套、穿工作衣,严格健全和执行消毒隔离制度,各种实验废弃物都应按传染物处理。
2.终止液具有腐蚀性,应避免接触皮肤和衣物,如不慎接触请立即用大量自来水冲洗。
3.酶标板从冷藏环境中取出时应恢复至室温方可开袋,未用完的酶标板需放入有干燥剂的密封袋中保存。
4.浓缩洗涤液在低温时容易结晶,使用时需恢复至室温以完全溶解。
5.洗涤时各孔均需加满液体,防止孔口有游离酶不能洗净。
6.用于检测的样品应保持新鲜。
7.试验结果的判定必须以酶标仪读数为准。
8.不同批号试剂组分不得混用。









