鸡血藤染料法PCR鉴定试剂盒
Caulis spatholobi
产品及特点：
鸡血藤(Caulis spatholobi)是群中等小的双股DNA病毒，根据其理化性质分 α、β、γ、未分类疱疹病毒四个亚科。疱疹病毒感染的宿主范围广泛，可感染人类和其他脊椎动物。在自然界广泛存在，主要侵犯外胚层发育而成的组织，例如：皮肤、粘膜和神经组织。本病有自限性，约 1-2 周即可自愈，治疗的目的是防止下次复发，本病目前尚无特效药物，治疗原则为缩短病程，防止继发感染，减少复发，所以疱疹病毒对人体和动物健康仍有损害，因此鸡血藤的快速准确鉴定对该病的预防和检疫有着重要作用，为此本公司开发了简单快捷的鸡血藤染料法荧光定量PCR检测试剂盒。鸡血藤染料法PCR鉴定试剂盒
Caulis spatholobi
产品及特点：
鸡血藤(Caulis spatholobi)是群中等小的双股DNA病毒，根据其理化性质分 α、β、γ、未分类疱疹病毒四个亚科。疱疹病毒感染的宿主范围广泛，可感染人类和其他脊椎动物。在自然界广泛存在，主要侵犯外胚层发育而成的组织，例如：皮肤、粘膜和神经组织。本病有自限性，约 1-2 周即可自愈，治疗的目的是防止下次复发，本病目前尚无特效药物，治疗原则为缩短病程，防止继发感染，减少复发，所以疱疹病毒对人体和动物健康仍有损害，因此鸡血藤的快速准确鉴定对该病的预防和检疫有着重要作用，为此本公司开发了简单快捷的鸡血藤染料法荧光定量PCR检测试剂盒。鸡血藤染料法PCR鉴定试剂盒鸡血藤染料法PCR鉴定试剂盒鸡血藤染料法PCR鉴定试剂盒鸡血藤染料法PCR鉴定试剂盒
Caulis spatholobiCaulis spatholobiCaulis spatholobiCaulis spatholobi
产品及特点：产品及特点：产品及特点：产品及特点： 
鸡血藤(Caulis spatholobi鸡血藤(Caulis spatholobi鸡血藤(Caulis spatholobi)))是群中等小的双股是群中等小的双股是群中等小的双股DNADNADNA病毒，根据其理化性质分 α、β、γ、未分类疱疹病毒四个亚科。疱疹病毒感染的宿主范围广泛，可感染人类和其他脊椎动物。在自然界广泛存在，主要侵犯外胚层发育而成的组织，例如：皮肤、粘膜和神经组织。本病有自限性，约 病毒，根据其理化性质分 α、β、γ、未分类疱疹病毒四个亚科。疱疹病毒感染的宿主范围广泛，可感染人类和其他脊椎动物。在自然界广泛存在，主要侵犯外胚层发育而成的组织，例如：皮肤、粘膜和神经组织。本病有自限性，约 病毒，根据其理化性质分 α、β、γ、未分类疱疹病毒四个亚科。疱疹病毒感染的宿主范围广泛，可感染人类和其他脊椎动物。在自然界广泛存在，主要侵犯外胚层发育而成的组织，例如：皮肤、粘膜和神经组织。本病有自限性，约 1-2 1-2 1-2 周即可自愈，治疗的目的是防止下次复发，本病目前尚无特效药物，治疗原则为缩短病程，防止继发感染，减少复发，所以疱疹病毒对人体和动物健康仍有损害，因此鸡血藤的快速准确鉴定对该病的预防和检疫有着重要作用，为此本公司开发了简单快捷的鸡血藤染料法荧光定量周即可自愈，治疗的目的是防止下次复发，本病目前尚无特效药物，治疗原则为缩短病程，防止继发感染，减少复发，所以疱疹病毒对人体和动物健康仍有损害，因此鸡血藤的快速准确鉴定对该病的预防和检疫有着重要作用，为此本公司开发了简单快捷的鸡血藤染料法荧光定量周即可自愈，治疗的目的是防止下次复发，本病目前尚无特效药物，治疗原则为缩短病程，防止继发感染，减少复发，所以疱疹病毒对人体和动物健康仍有损害，因此鸡血藤的快速准确鉴定对该病的预防和检疫有着重要作用，为此本公司开发了简单快捷的鸡血藤染料法荧光定量PCRPCRPCR检测试剂盒。检测试剂盒。检测试剂盒。

产品名称	方法	规格	价格
鸡血藤LAMP鉴定试剂盒	LAMP	50次	2490元
鸡血藤PCR鉴定试剂盒	PCR	50次	1490元
鸡血藤染料法PCR鉴定试剂盒	染料法	50次	2490元
鸡血藤探针法PCR鉴定试剂盒	探针法	50次	3490元

产品名称方法规格价格鸡血藤LAMP鉴定试剂盒LAMP50次2490元鸡血藤PCR鉴定试剂盒PCR50次1490元鸡血藤染料法PCR鉴定试剂盒染料法50次2490元鸡血藤探针法PCR鉴定试剂盒探针法50次3490元产品名称方法规格价格产品名称产品名称产品名称产品名称产品名称产品名称产品名称产品名称产品名称方法方法方法方法方法方法方法方法方法规格规格规格规格规格规格规格规格规格价格价格价格价格价格价格价格价格价格鸡血藤LAMP鉴定试剂盒LAMP50次2490元鸡血藤LAMP鉴定试剂盒鸡血藤LAMP鉴定试剂盒鸡血藤LAMP鉴定试剂盒鸡血藤LAMP鉴定试剂盒鸡血藤LAMP鉴定试剂盒鸡血藤LAMP鉴定试剂盒鸡血藤LAMP鉴定试剂盒鸡血藤LAMP鉴定试剂盒LAMPLAMPLAMPLAMPLAMPLAMPLAMPLAMP50次50次50次50次50次50次50次50次2490元2490元2490元2490元2490元2490元2490元2490元鸡血藤PCR鉴定试剂盒PCR50次1490元鸡血藤PCR鉴定试剂盒鸡血藤PCR鉴定试剂盒鸡血藤PCR鉴定试剂盒鸡血藤PCR鉴定试剂盒鸡血藤PCR鉴定试剂盒鸡血藤PCR鉴定试剂盒鸡血藤PCR鉴定试剂盒鸡血藤PCR鉴定试剂盒PCRPCRPCRPCRPCRPCRPCRPCR50次50次50次50次50次50次50次50次1490元1490元1490元1490元1490元1490元1490元1490元鸡血藤染料法PCR鉴定试剂盒染料法50次2490元鸡血藤染料法PCR鉴定试剂盒鸡血藤染料法PCR鉴定试剂盒鸡血藤染料法PCR鉴定试剂盒鸡血藤染料法PCR鉴定试剂盒鸡血藤染料法PCR鉴定试剂盒鸡血藤染料法PCR鉴定试剂盒鸡血藤染料法PCR鉴定试剂盒鸡血藤染料法PCR鉴定试剂盒染料法染料法染料法染料法染料法染料法染料法染料法50次50次50次50次50次50次50次50次2490元2490元2490元2490元2490元2490元2490元2490元鸡血藤探针法PCR鉴定试剂盒探针法50次3490元鸡血藤探针法PCR鉴定试剂盒鸡血藤探针法PCR鉴定试剂盒鸡血藤探针法PCR鉴定试剂盒鸡血藤探针法PCR鉴定试剂盒鸡血藤探针法PCR鉴定试剂盒鸡血藤探针法PCR鉴定试剂盒鸡血藤探针法PCR鉴定试剂盒鸡血藤探针法PCR鉴定试剂盒探针法探针法探针法探针法探针法探针法探针法探针法50次50次50次50次50次50次50次50次3490元3490元3490元3490元3490元3490元3490元3490元 它具有下列特点：
1. 即开即用，用户只需要提供病毒样品。
2. 根据鸡血藤保守序列设计的专一性引物，与相关病毒无交叉反应。
3. 灵敏度可以达到几百拷贝/反应。
4. 一管式荧光定量 PCR 检测，避免后续污染。
5. 本试剂盒足够 50 次 20μL 反应体系的荧光定量 PCR。
6. 本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。 
规格及成分它具有下列特点：
1. 即开即用，用户只需要提供病毒样品。
2. 根据鸡血藤保守序列设计的专一性引物，与相关病毒无交叉反应。
3. 灵敏度可以达到几百拷贝/反应。
4. 一管式荧光定量 PCR 检测，避免后续污染。
5. 本试剂盒足够 50 次 20μL 反应体系的荧光定量 PCR。
6. 本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。 
规格及成分它具有下列特点：它具有下列特点：它具有下列特点：它具有下列特点：
1. 即开即用，用户只需要提供病毒样品。1. 即开即用，用户只需要提供病毒样品。1. 即开即用，用户只需要提供病毒样品。
2. 根据鸡血藤保守序列设计的专一性引物，与相关病毒无交叉反应。2. 根据鸡血藤保守序列设计的专一性引物，与相关病毒无交叉反应。2. 根据鸡血藤保守序列设计的专一性引物，与相关病毒无交叉反应。
3. 灵敏度可以达到几百拷贝3. 灵敏度可以达到几百拷贝3. 灵敏度可以达到几百拷贝///反应。反应。反应。
4. 一管式荧光定量 4. 一管式荧光定量 4. 一管式荧光定量 PCR PCR PCR 检测，避免后续污染。检测，避免后续污染。检测，避免后续污染。
5. 本试剂盒足够 5. 本试剂盒足够 5. 本试剂盒足够 50 50 50 次 次 次 202020μμμL L L 反应体系的荧光定量 反应体系的荧光定量 反应体系的荧光定量 PCRPCRPCR。。。
6. 本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。 6. 本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。 6. 本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。 
规格及成分规格及成分规格及成分规格及成分

成分	编号	十孔盒包装
2×qPCR MagicMix	A	500μL（棕色管）
荧光 PCR 专用模板稀释液	B	1 mL（黄盖）
鸡血藤PCR 引物混合物	C	100μL（白盖）
鸡血藤 PCR 阳性对照(1×10E8 拷贝/μL)	D	50μL（红盖）
DNA 病毒裂解液（试用装）	E	15 次（9 mL）
使用手册	F	1 份

成分编号十孔盒包装2×qPCR MagicMixA500μL（棕色管）荧光 PCR 专用模板稀释液B1 mL（黄盖）鸡血藤PCR 引物混合物C100μL（白盖）鸡血藤 PCR 阳性对照(1×10E8 拷贝/μL)D50μL（红盖）DNA 病毒裂解液（试用装）E15 次（9 mL）使用手册F1 份成分编号十孔盒包装成分成分成分成分成分成分成分成分编号编号编号编号编号编号编号编号十孔盒包装十孔盒包装十孔盒包装十孔盒包装十孔盒包装十孔盒包装十孔盒包装十孔盒包装2×qPCR MagicMixA500μL（棕色管）2×qPCR MagicMix2×qPCR MagicMix2×qPCR MagicMix2×qPCR MagicMix2×2×2×qPCR MagicMixqPCR MagicMixqPCR MagicMixAAAAAAA500μL（棕色管）500μL（棕色管）500μL（棕色管）500μL（棕色管）500μ500μ500μLLL（棕色管）（棕色管）（棕色管）荧光 PCR 专用模板稀释液B1 mL（黄盖）荧光 PCR 专用模板稀释液荧光 PCR 专用模板稀释液荧光 PCR 专用模板稀释液荧光 PCR 专用模板稀释液荧光 荧光 荧光 PCR PCR PCR 专用模板稀释液专用模板稀释液专用模板稀释液BBBBBBB1 mL（黄盖）1 mL（黄盖）1 mL（黄盖）1 mL（黄盖）1 mL（黄盖）1 mL（黄盖）1 mL（黄盖）鸡血藤PCR 引物混合物C100μL（白盖）鸡血藤PCR 引物混合物鸡血藤PCR 引物混合物鸡血藤PCR 引物混合物鸡血藤PCR 引物混合物鸡血藤鸡血藤鸡血藤PCR PCR PCR 引物混合物引物混合物引物混合物CCCCCCC100μL（白盖）100μL（白盖）100μL（白盖）100μL（白盖）100μ100μ100μLLL（白盖）（白盖）（白盖）鸡血藤 PCR 阳性对照(1×10E8 拷贝/μL)D50μL（红盖）鸡血藤 PCR 阳性对照(1×10E8 拷贝/μL)鸡血藤 PCR 阳性对照(1×10E8 拷贝/μL)鸡血藤 PCR 阳性对照(1×10E8 拷贝/μL)鸡血藤 PCR 阳性对照(1×10E8 拷贝/μL)鸡血藤 鸡血藤 鸡血藤 PCR PCR PCR 阳性对照阳性对照阳性对照(1(1(1×××10E8 10E8 10E8 拷贝拷贝拷贝///μμμL)L)L)DDDDDDD50μL（红盖）50μL（红盖）50μL（红盖）50μL（红盖）50μ50μ50μLLL（红盖）（红盖）（红盖）DNA 病毒裂解液（试用装）E15 次（9 mL）DNA 病毒裂解液（试用装）DNA 病毒裂解液（试用装）DNA 病毒裂解液（试用装）DNA 病毒裂解液（试用装）DNA 病毒裂解液（试用装）DNA 病毒裂解液（试用装）DNA 病毒裂解液（试用装）EEEEEEE15 次（9 mL）15 次（9 mL）15 次（9 mL）15 次（9 mL）15 次（15 次（15 次（9 mL9 mL9 mL）））使用手册F1 份使用手册使用手册使用手册使用手册使用手册使用手册使用手册FFFFFFF1 份1 份1 份1 份1 份1 份1 份 运输及保存： 低温运输，-20℃保存，有效期一年。
自备试剂 ：DNA 模板、10×ROX（根据机型决定，具体见使用方法）。
使用方法 
一、稀释 PCR 阳性对照（以 10E2-10E7 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例）
1. 注意：由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作为阳性对照。
2. 标记 6 个离心管，分别为 7，6，5，4，3，2。
3. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 专用模板稀释液（最好用带芯枪头，下同）。
4. 在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照，充分震荡 1 分钟，得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
5. 换枪头，在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
6. 换枪头，在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
7. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。运输及保存： 低温运输，-20℃保存，有效期一年。
自备试剂 ：DNA 模板、10×ROX（根据机型决定，具体见使用方法）。
使用方法 
一、稀释 PCR 阳性对照（以 10E2-10E7 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例）
1. 注意：由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作为阳性对照。
2. 标记 6 个离心管，分别为 7，6，5，4，3，2。
3. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 专用模板稀释液（最好用带芯枪头，下同）。
4. 在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照，充分震荡 1 分钟，得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
5. 换枪头，在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
6. 换枪头，在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
7. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。运输及保存：运输及保存：运输及保存：运输及保存： 低温运输，-20℃保存，有效期一年。 低温运输，-20℃保存，有效期一年。 低温运输，-20℃保存，有效期一年。
自备试剂 ：自备试剂 ：自备试剂 ：自备试剂 ：DNA 模板、DNA 模板、DNA 模板、101010×××ROXROXROX（根据机型决定，具体见使用方法）。（根据机型决定，具体见使用方法）。（根据机型决定，具体见使用方法）。
使用方法 使用方法 使用方法 使用方法 
一、稀释 PCR 阳性对照（以 一、稀释 PCR 阳性对照（以 一、稀释 PCR 阳性对照（以 10E2-10E7 10E2-10E7 10E2-10E7 拷贝拷贝拷贝///μμμL L L 这 这 这 6 6 6 个 个 个 10 10 10 倍稀释度为例）倍稀释度为例）倍稀释度为例）
1. 注意：由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供可以直接使用的 1. 注意：由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供可以直接使用的 1. 注意：由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供可以直接使用的 DNA DNA DNA 片段作为阳性对照。片段作为阳性对照。片段作为阳性对照。
2. 标记 2. 标记 2. 标记 6 6 6 个离心管，分别为 个离心管，分别为 个离心管，分别为 777，，，666，，，555，，，444，，，333，，，222。。。
3. 用带芯枪头分别加入 3. 用带芯枪头分别加入 3. 用带芯枪头分别加入 45 45 45 μμμL L L 荧光 荧光 荧光 PCR PCR PCR 专用模板稀释液（最好用带芯枪头，下同）。专用模板稀释液（最好用带芯枪头，下同）。专用模板稀释液（最好用带芯枪头，下同）。
4. 在 4. 在 4. 在 7 7 7 号管中加入 号管中加入 号管中加入 5 5 5 μμμL 1L 1L 1×××10E8 10E8 10E8 拷贝拷贝拷贝///μμμL L L 的阳性对照，充分震荡 的阳性对照，充分震荡 的阳性对照，充分震荡 1 1 1 分钟，得分钟，得分钟，得111×××10E7 10E7 10E7 拷贝拷贝拷贝///μμμL L L 的阳性对照。放冰上待用。的阳性对照。放冰上待用。的阳性对照。放冰上待用。
5. 换枪头，在 5. 换枪头，在 5. 换枪头，在 6 6 6 号管中加入 号管中加入 号管中加入 5 5 5 μμμL 1L 1L 1×××10E7 10E7 10E7 拷贝拷贝拷贝///μμμL L L 的阳性对照的阳性对照的阳性对照(((上步稀释所得上步稀释所得上步稀释所得)))，充分震荡 ，充分震荡 ，充分震荡 1 1 1 分钟，得 分钟，得 分钟，得 111×××10E6 10E6 10E6 拷贝拷贝拷贝///μμμL L L 的阳性对照。放冰上待用。的阳性对照。放冰上待用。的阳性对照。放冰上待用。
6. 换枪头，在 6. 换枪头，在 6. 换枪头，在 5 5 5 号管中加入 号管中加入 号管中加入 5 5 5 μμμL 1L 1L 1×××10E6 10E6 10E6 拷贝拷贝拷贝///μμμL L L 的阳性对照到 的阳性对照到 的阳性对照到 5 5 5 号管中，充分震荡 号管中，充分震荡 号管中，充分震荡 1 1 1 分钟，得 分钟，得 分钟，得 111×××10E5 10E5 10E5 拷贝拷贝拷贝///μμμL L L 的阳性对照。放冰上待用。的阳性对照。放冰上待用。的阳性对照。放冰上待用。
7. 重复上面的操作直到得到 7. 重复上面的操作直到得到 7. 重复上面的操作直到得到 6 6 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。个稀释度的阳性对照。放冰上待用。个稀释度的阳性对照。放冰上待用。

二、样品DNA的制备 
8. 如果有N个样品，必须设置N+2个提取，多出的一个是PC（样品制备阳性对照），一个是NC（样品制备阴性对照）。可以用 10μL上步制备的PCR 阳性对照的第4号（浓度为 1×10E4 拷贝/μL，10μL相当于1万拷贝）或第5号（浓度为1×10E5拷贝/μL，10μL 相当于10万拷贝）再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样，以此作为PC。另外用水作为NC。如果每次制备需要200μL样品，则PC和NC的体积也必须是200μL。
9. 用自选方法纯化样品的DNA，本试剂盒跟市场上大多数病毒DNA提取试剂盒兼容。也可以选购本公司的一管式病毒DNAout 或其升级版柱式病毒DNAout。本试剂盒免费赠送15次一管式病毒DNAout。
三、设置qPCR反应（20μL体系，在样品制备室进行）
10. 如果只做1次重复，则标记N+9个PCR管，其中N+2个用于上步得到的N+2个
样品，1个用于PCR阴性对照，6个用于PCR阳性对照。如果做2-3次重复，则反应设置数量相应增加2或3倍。
11. 在标记管中按下表加入各成分（本表只列出一次重复。样品管和阴性对照设置完毕后才设置阳性对照，并且阳性对照样品要等所有管子盖上盖子储存好后最后加）：二、样品DNA的制备 
8. 如果有N个样品，必须设置N+2个提取，多出的一个是PC（样品制备阳性对照），一个是NC（样品制备阴性对照）。可以用 10μL上步制备的PCR 阳性对照的第4号（浓度为 1×10E4 拷贝/μL，10μL相当于1万拷贝）或第5号（浓度为1×10E5拷贝/μL，10μL 相当于10万拷贝）再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样，以此作为PC。另外用水作为NC。如果每次制备需要200μL样品，则PC和NC的体积也必须是200μL。
9. 用自选方法纯化样品的DNA，本试剂盒跟市场上大多数病毒DNA提取试剂盒兼容。也可以选购本公司的一管式病毒DNAout 或其升级版柱式病毒DNAout。本试剂盒免费赠送15次一管式病毒DNAout。
三、设置qPCR反应（20μL体系，在样品制备室进行）
10. 如果只做1次重复，则标记N+9个PCR管，其中N+2个用于上步得到的N+2个
样品，1个用于PCR阴性对照，6个用于PCR阳性对照。如果做2-3次重复，则反应设置数量相应增加2或3倍。
11. 在标记管中按下表加入各成分（本表只列出一次重复。样品管和阴性对照设置完毕后才设置阳性对照，并且阳性对照样品要等所有管子盖上盖子储存好后最后加）：二、样品DNA的制备 二、样品DNA的制备 二、样品DNA的制备 二、样品DNA的制备 
8. 如果有8. 如果有8. 如果有8. 如果有NNNN个样品，必须设置个样品，必须设置个样品，必须设置个样品，必须设置N+2N+2N+2N+2个提取，多出的一个是个提取，多出的一个是个提取，多出的一个是个提取，多出的一个是PCPCPCPC（样品制备阳性对照），一个是（样品制备阳性对照），一个是（样品制备阳性对照），一个是（样品制备阳性对照），一个是NCNCNCNC（样品制备阴性对照）。可以用 （样品制备阴性对照）。可以用 （样品制备阴性对照）。可以用 （样品制备阴性对照）。可以用 10101010μμμμLLLL上步制备的上步制备的上步制备的上步制备的PCR PCR PCR PCR 阳性对照的第阳性对照的第阳性对照的第阳性对照的第4444号（浓度为 号（浓度为 号（浓度为 号（浓度为 1111××××10E4 10E4 10E4 10E4 拷贝拷贝拷贝拷贝////μμμμLLLL，，，，10101010μμμμLLLL相当于相当于相当于相当于1111万拷贝）或第万拷贝）或第万拷贝）或第万拷贝）或第5555号（浓度为号（浓度为号（浓度为号（浓度为1111××××10E510E510E510E5拷贝拷贝拷贝拷贝////μμμμLLLL，，，，10101010μμμμL L L L 相当于相当于相当于相当于10101010万拷贝）再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样，以此作为万拷贝）再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样，以此作为万拷贝）再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样，以此作为万拷贝）再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样，以此作为PCPCPCPC。另外用水作为。另外用水作为。另外用水作为。另外用水作为NCNCNCNC。如果每次制备需要。如果每次制备需要。如果每次制备需要。如果每次制备需要200200200200μμμμLLLL样品，则样品，则样品，则样品，则PCPCPCPC和和和和NCNCNCNC的体积也必须是的体积也必须是的体积也必须是的体积也必须是200200200200μμμμLLLL。。。。
9. 用自选方法纯化样品的9. 用自选方法纯化样品的9. 用自选方法纯化样品的9. 用自选方法纯化样品的DNADNADNADNA，本试剂盒跟市场上大多数病毒，本试剂盒跟市场上大多数病毒，本试剂盒跟市场上大多数病毒，本试剂盒跟市场上大多数病毒DNADNADNADNA提取试剂盒兼容。也可以选购本公司的一管式病毒提取试剂盒兼容。也可以选购本公司的一管式病毒提取试剂盒兼容。也可以选购本公司的一管式病毒提取试剂盒兼容。也可以选购本公司的一管式病毒DNAout DNAout DNAout DNAout 或其升级版柱式病毒或其升级版柱式病毒或其升级版柱式病毒或其升级版柱式病毒DNAoutDNAoutDNAoutDNAout。本试剂盒免费赠送。本试剂盒免费赠送。本试剂盒免费赠送。本试剂盒免费赠送15151515次一管式病毒次一管式病毒次一管式病毒次一管式病毒DNAoutDNAoutDNAoutDNAout。。。。
三、设置qPCR反应（三、设置qPCR反应（三、设置qPCR反应（三、设置qPCR反应（20202020μμμμLLLL体系，在样品制备室进行）体系，在样品制备室进行）体系，在样品制备室进行）体系，在样品制备室进行）
10. 如果只做10. 如果只做10. 如果只做10. 如果只做1111次重复，则标记次重复，则标记次重复，则标记次重复，则标记N+9N+9N+9N+9个个个个PCRPCRPCRPCR管，其中管，其中管，其中管，其中N+2N+2N+2N+2个用于上步得到的个用于上步得到的个用于上步得到的个用于上步得到的N+2N+2N+2N+2个个个个
样品，1个用于样品，1个用于样品，1个用于样品，1个用于PCRPCRPCRPCR阴性对照，阴性对照，阴性对照，阴性对照，6666个用于个用于个用于个用于PCRPCRPCRPCR阳性对照。如果做阳性对照。如果做阳性对照。如果做阳性对照。如果做2-32-32-32-3次重复，则反应设置数量相应增加次重复，则反应设置数量相应增加次重复，则反应设置数量相应增加次重复，则反应设置数量相应增加2222或或或或3333倍。倍。倍。倍。
11. 在标记管中按下表加入各成分（本表只列出一次重复。样品管和阴性对照设置完毕后才设置阳性对照，并且阳性对照样品要等所有管子盖上盖子储存好后最后加）：11. 在标记管中按下表加入各成分（本表只列出一次重复。样品管和阴性对照设置完毕后才设置阳性对照，并且阳性对照样品要等所有管子盖上盖子储存好后最后加）：11. 在标记管中按下表加入各成分（本表只列出一次重复。样品管和阴性对照设置完毕后才设置阳性对照，并且阳性对照样品要等所有管子盖上盖子储存好后最后加）：11. 在标记管中按下表加入各成分（本表只列出一次重复。样品管和阴性对照设置完毕后才设置阳性对照，并且阳性对照样品要等所有管子盖上盖子储存好后最后加）：

成分	样品管 N2 个	PCR 阴性 对照管	PCR 阳性 对照管（2-7 管）
2×qPCR MagicMix （棕色管）	10 μL	10 μL	各 10 μL
鸡血藤 PCR 引物混合液（白盖）	2 μL	2 μL	各2 μL
自备 10×ROX (见注)	2 μL	2 μL	2 μL
N+2 待测样品 DNA 模板	6 μL	不加	不加
第 7 步所得 PCR 阳性对照稀释液（2-7 号）	不加	不加	各 6μL（2 号样到 2 号管，3 号样到 3 号管…）

成分样品管
N2 个PCR 阴性
对照管PCR 阳性
对照管（2-7 管）2×qPCR MagicMix
（棕色管）10 μL10 μL各 10 μL鸡血藤 PCR
引物混合液（白盖）2 μL2 μL各2 μL自备 10×ROX (见注)2 μL2 μL2 μLN+2 待测样品 DNA 模板6 μL不加不加第 7 步所得 PCR 阳性对照稀释液（2-7 号）不加不加各 6μL（2 号样到
2 号管，3 号样到 3
号管…）成分样品管
N2 个PCR 阴性
对照管PCR 阳性
对照管（2-7 管）成分成分成分成分成分成分成分成分样品管
N2 个样品管
N2 个样品管
N2 个样品管
N2 个样品管样品管样品管样品管
N2 个N2 个N2 个N2 个PCR 阴性
对照管PCR 阴性
对照管PCR 阴性
对照管PCR 阴性
对照管PCR 阴性PCR 阴性PCR 阴性PCR 阴性
对照管对照管对照管对照管PCR 阳性
对照管（2-7 管）PCR 阳性
对照管（2-7 管）PCR 阳性
对照管（2-7 管）PCR 阳性
对照管（2-7 管）PCR 阳性PCR 阳性PCR 阳性PCR 阳性
对照管（对照管（对照管（对照管（2-7 2-7 2-7 2-7 管）管）管）管）2×qPCR MagicMix
（棕色管）10 μL10 μL各 10 μL2×qPCR MagicMix
（棕色管）2×qPCR MagicMix
（棕色管）2×qPCR MagicMix
（棕色管）2×qPCR MagicMix
（棕色管）2×2×2×qPCR MagicMixqPCR MagicMixqPCR MagicMix
（棕色管）（棕色管）（棕色管）10 μL10 μL10 μL10 μL10 μ10 μ10 μLLL10 μL10 μL10 μL10 μL10 μ10 μ10 μLLL各 10 μL各 10 μL各 10 μL各 10 μL各 各 各 10 10 10 μμμLLL鸡血藤 PCR
引物混合液（白盖）2 μL2 μL各2 μL鸡血藤 PCR
引物混合液（白盖）鸡血藤 PCR
引物混合液（白盖）鸡血藤 PCR
引物混合液（白盖）鸡血藤 PCR
引物混合液（白盖）鸡血藤 鸡血藤 鸡血藤 PCRPCRPCR
引物混合液（白盖）引物混合液（白盖）引物混合液（白盖）2 μL2 μL2 μL2 μL2 μ2 μ2 μLLL2 μL2 μL2 μL2 μL2 μ2 μ2 μLLL各2 μL各2 μL各2 μL各2 μL各各各2 2 2 μμμLLL自备 10×ROX (见注)2 μL2 μL2 μL自备 10×ROX (见注)自备 10×ROX (见注)自备 10×ROX (见注)自备 10×ROX (见注)自备 自备 自备 101010×××ROX (ROX (ROX (见注见注见注)))2 μL2 μL2 μL2 μL2 μ2 μ2 μLLL2 μL2 μL2 μL2 μL2 μ2 μ2 μLLL2 μL2 μL2 μL2 μL2 μ2 μ2 μLLLN+2 待测样品 DNA 模板6 μL不加不加N+2 待测样品 DNA 模板N+2 待测样品 DNA 模板N+2 待测样品 DNA 模板N+2 待测样品 DNA 模板N+2 待测样品 N+2 待测样品 N+2 待测样品 DNA DNA DNA 模板模板模板6 μL6 μL6 μL6 μL6 μ6 μ6 μLLL不加不加不加不加不加不加不加不加不加不加不加不加不加不加第 7 步所得 PCR 阳性对照稀释液（2-7 号）不加不加各 6μL（2 号样到
2 号管，3 号样到 3
号管…）第 7 步所得 PCR 阳性对照稀释液（2-7 号）第 7 步所得 PCR 阳性对照稀释液（2-7 号）第 7 步所得 PCR 阳性对照稀释液（2-7 号）第 7 步所得 PCR 阳性对照稀释液（2-7 号）第 第 第 7 7 7 步所得 步所得 步所得 PCR PCR PCR 阳性对照稀释液（阳性对照稀释液（阳性对照稀释液（2-7 2-7 2-7 号）号）号）不加不加不加不加不加不加不加不加不加不加不加不加不加不加各 6μL（2 号样到
2 号管，3 号样到 3
号管…）各 6μL（2 号样到
2 号管，3 号样到 3
号管…）各 6μL（2 号样到
2 号管，3 号样到 3
号管…）各 6μL（2 号样到
2 号管，3 号样到 3
号管…）各 各 各 666μμμLLL（（（2 2 2 号样到号样到号样到
2 号管，2 号管，2 号管，3 3 3 号样到 号样到 号样到 333
号管…）号管…）号管…） 注:仅 ABI7500、7700 和 7900 仪器需要使用 ROX 作为对照，其他荧光PCR仪器（如 iCycler IQ、MJ Option、MJ Chromo4、MX3000、MX4000、RotorGene3000、RotorGene 6000 和 LightCycler480）不需要使用 ROX，则用水替代。注:仅 ABI7500、7700 和 7900 仪器需要使用 ROX 作为对照，其他荧光PCR仪器（如 iCycler IQ、MJ Option、MJ Chromo4、MX3000、MX4000、RotorGene3000、RotorGene 6000 和 LightCycler480）不需要使用 ROX，则用水替代。注:仅 注:仅 注:仅 ABI7500ABI7500ABI7500、、、7700 7700 7700 和 和 和 7900 7900 7900 仪器需要使用 仪器需要使用 仪器需要使用 ROX ROX ROX 作为对照，其他荧光作为对照，其他荧光作为对照，其他荧光PCRPCRPCR仪器（如 仪器（如 仪器（如 iCycler IQiCycler IQiCycler IQ、、、MJ OptionMJ OptionMJ Option、、、MJ Chromo4MJ Chromo4MJ Chromo4、、、MX3000MX3000MX3000、、、MX4000MX4000MX4000、、、RotorGene3000RotorGene3000RotorGene3000、、、RotorGene 6000 RotorGene 6000 RotorGene 6000 和 和 和 LightCycler480LightCycler480LightCycler480）不需要使用 ）不需要使用 ）不需要使用 ROXROXROX，则用水替代。，则用水替代。，则用水替代。

1. 盖上盖子后上机，按下面参数进行PCR（具体PCR参数可以根据仪器不同而自行优化）。

盖上盖子后上机，按下面参数进行PCR（具体PCR参数可以根据仪器不同而自行优化）。

盖上盖子后上机，按下面参数进行PCR（具体PCR参数可以根据仪器不同而自行优化）。盖上盖子后上机，按下面参数进行PCR（具体PCR参数可以根据仪器不同而自行优化）。盖上盖子后上机，按下面参数进行PCR（具体PCR参数可以根据仪器不同而自行优化）。盖上盖子后上机，按下面参数进行PCR（具体盖上盖子后上机，按下面参数进行PCR（具体盖上盖子后上机，按下面参数进行PCR（具体PCRPCRPCR参数可以根据仪器不同而自行优化）。参数可以根据仪器不同而自行优化）。参数可以根据仪器不同而自行优化）。

过程	温度	时间
预变性	92℃	5 分钟
PCR 反应（35 个循环）	94℃	60 秒
	50℃	60 秒
	72℃	60 秒

过程温度时间预变性92℃5 分钟PCR 反应（35 个循环）94℃60 秒50℃60 秒72℃60 秒过程温度时间过程过程过程过程过程过程过程过程温度温度温度温度温度温度温度温度时间时间时间时间时间时间时间时间预变性92℃5 分钟预变性预变性预变性预变性预变性预变性预变性92℃92℃92℃92℃92℃92℃92℃5 分钟5 分钟5 分钟5 分钟5 分钟5 分钟5 分钟PCR 反应（35 个循环）94℃60 秒PCR 反应（35 个循环）PCR 反应（35 个循环）PCR 反应（35 个循环）PCR 反应（35 个循环）PCR 反应（PCR 反应（PCR 反应（35 35 35 个循环）个循环）个循环）94℃94℃94℃94℃94℃94℃94℃60 秒60 秒60 秒60 秒60 秒60 秒60 秒50℃60 秒50℃50℃50℃50℃50℃50℃50℃60 秒60 秒60 秒60 秒60 秒60 秒60 秒72℃60 秒72℃72℃72℃72℃72℃72℃72℃60 秒60 秒60 秒60 秒60 秒60 秒60 秒 13. 数采集
具体操作按所用仪器推荐的流程进行。本产品中所含的荧光染料在不结合 DNA 时，最大吸收光谱在 471 nm，结合 DNA 时的最大吸收光谱在 500 nm，最大发射光谱在 530 nm。信号采集可以设置在复性或延伸步骤。
四、数据处理
14. 如果把本试剂盒用于定量检测，则以阳性对照浓度的 log 值为横轴，以 Ct 值为纵轴，绘制标准曲线。再以待测样品的 Ct 值从标准曲线上推算出样品 DNA 浓度的log 值，再推算出其浓度。
15. 如果把本试剂盒用于定性检测，只判断阳性或阴性，则阴性对照 Ct 必须大于或等于 40。阳性对照必须有荧光对数增长，有典型扩增曲线，Ct 值应该小于或等于30。对待测样品，如果其 Ct 大于或等于 40 则为阴性，如果小于或等于 35 则为阳性。如果在 35-40 之间，则重复一次。重复实验的 Ct 值如果大于或等于 40 则为阴性，如果小于 40，则为阳性。13. 数采集
具体操作按所用仪器推荐的流程进行。本产品中所含的荧光染料在不结合 DNA 时，最大吸收光谱在 471 nm，结合 DNA 时的最大吸收光谱在 500 nm，最大发射光谱在 530 nm。信号采集可以设置在复性或延伸步骤。
四、数据处理
14. 如果把本试剂盒用于定量检测，则以阳性对照浓度的 log 值为横轴，以 Ct 值为纵轴，绘制标准曲线。再以待测样品的 Ct 值从标准曲线上推算出样品 DNA 浓度的log 值，再推算出其浓度。
15. 如果把本试剂盒用于定性检测，只判断阳性或阴性，则阴性对照 Ct 必须大于或等于 40。阳性对照必须有荧光对数增长，有典型扩增曲线，Ct 值应该小于或等于30。对待测样品，如果其 Ct 大于或等于 40 则为阴性，如果小于或等于 35 则为阳性。如果在 35-40 之间，则重复一次。重复实验的 Ct 值如果大于或等于 40 则为阴性，如果小于 40，则为阳性。13. 数采集13. 数采集13. 数采集13. 数采集
具体操作按所用仪器推荐的流程进行。本产品中所含的荧光染料在不结合 DNA 时，最大吸收光谱在 具体操作按所用仪器推荐的流程进行。本产品中所含的荧光染料在不结合 DNA 时，最大吸收光谱在 具体操作按所用仪器推荐的流程进行。本产品中所含的荧光染料在不结合 DNA 时，最大吸收光谱在 471 nm471 nm471 nm，结合 ，结合 ，结合 DNA DNA DNA 时的最大吸收光谱在 时的最大吸收光谱在 时的最大吸收光谱在 500 nm500 nm500 nm，最大发射光谱在 ，最大发射光谱在 ，最大发射光谱在 530 nm530 nm530 nm。信号采集可以设置在复性或延伸步骤。。信号采集可以设置在复性或延伸步骤。。信号采集可以设置在复性或延伸步骤。
四、数据处理四、数据处理四、数据处理四、数据处理
14. 如果把本试剂盒用于定量检测，则以阳性对照浓度的 14. 如果把本试剂盒用于定量检测，则以阳性对照浓度的 14. 如果把本试剂盒用于定量检测，则以阳性对照浓度的 log log log 值为横轴，以 值为横轴，以 值为横轴，以 Ct Ct Ct 值为纵轴，绘制标准曲线。再以待测样品的 值为纵轴，绘制标准曲线。再以待测样品的 值为纵轴，绘制标准曲线。再以待测样品的 Ct Ct Ct 值从标准曲线上推算出样品 值从标准曲线上推算出样品 值从标准曲线上推算出样品 DNA DNA DNA 浓度的浓度的浓度的log log log 值，再推算出其浓度。值，再推算出其浓度。值，再推算出其浓度。
15. 如果把本试剂盒用于定性检测，只判断阳性或阴性，则阴性对照 15. 如果把本试剂盒用于定性检测，只判断阳性或阴性，则阴性对照 15. 如果把本试剂盒用于定性检测，只判断阳性或阴性，则阴性对照 Ct Ct Ct 必须大于或等于 必须大于或等于 必须大于或等于 404040。阳性对照必须有荧光对数增长，有典型扩增曲线，。阳性对照必须有荧光对数增长，有典型扩增曲线，。阳性对照必须有荧光对数增长，有典型扩增曲线，Ct Ct Ct 值应该小于或等于值应该小于或等于值应该小于或等于303030。对待测样品，如果其 。对待测样品，如果其 。对待测样品，如果其 Ct Ct Ct 大于或等于 大于或等于 大于或等于 40 40 40 则为阴性，如果小于或等于 则为阴性，如果小于或等于 则为阴性，如果小于或等于 35 35 35 则为阳性。如果在 则为阳性。如果在 则为阳性。如果在 35-40 35-40 35-40 之间，则重复一次。重复实验的 之间，则重复一次。重复实验的 之间，则重复一次。重复实验的 Ct Ct Ct 值如果大于或等于 值如果大于或等于 值如果大于或等于 40 40 40 则为阴性，如果小于 则为阴性，如果小于 则为阴性，如果小于 404040，则为阳性。，则为阳性。，则为阳性。